刘红莉
- 作品数:3 被引量:14H指数:1
- 供职机构:西安交通大学医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金:艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 乙型肝炎病毒全X基因对HEK293细胞功能的影响被引量:1
- 2012年
- 目的克隆并构建乙型肝炎病毒(HBV)全X基因表达载体,探讨HBV全X基因对HEK293细胞功能的影响,并比较HBV全X基因与X基因对细胞影响的差异。方法应用基因克隆的方法从慢性HBV感染者血清中获得HBV全X及X基因,构建带有HBV全X基因与X基因的真核表达载体以及带有绿色荧光基团GFP的重组质粒;细胞转染技术将其分别转入HEK293细胞,RT-PCR及Western-blot技术验证HBV全X基因及X基因在细胞内的表达;荧光显微镜下观察其在细胞内的定位情况;MTT法检测细胞增殖率的变化;Annexin V流式细胞分析技术检测其对细胞凋亡率的影响;TRAP实时荧光定量PCR法检测各组细胞端粒酶活性的变化。结果成功构建带有HBV全X基因的重组质粒且目的基因能在HEK293细胞内高表达;表达的HBV全X蛋白主要分布在胞核,而X蛋白在胞质、胞核均有分布;转染HBV全X和X基因后细胞增殖率分别为(0.826±0.002)%和(0.805±0.013)%,显著高于转染空质粒(0.691±0.035)%和未转染对照组(0.681±0.018)%,差异具有统计学意义(P<0.05);转染HBV全X和X基因后细胞凋亡率分别为(25.25±3.02)%及(21.34±2.16)%,显著高于转染空质粒(13.49±1.49)%及未转染细胞对照组(11.37±1.58)%,差异具有统计学意义(P<0.05);转染全X及X基因细胞的端粒酶活性亦显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);全X转染组细胞的增殖率、凋亡率及端粒酶活性均高于X转染组,但差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 HBV全X基因具有促细胞增殖、凋亡以及影响细胞端粒酶活性的作用,其可能通过不同于HBV X基因的细胞内途径影响细胞的生物学功能,从而在HBV相关的原发性肝细胞癌发生发展中起作用。
- 崔美灵张瑜刘锦锋刘红莉赵英仁
- 关键词:X基因细胞增殖端粒酶活性
- HBsAg阳性母亲所生婴儿联合免疫后乙型肝炎表面抗体的动态变化被引量:12
- 2013年
- 目的通过前瞻性随机对照观察HBsAg阳性母亲所生婴儿接受联合免疫(乙肝免疫球蛋白联合5μg或10μg重组酵母乙型肝炎疫苗)后乙型肝炎表面抗体(抗-HBs)滴度的动态变化,比较不同剂量乙型肝炎疫苗免疫效果的差异,为更好地建立此类高危人群的免疫策略、监测模式及加强免疫提供基础。方法对269例HBsAg阳性母亲的婴儿于出生后12h内进行联合免疫(乙型肝炎免疫球蛋白200IU,重组酵母乙型肝炎疫苗随机分为5μg和10μg),并在出生时、1、7、12月龄进行HBVDNA载量,HBsAg及抗-HBs滴度的动态监测。根据资料不同运用秩和检验、z。检验及Fisher精确概率法进行统计学分析。结果(1)HBsAg阳性母亲的婴儿出生后联合免疫一年保护率可达到95.9%。接受不同剂量疫苗免疫婴儿中,HBV感染率没有明显差别(x2=0.876,P=0.377)。(2)动态监测未感染婴儿1月龄抗-HBs平均滴度为144.1mIU/ml,7月龄达最高581.8mIU/ml,12月龄降至397.6mIU/ml;7月龄抗-HBs滴度小于100mIU/ml的比例为20.9%,小于10mIU/ml的比例为7.4%(无/弱应答率);12月龄抗-HBs滴度小于100mIU/ml的比例升至30.20/0,小于10mIU/ml的比例则上升至15.9%。(3)7月龄时,10μg疫苗组婴儿抗-HBs平均滴度高于5ug组(675.3mIU/ml对比425.0mIU/ml,P=0.001),无/弱应答率显著低于5μg组(2.3%对比12.60/0,P=0.002);12月龄时,10μg疫苗组婴儿抗-HBs滴度小于100mIU/ml的比例明显低于5μg组(20.60/0对比40.20/0,P=0.001)。结论虽然HBsAg阳性母亲所生婴儿联合免疫1年时的保护率可达95.9%,但仍有30.2%的婴儿此时抗-HBs滴度已降至100mIU/ml以下,保护性下降,规律监测可有效发现处于无、低应答状态者,及时采取加强免疫措施可防止此类高危人群后期HBV水平传播;联合免疫中,10Hg重组酞母乙型肝
- 王静冯玉岭刘明晖白云冯达红袁宁霞杜冬青冯卫红刘红莉杨瑗刘锦锋何英利宋红霞刘勇赵英仁陈天艳
- 关键词:肝炎乙型联合免疫抗体滴度
- 乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭患者肝组织中环氧化酶-2和过氧化物酶体增殖物激活受体γ的表达被引量:1
- 2011年
- 目的研究HBV相关慢加急性肝衰竭(ACLF)患者肝组织的环氧化酶-2(COX-2)和过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的表达情况及其与临床指标的相关性。方法选取ACLF患者35例,HBV相关慢性肝功能衰竭(CLF)患者35例,慢性乙型肝炎(CHB)患者27例及正常对照(NC)者15例,检测患者生物化学指标及HBVDNA水平;免疫组织化学法行肝组织COX-2和PPARγ染色,检测并分析各组患者肝组织中COX-2和PPARγ的表达水平及其与临床资料的相关性。多组间比较用Kruskal-Wallis检验,两组间比较用Mann Whitney非参数U检验,双变量的相关分析用Spearman相关分析。结果ACLF组与CLF组、CHB组和NC组相比,AST、总胆红素、胆固醇、凝血酶原时间、国际标准化比率、纤维蛋白原、终末期肝病模型(MELD)评分差异有统计学意义(P值均〈0.01)。COX-2染色在肝细胞质呈阳性着色,PPARγ染色以核阳性为主,亦可见细胞质阳性着色。ACLF、CLF、CHB和NC组肝组织COX-2表达水平评分分别为(4.77±0.95)分、(4.30±1.18)分、(4.65±0.70)分和(2.31±1.12)分,ACLF、CLF和CHB组表达水平高于NC组,差异有统计学意义(Z值分别为5.18、-4.50和-5.32,P值均〈0.01);ACLF组高于CLF组,差异有统计学意义(Z=-1.98,P〈0.05)。PPARγ表达水平评分在ACLF、CLF、CHB和NC组分别为(6.23±1.78)分、(5.34±1.68)分、(5.90±1.06)分和(3.57±1.91)分,ACLF组高于其他各组,与CLF组及NC组相比,差异有统计学意义(Z值分别为-2.62和4.28,P值均〈0.01)。ACLF组的COX2表达水平与MELD评分呈正相关(r=0.337,P〈0.05),PPARγ表达水平与HBVDNA水平的对数值呈正相关(r=0.348,P〈0.05)。结论COX-2能反映肝脏炎症程度及肝脏损害程度,PPARγ在慢性HBV感染时上调,并且炎症越明显,上调的幅度越大,可能
- 牛迎花弋锐田刘红莉陈天艳张树林赵英仁
- 关键词:肝功能衰竭环氧化酶-2过氧化物酶体增殖物激活受体Γ