宋悦 作品数:39 被引量:154 H指数:8 供职机构: 中国医科大学附属盛京医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 卫生部科技专项基金 辽宁省科学技术计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
人端粒酶逆转录酶启动子调控下胞嘧啶脱氨酶胸苷激酶融合基因治疗卵巢癌的体外研究 被引量:18 2004年 目的 探讨人端粒酶逆转录酶 (hTERT)启动子调控下的融合双自杀基因———胞嘧啶脱氨酶 胸苷激酶 / 5 氟胞嘧啶 +更昔洛韦 (CD TK/ 5 FC +GCV)系统对人卵巢癌细胞及正常细胞的体外杀伤作用。方法 应用脂质体转染法将hTERT核心启动子报告质粒pBTdel 2 79转染人卵巢癌细胞系3AO、正常卵巢上皮细胞 (NOEC)和人胚肺成纤维细胞株HELF ,用荧光素酶分析检测hTERT启动子活性 ;应用RT PCR技术检测hTERTmRNA的表达水平。应用基因克隆技术分别构建hTERT启动子和巨细胞病毒 (CMV)启动子调控下的CD TK基因真核表达载体pBTdel 2 79 CD TK和pcDNA3 CD TK ,以及hTERT启动子调控下的TK基因表达载体pBTdel 2 79 TK。用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)法和流式细胞术检测pBTdel 2 79 CD TK/ 5 FC +GCV系统和pcDNA3 CD TK/ 5 FC +GCV系统对上述 3种细胞不同的杀伤作用 ;应用RT PCR技术检测pBTdel 2 79 CD TK和pcDNA3 CD TK转染前后 3AO和NOEC细胞中CD和TK基因的表达情况。用扫描电子显微镜观察pBTdel 2 79 CD TK/ 5 FC +GCV作用后 3AO细胞的形态变化。结果 卵巢癌细胞系 3AO中hTERT启动子活性增高 ,为 2 4 1% ,RT PCR检测hTERTmRNA为阳性 ,而在正常细胞NOEC和HELF中 ,hTERT启动子活性仅为 0 3%和 0 7% ,hTERTmRNA为阴性。 孔北华 宋悦 马道新 曲迅 江森关键词:人端粒酶逆转录酶 胞嘧啶脱氨酶 胸苷激酶 基因治疗 卵巢癌 体外研究 心理行为护理联合生物反馈电刺激治疗对女性膀胱过度活动症疗效观察 王丹 宋悦宫颈癌细胞系中hTERT启动子水平及其与端粒酶活性相关性的研究 2003年 目的:探讨宫颈癌细胞系中人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子的活性及其与hTERT mRNA表达和端粒酶活性之间的关系。方法:应用脂质体转染法将hTERT核心启动子基因转入宫颈癌细胞系Hela和正常人皮肤表皮细胞中,并用荧光素酶检测实验检测其中hTERT启动子的活性;应用RT-PCR半定量法检测2种细胞中的hTERT mRNA表达水平:应用PCR-ELISA定量检测这2种细胞中的端粒酶活性。同时以端粒酶阳性的永生化人胚肾成纤维细胞系HEK293的检测结果作为阳性对照,以端粒酶阴性的人胚肺成纤维细胞系HELF的检测结果作为阴性对照。结果:宫颈癌细胞系HeLa和正常人皮肤表皮细胞中的hTERT启动子活性(视每种细胞中pGL3一control的启动子活性为100%)分别为20.1%和0.3%;hTERT mRNA相对表达水平分别为0.63和0(视HEK293表达水平为1):端粒酶活性分别为0.393和0.144(视>0.2为阳性)。结论:宫颈癌细胞系中hTERT启动子活性、hTERT mRNA表达水平和端粒酶活性均特异性增高,而正常皮肤表皮细胞中则受抑制或不表达。hTERT启动子活性水平与hTERT mRNA表达水平及端粒酶活性之间有显著相关性。 宋悦 孔北华 刘培淑 马道新 江森关键词:人端粒酶逆转录酶 启动子 HTERT 端粒酶活性 皮肤表皮细胞 子宫切除术后发生盆底功能障碍性疾病相关临床不适的非条件Logistic回归分析 目的:探索子宫切除术与盆底功能障碍性疾病的相关性.方法:采用盆腔脏器脱垂问卷调查对流行病学调查的这272例患者进行问卷调查随访.对其中出现POP患者的临床资料进行系统的统计学分析.采用x 2检验,Kappa一致性检验,二... 黄艳 宋悦前盆腔脏器脱垂的研究进展 被引量:5 2018年 前盆腔脏器脱垂病因复杂,脱垂形式多种多样,治疗方式不断改进,且其在各种盆腔脏器脱垂中发病率最高,严重困扰女性日常生活。随着人们对生活质量要求逐渐提高,前盆腔脏器脱垂的研究受到广泛重视。前盆腔脏器脱垂由阴道前壁支持组织的薄弱或损伤所导致,主要与高龄、分娩次数和肥胖有关,临床上主要通过患者的临床表现、脱垂定量(pelvic organ prolapse quantitation,POP-Q)评分及盆底超声等辅助检查来评估病情,诊断时需对中央缺陷与阴道旁缺陷、前膀胱脱垂与后膀胱脱垂进行鉴别,治疗方式包括了手术治疗与非手术治疗,本文将对以上内容进行综述,以期为临床的诊断及治疗提供依据。 谢娇 宋悦关键词:发病机制 超声检查 小分子细胞周期素依赖性蛋白激酶抑制剂flavopiridol联合泰素治疗卵巢癌的实验研究 被引量:1 2010年 目的:检测flavopiridol联合泰素对人卵巢癌细胞系SKOV3、裸鼠人卵巢癌皮下及腹腔移植瘤模型的治疗作用。方法:应用CCK-8法、流式细胞术和原位细胞凋亡检测法(TUNEL)检测flavopiridol和泰素作用后卵巢癌细胞系SKOV3的细胞存活率和凋亡率;应用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)检测作用前后细胞中cyclinD1的表达:应用ELISA法检测细胞中活性caspase-3的表达。建立裸鼠人卵巢癌皮下及腹腔移植瘤模型,观测flavopiridol和泰素治疗前后裸鼠肿瘤体积的变化并计算抑瘤率,用TUNEL和免疫组化法分别检测作用前后肿瘤组织中的凋亡情况和微血管密度(MVD)值。结果:flavopiri-dol(300nmol/L)或泰素(1μmol/L)单独应用24h均能显著降低细胞存活率,增强caspase-3活性,诱导细胞凋亡,并下调细胞中cyclinD1的表达。Taxol先作用24h再用flavopiridol作用24h的联合用药对二者的上述作用产生显著的协同效应:联合用药后细胞存活率为(5.2±0.8)%,凋亡率为(51.10±2.52)%,caspase-3活性相对值为0.602±0.008,cy-clinD1相对表达水平为0.264±0.076。Flavopiridol和泰素单独应用均能显著抑制皮下移植瘤生长(抑瘤率分别为84.5%和85.7%),并降低肿瘤组织MVD值(分别为12.4±4.7vs 35.2±10.3和15.2±2.9 vs 35.2±10.3)。二者联合应用抑瘤作用稍差(抑瘤率68.9%),抑制MVD作用(23.0±5.1 vs 35.2±10.3)也不及单药治疗。结论:Flavopiridol和泰素均能通过致凋亡作用显著抑制卵巢癌细胞及移植瘤生长,二者联合应用对体外培养的卵巢癌细胞具有协同杀伤作用,但体内治疗中无协同抑瘤作用。 宋悦 汤萍萍 沈铿 徐锋关键词:抑制剂 FLAVOPIRIDOL 泰素 卵巢肿瘤 Bmi-1蛋白在上皮性卵巢癌组织中的表达及临床意义 目的研究Bmi-1蛋白在上皮性卵巢癌组织中的表达,探讨其与上皮性卵巢癌的临床病理特征的关系。方法选取中国医科大学附属盛京医院病理科2009年12月至2011年7月存档的石蜡病理标本,经病理确诊的原发性上皮性卵巢癌60例,... 张晓云 宋悦关键词:上皮性卵巢癌 BMI-1 阳性表达 文献传递 点阵激光用于常见外阴色素减退性疾病治疗的专家共识 被引量:8 2021年 医用激光用于临床诊疗已有60多年的历史。自1983年选择性光热作用理论和2004年局灶性光热作用理论提出之后[1-2],点阵激光(fractional laser, FL)相继出现,并迅速应用于皮肤美容科、口腔科及眼科等。点阵激光是利用一些特殊技术,使激光发射成点阵式排列的微小激光光束,每一个细小光束作用于组织后,形成一个三维柱状微热损伤区(microscopic thermal zone,MTZ),在MTZ周围保留未被激光作用的组织。 李静然 张晓薇 隋龙 丁文蕴 胡越 韩璐 宋悦 陈勇军 夏志宽 李田 王鲁文 李环 苗娅莉 龙笑 徐丽珍 李小毛 孙秀丽 王建六关键词:激光作用 激光发射 点阵激光 点阵式 医用激光 热损伤 原发性盆腔腹膜后肿瘤的诊治进展 被引量:9 2013年 原发性盆腔腹膜后肿瘤(primary pelvic retropritoneal tumor,PPRT)是一种罕见的起源于骶前间隙不同组织结构的肿瘤。由于此间隙包含多种胚胎残留组织,故其病理分类复杂,良性肿瘤所占比例较高,临床表现缺乏特异性。超声、计算机断层扫描(CT)和磁共振(MRI)等影像学检查有助于术前诊断及决定手术方式。手术切除是目前最主要的治疗方法,对侵犯脏器者应采用联合脏器切除。肿瘤分化程度及是否完整切除肿瘤是决定PPRT预后的主要因素。 辛星 夏志军 宋悦关键词:盆腔肿瘤 腹膜后肿瘤 病理学 人端粒酶逆转录酶启动子调控下活性半胱氨酸蛋白酶-3治疗人卵巢癌 被引量:2 2007年 目的构建人端粒酶逆转录酶启动子(hTERTp)调控下的活性半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)重组腺病毒载体并检测其对人卵巢癌的治疗作用。方法构建表达 hTERTp 调控下活性caspase-3的重组腺病毒载体 AdHT-rev-casp3;以 CMV 启动子调控下活性 caspase-3的重组腺病毒载体Ad-rev-casp3为对照,分别应用 Western 印迹、细胞计数试剂盒(CCK-8)法、流式细胞术和 TUNEL 检测AdHT-rev-casp3作用后卵巢癌细胞系 AO 及正常人脐静脉内皮细胞 HUVEC 中活性 caspae-3蛋白 p17和聚腺苷二磷酸-核糖多聚酶(PARP)裂解片段 p85的表达水平、细胞存活率和凋亡率;建立裸鼠人卵巢癌皮下及腹腔移植瘤模型,Western 印迹检测 AdHT-rev-casp3作用后裸鼠肿瘤及肝脏组织中活性caspase-3的表达情况,观测作用前后裸鼠生存率及肿瘤体积的变化以及裸鼠体内肝酶 ALT 和 AST 水平。结果 AO 细胞在 AdHT-rev-casp3(MOI=70)感染后明显表达活性 caspase-3蛋白 p17和 PARP 的裂解片段 p85蛋白,细胞存活率为55%,凋亡率为26%,而 HUVEC 在 AdHT-rev-casp3感染后无明显p17和 p85表达,细胞存活率和凋亡率与阴性对照组差异无统计学意义;AdHT-rev-casp3作用后的裸鼠肿瘤组织中明显表达活性 caspase-3,而肝脏组织中则无表达;AdHT-rev-casp3能明显延长荷瘤裸鼠的生存期[(177±12)d vs(106±11)d],抑瘤率为60%,其作用后裸鼠体内的肝酶水平无明显增高。结论 hTERTp 系统调控下 rev-caspase-3的重组腺病毒 AdHT-rev-casp3同时具有较强的致细胞凋亡能力和肿瘤靶向性,能明显抑制卵巢癌移植瘤的生长,延长荷瘤裸鼠的生存期,并明显降低 rev-caspase-3对肝脏的毒性作用。 宋悦 沈铿 于靖蓉关键词:CASPASE类