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脊髓灰质炎病毒Sabin2株结构蛋白VP1在昆虫杆状病毒表达系统中的表达: 2011年; 目的在昆虫杆状病毒表达系统中表达脊髓灰质炎病毒(Poliovirus,PV)Sabin2株结构蛋白VP1。方法从Sabin2疫苗原液中RT-PCR扩增PV结构蛋白VP1基因,克隆入pFastBac1质粒,转化含杆状病毒穿梭载体Bacmid的E.coliDH10Bac,获得重组杆状病毒表达质粒Bacmid-VP1,在脂质体介导下转染sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒rBac-VP1。将第2代rBac-VP1感染sf9细胞,间接免疫荧光法检测VP1蛋白的表达,并优化感染条件。结果重组杆状病毒表达质粒Bacmid-VP1转化子可扩增出3 203 bp的目的片段;第2代rBac-VP1的滴度为6×107 pfu/ml,其感染的sf9细胞在荧光显微镜下可见绿色荧光,以不同MOI的rBac-VP1感染sf9细胞,VP1蛋白表达量差别不大,而在96 h内,随着感染时间的延长,VP1蛋白的表达量逐渐升高。结论在昆虫杆状病毒表达系统中成功表达了PV Sabin2株结构蛋白VP1,为脊髓灰质炎亚单位疫苗的研制奠定了基础。; 刘金花董关木安祺曹守春孔艳; 关键词：脊髓灰质炎病毒 VP1蛋白杆状病毒

不同生产工艺的人用狂犬病疫苗(人二倍体细胞)受试者血清总IgE分析被引量：1: 2022年; 目的探讨不同生产工艺对人用狂犬病疫苗(人二倍体细胞)可能存在的致敏反应的影响。方法在4种不同生产工艺人用狂犬病疫苗免疫后的临床血清中随机选取360份血清样本,ELISA法检测不同生产工艺疫苗和不同采血时间点血清样本中的总IgE水平,采用SPSS19.0软件进行统计学分析。结果总IgE检测结果显示,4种疫苗免疫后的血清总IgE阳性率均为20%(6/30),总IgE的均值最低为9 IU/ml,最高为210 IU/ml,重复测量的方差分析显示不同时间采血检测的总IgE水平差异无统计学意义(P=0.284),多步浓缩纯化的人二倍体细胞疫苗的总IgE水平明显低于Vero细胞疫苗(P=0.024)。结论免疫剂量的增加不会导致总IgE水平的升高,人用狂犬病疫苗(人二倍体细胞)的生产工艺能够对可能的致敏性杂质进行去除,具有良好的安全性。; 刘晶晶刘翠孔艳李玉华; 关键词：人用狂犬病疫苗人二倍体细胞总IGE

首批黄热减毒活疫苗病毒滴度国家标准品的研制被引量：1: 2017年; 目的制备我国首批黄热减毒活疫苗病毒滴度国家标准品。方法委托北京天坛生物制品股份有限公司制备1批经全面检验合格的黄热减毒活疫苗作为候选国家标准品(批号为:20111201)。由3家实验室采用空斑法对黄热减毒活疫苗病毒滴度标准品进行协作标定,以黄热病疫苗国际标准品为溯源,确定本国家标准品以LgIU/ml为标示单位的病毒滴度,并分析标准品的分装精度、稳定性、均匀性。结果制备的国家标准品分装精度为-0.68%~0.95%。3家实验室20次协作标定结果显示,标准品病毒滴度的IU赋值为5.4 LgIU/ml。37℃2周加速破坏试验病毒滴度下降0.5 LgPFU/ml;长期稳定性考察(-30℃),病毒滴度2年内下降0.5 LgPFU/ml,而第3、4年病毒滴度基本无下降。均匀性参考量值——pH的CV值为0.17%、卵清蛋白含量的CV值为4.4%,病毒滴度CV值为2.0%。结论研制的黄热减毒活疫苗病毒滴度国家标准品符合国家标准品要求,可作为国家标准品进行发放和使用。该国家标准品批准文号为(2016)国生标字0032,其批号编码为250017-20111201。; 王玲刘晶晶孔艳李玉华; 关键词：病毒滴度国家标准品

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孔艳