周希科 作品数:29 被引量:71 H指数:5 供职机构: 苏州大学 更多>> 发文基金: 无锡市社会发展科技计划项目 江苏省重点学科建设基金 无锡市科技计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
人乳头瘤病毒11型DNA疫苗协同CD80基因诱导小鼠特异性免疫反应 被引量:1 2006年 目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)11E7、L1-E7 DNA疫苗质粒协同共刺激分子CD80诱导的特异性免疫反应。方法将所构建的pcDNA3.1(+)/HPV11E7、E7-CD80、L1-E7 DNA疫苗质粒分别经肌内注射免疫小鼠,并设L1-E7质粒与CD80质粒共同注射组,PCR和RT-PCR检测质粒DNA的组织分布和目的基因RNA转录,MTT法测脾淋巴细胞增殖活性,ELISA检测脾淋巴细胞培养上清细胞因子的表达水平及血清抗体的水平。结果免疫小鼠后,质粒主要分布在注射部位。DNA疫苗诱导机体产生特异性脾淋巴细胞增殖和分泌IL-2、IFN-γ增加,产生HPV11E7 IgG/L1 IgG抗体;与CD80基因嵌合后,脾淋巴细胞增殖和分泌活性显著增强;与CD80联合免疫组所诱导的细胞免疫反应和体液免疫均显著强于L1-E7单独免疫组。结论HPV11 DNA疫苗能诱导小鼠产生特异性免疫反应,CD80可加强其免疫效果。 李莉华 黄朝晖 郭子健 刘志辉 任金冬 宋明旭 周希科 王飞 毕志刚关键词:乳头状瘤病毒 CD80 疫苗 PDGF-D对人肝癌细胞增殖及VEGF表达影响研究 被引量:5 2010年 目的:研究血小板源性生长因子D(PDGF-D)对人肝癌细胞株BEL-7402增殖及其血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:体外培养肝癌细胞株BEL-7402和肝癌旁非瘤性细胞株QSG-7701,采用RT-PCR方法检测PDGF-D与PDGFRβmRNA在BEL-7402和QSG-7701的表达情况;将浓度分别为0(对照)、5、10、20、50、100、200μg/mL的人重组PDGF-DD蛋白加入BEL-7402中,采用四甲基偶氮唑蓝比色法检测肝癌细胞的生长曲线;流式细胞仪检测细胞周期变化;半定量RT-PCR检测VEGF及PDGFRβmRNA表达情况,ELISA检测PDGF-DD干预细胞后培养上清中VEGF蛋白的表达情况。结果:PDGF-D及PDGFRβmRNA在BEL-7402中高表达,与QSG-7701相比差异有统计学意义(P<0.05)。PDGF-DD干预细胞后,可促进人BEL-7402增殖,浓度为100μg/mL时达最高峰;细胞周期分布变化,G_0/G_1期细胞数减少,S期细胞数增加,与对照组相比差异有统计学意义;RT-PCR结果显示,VEGF及PDGFRβ RI值,实验组(除5μg/mL组外)与对照组相比差异有统计学意义;ELISA结果显示,加入PDGF-DD各浓度组VEGF蛋白浓度较对照组增高,差异有统计学意义,并呈量效依赖性关系。结论:PDGF-DD能促进BEL-7402的增殖,上调PDGFRβ及VEGF的表达。PDGF-D及其信号传导系统在肝癌的发生、发展中可能发挥重要的作用,可作为肝癌预后预测指标和治疗靶点。 郑纪虎 郭子健 李莉华 宋明旭 刘志辉 周希科关键词:肝癌细胞 血管内皮生长因子 MTHFR C677T基因多态对胃癌辅助化疗预后的影响 被引量:4 2008年 [目的]研究亚甲基四氢叶酸还原酶基因(MTHFR)C677T多态对接受氟尿嘧啶(5-Fu)为基础辅助化疗胃癌患者预后的影响。[方法]确诊的胃癌患者110例,采用5-Fu为基础的方案进行辅助化疗。采用聚合酶链反应—连接酶检测反应技术检测MTHFRC677T基因多态。[结果]110例胃癌患者中,MTHFR677T/T、C/T和C/C基因型频率分别为19.1%(21/110)、47.3%(52/110)和33.6%(37/110)。110例患者复发率和死亡率分别为54.5%(60/110)和42.7%(47/110)。携带C/C基因型患者无复发生存率和总生存率均显著低于携带T/T或C/T基因型患者(P<0.05)。Cox多因素分析显示,MTHFRC/C基因型是影响患者复发和生存的独立危险因素(P<0.05)。[结论]MTHFRC677T基因多态性是接受5-Fu为基础辅助化疗胃癌患者的独立预后因素。 黄朝晖 华东 李莉华 郁皓 吴小红 刘志辉 宋明旭 周希科关键词:胃肿瘤 药物疗法 四氢叶酸还原酶 氟尿嘧啶 人乳头瘤病毒11型L1/E7嵌合DNA疫苗的构建及其诱导的免疫效应 2009年 目的构建人乳头瘤病毒11型L1/E7嵌合DNA疫苗pcDNA3L1-E7并研究其在小鼠中诱导的免疫效应。方法用分子克隆技术构建重组真核表达质粒pcDNA3L1-E7。重组质粒DNA股四头肌注射免疫小鼠,用ELISA方法检测L1、E7特异性抗体和脾细胞分泌的IL-2、γ-INF;MTT法检测脾淋巴细胞增殖反应。结果成功构建pcDNA3LI—E7。免疫小鼠后,重组质粒可诱导机体产生特异性脾淋巴细胞增殖及IL-2、γ-INF分泌增加,并诱导机体产生HPV11-E7IgG和HPV11-L1IgG抗体。结论嵌合DNA疫苗pcDNA3L1-E7能诱导小鼠产生特异性的细胞免疫和体液免疫反应。 黄朝晖 李莉华 郭子健 刘志辉 任金冬 宋明旭 周希科 王飞 毕志刚PDGF-D及其受体在胃癌组织中的表达及意义 被引量:2 2011年 目的探讨血小板衍生生长因子-D(PDGF-D)及其受体PDGFRβ mRNA在胃癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法用RT-PCR方法检测58例胃癌及相对应的癌旁标本中PDGF-D及PDGFRβ mRNA的表达,分析其与临床病理特征的关系。结果 PDGF-D及PDGFRβ在胃癌组织中的阳性表达率(98.28%,72.41%)均高于癌旁组织(87.93%,53.45%),P均<0.05。PDGFRβ与PDGF-D的表达呈正相关(r=0.40,P<0.05)。PDGF-D mRNA的表达水平与胃癌的淋巴结及远处转移和复发有关(P<0.05),与其他临床病理特征无关(P>0.05)。结论 PDGF-D在胃癌的发生、发展和转移、复发中可能起着重要的作用,可作为预测胃癌转移和复发的有意义指标。 丁苏宁 李莉华 华东 宋明旭 周希科 吴二斌 刘志辉关键词:胃癌 反转录聚合酶链反应 癌基因iASPP在胃癌中的表达及临床意义 被引量:4 2011年 目的:研究iASPP(inhibitor member of the ASPP family)在胃癌中的表达及其与临床病理特征的关系。方法:用RT-PCR方法检测iASPP mRNA在60例胃癌及对应的癌旁组织中的表达,并研究其与临床病理特征的关系。结果:胃癌组织中iASPP阳性表达率明显高于癌旁组织(P<0.05),胃癌组织中iASPP表达水平(0.503±0.336)明显高于癌旁组织(0.205±0.108)。胃癌中iASPP的高表达同肿瘤分化程度和肿瘤浸润深度以及患者无瘤生存时间有关(P<0.05)。结论:iASPP与胃癌的发生发展有关,影响胃癌的分化及患者预后,有望成为胃癌治疗的新靶点。 梁环宇 李莉华 任峰 宋明旭 周希科 刘志辉关键词:IASPP 胃癌 逆转录聚合酶链反应 GSTA1基因多态性对环磷酰胺辅助化疗的乳腺癌患者预后的影响 被引量:4 2011年 目的 探讨GSTA1基因多态性与接受CTX类药物辅助化疗乳腺癌患者预后的关系.方法 对采用CTX类药物为主的方案进行辅助化疗的137例确诊乳腺癌患者(浸润性导管癌患者124例,浸润性小叶癌患者5例,其他类型癌症患者8例),用PCR-LDR检测其GSTA1基因多态性,Kaplan-Meier法绘制生存曲线,log-rank法比较不同基因型组间生存差异,并用Cox比例风险回归模型进行预后影响因素的多因素分析.结果 137例乳腺癌患者中,GSTA1*A/*A、*A/*B和-B/*B基因型频率分别为67.2%(92/137)、31.4%(43/137)和1.5%(2/137).乳腺癌患者的GSTA1基因型频率在按年龄、临床分期、淋巴结转移、雌、孕激素受体状态等临床病理特征分组的分布差异均无统计学意义(x2值分别为0.722、1.967、3.303、0.226、0.709,P均>0.05);经Fisher精确概率分析,肿瘤大小、病理组织类型、病理分级的差异均无统计学意义(P均>0.05).携带GSTA1-A/*A基因型和*A/*B或*B/-B基因型的乳腺癌患者复发率分别为47.8%(44/92)和31.1%(14/45),死亡率分别为22.8%(21/92)和17.8%(8/45).Kaplan-Meier生存曲线和log-rank分析显示,携带GSTA1*A/*B+*B/*B基因型乳腺癌患者的无复发生存率和总生存率均高于携带GSTA1*A/*A基因型患者,且差异均有统计学意义(x2值分别为18.723、7.352,P均<0.01).经Cox多因素分析,GSTA1基因多态性是影响乳腺癌患者无复发生存[OR=0.222,95%CI:0.108~0.458,P<0.01]和总生存[OR=0.362,95%CI:0.145~0.902,P<0.05]的独立因素.结论 GSTA1基因多态性是乳腺癌患者CTX药物辅助化疗无复发生存和总生存的预测标志. 李莉华 郭子健 杭晓声 周希科 何杰 宋明旭 刘志辉关键词:乳腺癌 化学治疗 TNRC9/LOC643714基因rs3803662多态与中国妇女乳腺癌易感性及临床病理特征的关系 被引量:2 2009年 目的研究TNRC9/LOC643714基因rs3803662多态与中国妇女乳腺癌易感性及临床病理特征的关系。方法抽取321例乳腺癌患者和330例健康妇女外周血,分离淋巴细胞,抽提基因组DNA,采用聚合酶链反应-连接酶检测反应(PCR-LDR)检测rs3803662基因多态。危险度比值比(OR)及95%可信区间(CI),应用非条件Logistic回归分析计算。结果rs3803662低频等位基因频率在病例组和对照组分别为35.2%和35.7%。以TT基因型为参照,CT或CC基因型没有显著性地提高乳腺癌的发病风险。其中,携带CT基因型风险为(OR=0.834,95%CI:0.491~1.415),携带CC基因型风险为(OR=0.726,95%CI:0.431~1.225)。TNRC9/LOC643714基因rs3803662单核苷酸多态性与发病年龄、淋巴结转移、雌、孕激素受体状态等临床病理参数无相关性。结论有别于其他种族,TNRC9/LOC643714基因rs3803662的单核苷酸多态性与中国人群乳腺癌发生的遗传易感性及临床病理特征无明显关系。 李莉华 刘志辉 黄朝晖 周希科 宋明旭 郭子健 吴玉玉 丁苏宁关键词:乳腺癌 易感性 多态性 低分子肝素对胃癌SGC-7901细胞增殖及其hTERT表达的影响 被引量:9 2008年 目的探讨低分子肝素(LMWH)对胃癌SGC-7901细胞增殖及其人端粒酶逆转录酶(hTERT)表达的影响。方法不同浓度LMWH作用于SGC-7901细胞不同时间后,MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞仪分析细胞周期,RT-PCR检测细胞hTERT mRNA。结果LMWH作用后,SGC-7901细胞的生长受抑制,呈剂量和时间依赖性,细胞停滞于G1期,其hTERT mRNA表达下降。结论LMWH可抑制SGC-7901细胞的生长,其机制可能与阻滞细胞周期、降低hTERT mRNA的表达有关。 宋明旭 李莉华 刘志辉 黄朝晖 周希科关键词:低分子肝素 胃肿瘤 SGC-7901细胞 端粒酶逆转录酶 外源性PDGF-DD蛋白对肝癌细胞株BEL-7402的体外作用 2011年 目的:探讨外源性PDGF-DD蛋白对PDGF-D和β-PDGFR阳性表达的人肝癌细胞株BEL-7402增殖和转移相关基因VEGF及CXCR4表达的影响。方法:浓度为0~100pg/mL PDGF-DD蛋白作用于肝癌细胞株BEL-740248h,MTT检测细胞活性;流式细胞仪检测细胞周期;RT-PCR检测VEGFmRNA和CXCR4 mRNA表达。结果:外源性PDGF-DD蛋白干预细胞后,可促进细胞增殖,且在0~100pg/mL范围内呈剂量依赖性;周期分布显示G0/G1期细胞比例下降,S期细胞比例增多;且上调VEGFmRNA和CXCR4 mRNA的表达。结论:外源性PDGF-DD能促进BEL-7402细胞增殖,上调VEGF、CXCR4 mRNA的表达。提示PDGF-D及其信号传导系统在肝癌的发生、发展及转移中可能发挥重要的作用,可作为肝癌预后预测指标和治疗靶点。 宋明旭 李莉华 郑纪虎 刘志辉 周希科关键词:BEL-7402 CXCR4