张春鸿
- 作品数：16 被引量：36H指数：5
- 供职机构：温州医学院附属第一医院更多>>
- 发文基金：浙江省科技计划项目温州市科技局科研基金浙江省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Hsa-miR-15a/16-1靶向抑制Bcl-2基因对鼻咽癌CNE-2细胞的抑制作用
- 目的观察hsa-miR-15a/16-1靶向抑制Bcl-2基因表达对人鼻咽癌细胞系CNE-2细胞生长的抑制作用。方法将构建成功的重组质粒pENTR-CMV-EGFP-hsa-mir-15a/16-1经Lipofectam...
- 张春鸿方潇碧林森施清圆吴丽萍黄振校刘继丽方渭清廖志苏黄振校
- 文献传递
- 初发鼻咽癌差异基因的染色体定位及功能分析被引量：6
- 2010年
- 目的利用基因芯片技术探索初发鼻咽癌(primary nasopharyngeal carcinoma,pNPC)与鼻咽黏膜慢性炎症组织(chronic nasopharyngitis tissue)差异基因的染色体定位和功能分析。方法用Affymetrix Gene1.0ST芯片检测pNPC与鼻咽黏膜慢性炎症组织基因表达谱差异,并利用生物信息学方法对差异基因进行染色体定位和功能分析。结果差异倍数3倍以上共有102个基因,其中表达上调25个,表达下调77个;差异基因染色体定位分析,发现5个差异基因未知其定位,其余97个差异基因在1号染色体上分布最多,包含16个,其次为3号染色体,包含13个;从差异基因功能分类看,属于酶活性基因最多,其余依次为蛋白结合、免疫、钙黏合等,以上4大类共占差异基因总数65.6%。结论 pNPC差异基因散在分布在各染色体,以1、3号染色体最多;4大类(酶活性、蛋白结合、免疫相关、钙黏合)相关基因异常在癌变过程中发挥重要作用。
- 林森黄振校李文峰张春鸿方潇碧廖志苏
- 关键词：基因表达谱染色体定位分子功能
- 慢性鼻-鼻窦炎患者的肺功能及其相关性分析被引量：7
- 2014年
- 目的探讨慢性鼻-鼻窦炎(CRS)患者的肺功能及其相关性。方法对43例慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉(CRSwNP)(CRSwNP组)、17例慢性鼻-鼻窦炎不伴鼻息肉(CRSsNP)(CRSsNP组)及50例非CRS患者(对照组)进行肺功能检查,比较3组差别。CRSwNP和CRSsNP组患者进行支气管激发或舒张试验,应用视觉模拟评分、鼻腔-鼻窦结局测试20条、Lund-Mackay CT评分、Lund-Kennedy内镜评分等评估疾病严重程度;利用直线或秩相关与多元线性回归分析其肺功能与上述指标的相关性。结果 CRSwNP组患者第1秒用力呼气量(FEV1)、用力呼气中段流量(FEF25-75)显著高于CRSsNP和对照组患者(P<0.05),而CRSsNP和对照组间差别无统计学意义。然而峰值呼气流速(PEF)在3组间差异无统计学意义。3组中吸烟和不吸烟患者间3项指标差异无统计学意义。相关分析显示,CRSwNP组患者中FEV1与外周血嗜酸性粒细胞计数(PEC)、病程呈负相关(r1=-0.351,P1=0.021;r2=-0.343,P2=0.024),PEF与病程呈负相关(r=-0.330,P=0.031),而FEF25-75与上述指标无显著相关。CRSsNP组中FEV1、PEF、FEF25-75与上述指标均无显著相关。CRSwNP组中支气管激发和舒张试验阳性率较低,分别为11.11%和0.00%,CRSsNP组中均为0.00%。此外,多元线性回归分析显示CRSwNP组中支气管激发或舒张试验前后FEV1变异率与PBEC呈线性相关(R2=0.318,P<0.05),CRSsNP组中FEV1变异率与年龄、PBEC、病程、鼻窦手术次数呈线性相关(R2=0.893,P<0.05)。结论 CRS引起最大通气及小气道功能损害与鼻息肉的存在有关,与吸烟无关,CRSwNP患者中通气功能损害与PBEC、病程正相关,且PBEC是FEV1变异率的独立预测指标。而CRSsNP患者中肺功能与上述指标无显著相关,但年龄、PBEC、病程及鼻窦手术次数是其FEV1变异率的独立预测指标。
- 张露张春鸿方潇碧黄振校施清圆吴丽萍武鹏王珍珍张彩銮廖志苏
- 关键词：慢性鼻-鼻窦炎肺功能气道高反应性支气管激发试验
- 一种复发鼻咽癌基因芯片检测试剂盒
- 本发明属于鼻咽癌复发检测技术领域，提供了一种复发鼻咽癌基因芯片检测试剂盒，通过采取临床病人外周血中的DNA，利用PCR进行核酸扩增而获得大量的DNA序列，并与制备好的复发鼻因癌相关基因芯片试剂盒进行杂交，通过信号扫描，获...
- 廖志苏林森李文峰林才方潇碧张春鸿黄振校施清圆吴丽萍夏卫东
- 文献传递
- 复发鼻咽癌差异基因分析及染色体定位初步研究被引量：3
- 2010年
- 目的通过基因芯片和生物信息学来筛选复发鼻咽癌（recurrent nasopharyngeal carcinoma，rNPC）差异基因及染色体定位和功能分析。方法选择初发鼻咽癌（primary nasopharyngeal carcinonla，pNPC）和rNPC，应用Affymetrix Genel．0ST芯片筛选差异基因；应用生物信息学对差异基因进行染色体定位和功能分析。结果差异基因共44个，其中下调基因36个，上调基因8个。基因功能分类显示，下调基因大部分属于酶活性基因（10个，27．8％），其次为钙黏合基因（7个，19．4％）、蛋白结合基因（5个，13．9％），这3类基因占了下调基因总数的61．1％，另外，受体活性基因（4个，11．1％），转录因子基因和三磷酸腺苷黏合基因各2个（各占5．6％），细胞外基质黏合基因和生长因子黏合基因各1个（各占2．8％），4个基因的功能未知（11．1％）；上调基因中，3个基因的功能未知（37．5％），酶活性基因（2个，25．O％），受体活性、钙黏合、电压门压通道调控基因各1个，各占12．5％。这些差异基因分布在大多数染色体上，主要分布在1和17号染色体上。1号染色体上包含10个基因（22．7％），17号染色体包含5个基因（11．3％）。结论差异基因分布在大多数染色体上，但主要分布在1和17号染色体上，酶活性、钙黏合及蛋白结合基因这三类差异基因可能在rNPC中扮演着重要的角色，需要进一步深入研究。
- 黄振校李文峰林森黄亚杜季梅谭映霞方潇碧张春鸿方渭清廖志苏
- 关键词：鼻咽肿瘤肿瘤复发寡核苷酸序列分析染色体定位
- miR-15a/16-1慢病毒表达载体的构建及鉴定
- 2014年
- 目的:构建miR-15a/16-1过表达慢病毒载体,并对其进行病毒包装、鉴定、滴度测定与感染靶细胞。方法:利用PCR法钓取miR-15a/16-1序列片段;将目的基因miR-15a/16-1克隆到慢病毒载体LV3中,经双酶切及测序鉴定并大量抽提;利用脂质体将重组质粒和包装质粒pGag/Pol、pRev、pVSV-G共转染293T细胞包装产生慢病毒。收集病毒悬液梯度稀释,感染293T细胞进行病毒滴度检测;将所得慢病毒感染靶细胞。结果:酶切与测序结果证明成功构建重组质粒,并成功包装成慢病毒,实验组病毒滴度为1×109 TU/ml,对照组病毒滴度为2×109 TU/ml。慢病毒成功感染靶细胞,其转染效率可达到80%左右。结论:成功构建miR-15a/16-1慢病毒表达载体,可获得高效miR-15a/16-1的慢病毒颗粒。
- 张春鸿方潇碧张露王珍珍武鹏廖志苏
- 关键词：慢病毒293T细胞绿色荧光蛋白
- 晚期喉咽癌术后综合治疗的疗效及生存分析
- 目的评价晚期喉咽癌术后辅助综合治疗的疗效,探讨提高喉咽癌患者的生活质量及生存率的方法。资料与方法76例男性Ⅲ-Ⅳ期喉咽癌患者接受术后辅助治疗,其中44例进行术后单纯放疗,其余32例接受术后同步放化疗。结果通过Kaplan...
- 施清圆张春鸿方潇碧吴丽萍张露廖志苏李文峰李刚
- 文献传递
- Has--miR--15a/16--1介导的靶向Bcl--2基因抑制对鼻咽癌CNE--2细胞生长的影响
- 张春鸿
- 晚期喉咽癌术后综合治疗的疗效及生存分析被引量：5
- 2013年
- 目的:评价晚期喉咽癌术后辅助综合治疗的疗效,探讨提高喉咽癌患者生活质量及生存率的方法。方法:76例男性Ⅲ～IV期喉咽癌患者接受术后辅助治疗,其中44例进行术后单纯放疗,32例接受术后同步放化疗。结果:通过Kaplan-Meier法进行生存分析,其中术后单纯放疗组患者5年总生存率为25.9%,术后同步放化疗组为27.8%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。术后单纯放疗组3年和5年的肿瘤无复发生存率分别为36.0%和22.5%,而术后同步放化疗组分别为68.0%和45.3%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。按照NCI.CTC3.0版标准评价,两组的毒性反应主要有疲乏、白细胞减少、血小板下降、局部皮肤发红脱屑、脱发等,C3/4级的毒副反应共有14例,其中9例肺部感染,2例为放射性头痛,3例为白细胞及血小板下降。术后单纯放疗组及术后同步放化疗组的C3/4级毒副反应分别为6例和8例,两组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:对于晚期喉咽癌,术后同步放化疗相比于术后单纯放疗可以提高患者无复发生存率,改善生活质量,同时并没有增加患者治疗的毒副反应。
- 施清圆李文峰李刚张春鸿方潇碧吴丽萍张露廖志苏
- 关键词：喉咽肿瘤同步放化疗生存率
- Hsa-miR-15a/16-1靶向抑制Bcl-2基因对鼻咽癌CNE-2细胞的抑制作用被引量：2
- 2011年
- 目的观察Hsa-miR-15a/16-1靶向抑制B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(B-cell lymphoma gene 2,Bcl-2gene)表达对鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)CNE-2细胞的生长抑制作用。方法将构建成功的重组质粒pENTR-CMV-EGFP-hsa-mir-15a/16-1经Lipofectamine 2000转染CNE-2细胞,RT-qPCR检测miR-15a/16-1、Bcl-2 mRNA表达水平,流式细胞术和WesternBlot检测Bcl-2、caspase-3蛋白表达水平,CCK-8法分析细胞生长抑制情况,4,6-二脒基-2-苯基吲哚(4,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)染色观察细胞凋亡状况。结果转染后miR-15a表达增高(F=547.525,P均<0.001);miR-16-1表达增高(F=99.979,P均<0.001);Bcl-2 mRNA表达无明显差别(F=0.220,P>0.05);Bcl-2蛋白表达下调,caspase-3蛋白表达增高;细胞在体外凋亡明显;细胞增殖受到抑制,作用呈明显的时效关系。结论 Hsa-miR-15a/16-1对Bcl-2基因的靶向抑制,可体外对CNE-2细胞产生增殖抑制和促进凋亡作用。
- 张春鸿方潇碧林森黄亚施清圆吴丽萍黄振校蒋磊谭映霞廖志苏
- 关键词：鼻咽肿瘤转染流式细胞术
