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貂源铜绿假单胞菌的分离鉴定及其环介导等温扩增检测方法的建立: 水貂出血性肺炎是由铜绿假单胞菌感染引起的一种以发病水貂呼吸困难、口鼻流血为主要特征的烈性传染病，发病急、死亡快、呈地方性流行，已成为危害我国水貂养殖业最严重的细菌性传染病之一，给广大水貂养殖户造成了巨大的经济损失，因此开...; 孙见; 关键词：铜绿假单胞菌药敏试验环介导等温扩增; 文献传递

猪繁殖与呼吸综合征血清学检测技术研究进展被引量：1: 2012年; 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)又称蓝耳病,是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的以妊娠母猪的繁殖障碍以及仔猪和成长猪的呼吸困难为主要特征的传染病。目前,血清学检测是猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体检测最常用的方法,文章对血清中和试验、酶联免疫吸附试验、过氧化酶单层细胞试验、间接免疫荧光试验等猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体诊断技术的原理及其应用现状作一综述,并对各种检测方法的优缺点进行了分析。; 孙见冷雪谭斌武华; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征血清学

以合成肽为抗原检测PRRSV抗体ELISA方法的建立及初步应用被引量：1: 2022年; 通过软件预测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)N蛋白的主要抗原性表位,利用化学合成的方法合成三条针对N蛋白抗原表位的多肽作为包被抗原,筛选最优的一条建立了检测PRRSV抗体的间接ELISA方法。该ELISA方法的最适条件为:以2.5μg/mL的合成肽(Pep3)包被酶标板,4℃过夜,不需封闭,阴阳性血清分别稀释200倍,37℃作用60 min,辣根过氧化酶(HRP)标记兔抗猪酶标二抗1000倍稀释,37℃作用30 min,TMB 37℃显色15 min,2 mol/L H_(2)SO_(4)终止反应,酶标仪A(450 nm)读数。利用所建立的方法测定50份阴性血清的值计算S/P值,求得当S/P值≥0.324时,即为阳性,0.324>样品S/P值>0.212即为可疑,S/P值≤0.212时,即为阴性。之后进行了灵敏度试验,将标准阳性血清进行1∶3200倍稀释仍然呈现阳性,说明该检测方法具有较高的灵敏性;与常见的PCV2、CSFV、PRV、SIV 4种猪疫病阳性血清无交叉反应,说明该检测方法具有较高的特异性;通过对临床的200份样品进行检测,与IDEXX-PRRSV抗体检测试剂盒相比较,符合率达91.4%,说明该校测方法具有较高的符合率。本研究建立的ELISA方法对于PRRSV的常规诊断及流行病学调查具有重要意义。; 孙见; 关键词：N蛋白抗原表位合成肽

貂源铜绿假单孢菌的分离鉴定及其致病性研究被引量：1: 2012年; 为确定山东威海某养殖场发病水貂的病原菌,从发病水貂肺中分离并纯化细菌,根据其形态特征、培养特性、生化试验结果及PCR鉴定,确定其为铜绿假单孢菌。致病性试验中,将8.0×1010CFU/mL的菌液10倍系列稀释后,感染60日龄健康昆明系小鼠,半数致死量和最小致死量分别为1.4×107 CFU/mL和8.0×106 CFU/mL。剖检死亡小鼠可见皮下和肺出血,并能从死亡小鼠的肺中分离出与感染菌株形态特征完全一致的菌落。药敏试验结果显示,该分离菌株对庆大霉素、环丙沙星、诺氟沙星、头孢哌酮等较为敏感,而对青霉素、链霉素不敏感。系统发育分析结果表明,该分离菌株与从小麦中分离的铜绿假单孢菌的亲缘关系最近,据此怀疑该发病水貂有可能是食用了污染的饲料引起的。; 孙见谭斌温永俊张淑琴胡嘉欣师新川武华; 关键词：铜绿假单孢菌药敏试验

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孙见