孙雨龙
- 作品数：9 被引量：11H指数：2
- 供职机构：复旦大学化学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术委员会资助项目更多>>
- 相关领域：生物学理学更多>>
- 细胞色素b_5 Glu44、Glu56的定点突变和蛋白质结构比较被引量：3
- 1996年
- 用寡聚核苷酸定点突变的方法将牛肝细胞色素ｂ５基因（编码亲水结构域８２个残基）上第４４位和５６位谷氨酸的密码子ＧＡＡ变成丙氨酸的密码子ＧＣＴ，获得突变体Ｅ４４Ａ、Ｅ５６Ａ和Ｅ４４／５６Ａ的基因。将它们分别克隆于ｐＵＣ１９上，转化大肠杆菌ＪＭ８３后，突变基因得到成功的表达。将含细胞色素ｂ５及其突变体基因的大肠杆菌发酵，酶法裂解细菌，依次用硫酸铵沉淀法、离子交换柱层析、凝胶柱层析进行分离纯化蛋白。用Ｃｈｏｕ－Ｆａｓｍａｎ法、紫外可见光谱、圆二色谱研究蛋白质，发现定点突变细胞色素ｂ５表面上这２个氨基酸残基对蛋白质的局部二级结构无明显影响。
- 孙雨龙王韵华周刚黄仲贤谢毅吴小舟
- 关键词：细胞色素B5定点突变蛋白质结构膜蛋白
- 富勒烯的提取及分离
- 1994年
- 本文用柱色层法研究了C_(60)混合物的提取及分离,并对影响C_(60)企分分离的条件进行了有益的探讨.
- 刘二保孙雨龙
- 关键词：富勒烯
- 全文增补中
- C_(60)与亲核试剂的反应被引量：2
- 1994年
- Kroto等1985年发现C_(60)并提出C_(60)笼形结构模型,但对C_(60)进行大量深入的研究是在Kratschmer等人报道了制备克级C_(60)方法之后迅速开展的.由于C_(60)中每个碳原子所处的物理环境相同,因此在对C_(60)进行化学修饰的过程中,控制修饰基团的数目及其在C_(60)上的位置并不容易.尽管在C_(60)化学修饰方面已有不少工作,但目前只报道了很少几个纯的C_(60)衍生物,报道的产物绝大多数是混合物,如Krusic等利用光化学反应,合成了含有多个烷基的C_(60)衍生物:C_(60)(CH_3)_n(n=1—34)和C_(60)(CH_2C_6H_5)_n.(n=1—15);
- 黄祖恩孙雨龙蔡瑞芳
- 关键词：亲核试剂碳60加成反应
- C_（60）加合物在紫外激光作用下碳笼负离子的碎裂和生长被引量：2
- 1994年
- 本文首次利用激光脱附Ｃ（６０）烃基加合物，发现在负离子通道中碳笼不同寻常的碎裂和生长现象。我们详细分析了其形成机理，认为以价键与Ｃ_（６０）结合的自由基起着很重要的作用．这同样亦开辟了打开碳笼及合成巨富勒烯的一种途径．
- 朱雷王深义吕建中李郁芬孙雨龙蔡瑞芳黄祖恩
- 关键词：紫外激光
- C_(60),C_(70)的烷基化被引量：1
- 1993年
- 1985年,Kroto等人发现C_(60)、C_(70)等富勒烯,并提出C_(60)的结构模型,但是直到Kratschmer等报道用电弧放电法制备克级富勒烯后,富勒烯化学反应性能的研究才迅速展开。Bausch等将金属锂与C_(60)/C_(70)作用后,再与过量碘甲烷反应,得到甲基化富勒烯衍生物,甲基数目可以从1到24。
- 孙雨龙黄祖恩蔡瑞芳卫景德陈健王建伟于泳刘二保方道腴
- 关键词：二碘化钐烷基化
- 两种细胞色素b_5水溶性结构域的性质结构比较
- 1999年
- 分别将编码牛肝微粒体细胞色素b5水溶性结构域片段Ala7－Arg88和Ser5－Ser97基因在大肠杆菌JM83中高效表达，分离纯化后得到Tb5和Lb52种重组野生型蛋白．用核磁共振、紫外可见光谱、圆二色散光谱、循环伏安等方法研究结果表明，Lb5肚链2端残基未能使蛋白质的血红素周围环境与Tb5之间产生明显差异，但热变性和尿素变性行为的比较结果都表明Lb5较Tb5稳定，这些稳定性差异，主要由Lb5蛋白质N末端的Ser5和Lys62个残基所贡献．
- 孙雨龙王文虎黄燕王韵华谢毅吴小舟黄仲贤
- 关键词：细胞色素B5
- 电喷雾电离质谱测定细胞色素b_5及其定点突变蛋白
- 1997年
- 本文利用电喷雾电离质谱技术对胰蛋白酶酶解的细胞色素b_5蛋白Tb_5及脂肪酶酶解的细胞色素b_5蛋白Lb_5及它们的定点突变蛋白共八个样品的分子量进行精确测定,证实定点突变的试验是成功的.
- 徐永珍张一兵孙雨龙王韵华黄仲贤
- 关键词：细胞色素B5分子量
- 细胞色素b_5与细胞色素c的结合
- 1996年
- 生物大分子之间的结合和识别是生命活动中最基本的过程,研究细胞色素b_5和细胞色素c的结合,有助于认识生物大分子之间的相互作用和生物体中的长程电子转移反应.Mauk等人利用紫外可见差谱研究了细胞色素b_5和细胞色素c之间的相互作用,发现两者形成1:1的蛋白络络合物.计算机模拟结果表明牛肝细胞色素b_5和酵母iso-1-细胞色素c有两种主要的结合方式:一种是细胞色素b_5上的Glu44,Glu48,Asp60和血红素b上的丙酸根依次与细胞色素c上的Lys27,Arg13,Tml 72(trimethyllysine)和Lys79形成盐键;另外一种结合方式是细胞色素b_5上的Glu48,Glu56,Asp60和血红素b丙酸根与细胞色素c上的Arg13(或者Lys 13),Lys 87,Lys 86和Tml 72形成盐键.Rodgers和Sligar用高压法结合定点突变技术研究了牛肝细胞色素b_5和马心细胞色素c之间的结合,证明细胞色素b_5是通过第一种方式与细胞色素c结合,而Glu56并没有参与蛋白间的结合.
- 孙雨龙王韵华谢毅黄仲贤
- 关键词：细胞色素B5细胞色素C相互作用
- 全文增补中
- 细胞色素b_5 Phe35定点突变后对蛋白质结构和性质的影响被引量：3
- 1998年
- 牛肝氧化态细胞色素b5以及Tyr35,Leu35突变体蛋白的尿素变性动力学研究表明Tyr35突变体比野生型稳定 ,而Leu35突变体经历了与野生型、Tyr35突变体不同的蛋白变性机理 .这可能是由于Leu35的侧链体积比Phe35小 ,在蛋白内部形成的空穴为尿素分子进入疏水腔提供了通道 .细胞色素b5与细胞色素c结合常数的测定结果表明细胞色素b5与细胞色素c在溶液中形成了 1∶1蛋白复合物 .其结合常数分别为4 2 (± 0 0 1)× 10 6(野生型 ) ,3 7(± 0 0 1)× 10 6(Tyr35) ,4 7(± 0 0 1)× 10 6(Leu35) (I =1mmol/L磷酸缓冲液 ,pH =7 0 ,2 5℃ ) ,这说明
- 姚萍王韵华孙雨龙谢毅黄仲贤
- 关键词：细胞色素B5细胞色素C定点突变蛋白质
