张秀明
- 作品数:80 被引量:149H指数:7
- 供职机构:南开大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金天津市应用基础与前沿技术研究计划天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生化学工程轻工技术与工程更多>>
- 铜绿假单胞菌最佳电转化条件的研究被引量:7
- 2004年
- 以临床分离的一株铜绿假单胞菌 (Pseudomonasaeruginosa)PA68作受体菌 ,将具有卡那霉素抗性标记的质粒pSMC2 8通过电转化导入到受体菌中 ,研究细胞生长状态、电击电压、细胞浓度、感受态细胞的贮备方式对转化效率的影响。结果表明 ,在细胞生长至OD5 40 =0 7~ 0 8时收集菌体 ,在低温 (2℃ )条件下 ,制备浓度为 10 11个细胞 mL的感受态细胞 ,在较高的电压 (2 6kV)电击下 ,能获得较高的转化效率。最高可达 1 68× 10 8个转化子 μgDNA(CFU μgDNA)。用此优化的转化条件 ,在国际上首次成功地将Mu转座复合物导入到P .aeruginosa中 ,并获得 2 4× 10 4 CFU μgDNA的高转化效率。由于Mu转座重组技术具有随机单点插入的优点 ,克服了传统转座子能在染色体上迁移的缺点 ,保证了表型的改变与转座子插入位点所在的基因突变的一一对应关系 ,为进一步研究P .aerugi
- 单志英徐海津施兴启聂舟遇言张秀明白艳玲乔明强高才昌
- 关键词:铜绿假单胞菌电转化
- 植物线粒体通用表达载体pSK-E-P/T构建及启动子活性鉴定
- 一种植物线粒体通用表达载体pSK-E-P/T构建及启动子活性鉴定。本发明首次发现黄瓜线粒体质粒pC3(序列1),在此基础上,通过PCR获得黄瓜线粒体基因cob上游启动子序列(序列2)及基因atp9下游终止子序列(序列3)...
- 白艳玲周腊梅董荣徐海津张秀明乔明强
- 文献传递
- 黄瓜线粒体线形类质粒pC4的核酸序列和性质被引量:2
- 2001年
- 津研四号黄瓜线粒体中除了主环DNA外, 还有4种类质粒(pC1, pC2, pC3, pC4). 电子显微镜观察结果表明pC4为线形类质粒. 将pC4克隆至E. coli JM109中, 对pC4进行序列测定和分析. pC4全长370 bp, 是已知的植物线粒体类质粒中最短的. pC4富含AT, 有多个正向和反向重复序列, 其两端为 35 bp的正向重复序列. pC4中的ORF都较短, 不足以编码有功能的蛋白. 对pC4进行同源性检测, 发现pC4与线粒体主DNA和叶绿体DNA缺乏同源性, 而与核DNA有同源性. 在其他没有线粒体类质粒的黄瓜品种核基因组中也存在pC4的同源序列, pC4与黄瓜不同品种核基因组的杂交带型有一定差别.
- 李俊英闻颖达白艳玲付娟张秀明高才昌
- 关键词:黄瓜核酸序列同源性克隆
- 铜绿假单胞菌新基因PA0058插入失活对氨基糖苷类抗生素耐药性的影响被引量:1
- 2012年
- 【目的】铜绿假单胞菌是一种重要的条件致病菌,临床上常引起难治性和顽固性感染,随着各种抗生素的广泛使用,该菌对多种抗生素呈现耐药性,研究其耐药性机理有着重要意义。【方法】以一株临床分离株Pseudomonas aeruginosa PA68作为出发菌株,应用人工Mu转座技术构建突变文库并从中筛选得到一株对链霉素抗性明显增强的菌株M122,并对突变株M122进行测序分析及表型检测。通过Southern杂交实验证实转座子是否为单拷贝插入,对突变株M122的基因表达谱与野生型PA68菌株进行对比分析。【结果】确定了Mu转座子在M122基因组上为单拷贝插入,插入位点为基因PA0058的第214 bp处。对M122进行表型检测,发现其对多种氨基糖苷类抗生素的耐药性均得到增强,通过转入携带完整基因PA0058的表达质粒可以使突变株M122的耐药性有所降低,利用同源重组的方法,在模式菌株P.aeruginosa PAK中进行PA0058基因敲除,得到的敲除株具有链霉素耐药性升高的表型。基因PA0058的缺失引起多种基因表达水平改变,尤其是katB、ahpC、ahpF等抗氧化酶基因转录表达显著增高。【结论】首次发现铜绿假单胞菌PA0058基因的插入失活提高了细菌对氨基糖苷类抗生素的耐药性,且导致突变株M122中抗氧化酶基因转录表达水平的上调。
- 王雪涵刘力伟李明轩张秀明白艳玲徐海津乔明强
- 关键词:铜绿假单胞菌
- 喷雾干燥生产糖化酶粉剂的机理和工艺研究
- 张秀明高才昌李志新李兰岭
- 研究了糖化酶喷雾干燥一步成粉的新工艺。通过调节酶液pH值、添加稳定剂和除去菌体等,使喷雾干燥生产糖化酶酶活力的回收率达到62-68%,粉剂的含水量7%左右,简化了工艺,减少盐析方法的弊端,提高产品质量。这项技术在酶制剂工...
- 关键词:
- 关键词:糖化酶粉剂喷雾干燥酶制剂制备
- 食用真菌疏水蛋白的分离-性质与应用
- 乔明强徐海津于雷张宝华白艳玲张秀明崔怡
- 该研究利用真菌疏水蛋白具有在两相界面处自我装配成膜的特殊性质,这是它含有很多潜在的应用—在食品制造业上,疏水蛋白作为一种安全的表面活性剂,可改善食品对抗相变能力在不通气状态下形成稳定泡沫;在果蔬保鲜方面,疏水蛋白可以在果...
- 关键词:
- 关键词:灰树花基因
- 乳酸链球菌素的中试发酵
- 张秀明乔明强高才昌唐志天李绍昌梁同春
- 经过三年多的研究,通过对发酵培养基配方的筛选及发酵工艺的改进,研究了工业原料、种龄、接种量、搅拌速度、温度和pH等对NISIN发酵效价和发酵周期的影响,观察了发酵过程中菌浓度、pH、NISIN效价和残糖的变化规律。在实验...
- 关键词:
- 关键词:乳酸链球菌素中试发酵
- Production and regulation of bacteriocin subtilosin A in the purL mutant of Bacillus amyloliquefaciens
- Bacteriocins encompass a wide family of ribosomally synthesized and proteinaceous anti-microbial peptides prod...
- 刘全力高光徐海津白艳玲张秀明乔明强
- 文献传递
- 铜绿假单胞菌鞭毛运动相关基因PA2950及应用
- 本发明公开了铜绿假单胞菌鞭毛运动相关基因PA2950。属于微生物生物技术领域。本发明与铜绿假单胞菌致病性的研究息息相关,此基因大小为1197bp,国际上对该基因的功能没有报道。实验发现该基因的缺失能够使鞭毛介导的泳动能力...
- 乔明强白芳白艳玲张秀明徐海津李迎丽
- 文献传递
- 铜绿假单胞菌基因pfm影响密度感应系统
- 铜绿假单胞菌广泛存在于环境中,是医院内常见的三大致病菌之一,常引起临床上的难治性反复性感染。铜绿假单胞菌密度感应系统(QS系统)控制着下游很多基因的表达,是基因表达调控的重要系统,与铜绿假单胞菌毒力密切相关。本文针对前期...
- 牟锐白芳王雪涵徐海津张秀明白艳玲乔明强
- 文献传递