刘春国 作品数:131 被引量:350 H指数:11 供职机构: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 更多>> 发文基金: 黑龙江省自然科学基金 国家科技支撑计划 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 更多>>
重组禽流感病毒毒株、其制备方法及由其制得的疫苗 本发明公开了一种新的重组禽流感病毒毒株,命名为rgH5N3,该毒株的保藏号为CGMCC No.1339。该重组禽流感病毒毒株含有经分子修饰的H5亚型血凝素基因、N3亚型神经氨酸酶基因和具有高产性状禽流感病毒的6个内部基因... 刘明 张云 刘春国 童光志文献传递 重组H5N3亚型禽流感细胞毒灭活疫苗免疫佐剂效果的评价 被引量:1 2009年 为评价佐剂对疫苗免疫效果的影响,本试验以反向遗传学技术拯救的重组H5N3亚型禽流感病毒为种毒,对国产矿物油以及赛比克公司提供的MontanideTM ISA 70MVG(简称70M)和MontanideTM ISA 206 VG(简称206)3种佐剂制备的灭活疫苗进行了SPF鸡免疫攻毒试验。结果表明国产矿物油佐剂组与70M佐剂组都能对SPF鸡100%保护,206佐剂组仅能保护40%,攻毒的SPF鸡发病,但不死亡;从抗体水平上比较发现70M佐剂组稍好于国产矿物油佐剂组,但两组之间差异不显著,而这两组与206佐剂组差异极显著。这3种佐剂组免疫鸭均能够诱导产生较高的抗体水平,70M佐剂组优于国产矿物油佐剂组和206佐剂组,但3者差异不显著。用70M系的8种佐剂MontanideTM ISA 70 essai Mi(i=1-8)(简称70Mi)佐剂乳化的疫苗免疫SPF鸡,结果表明70M佐剂组效果最好,攻毒后免疫鸡不排毒,而且无临床症状;统计学分析显示70M佐剂组与所有70Mi佐剂组差异均显著。这些结果表明70M佐剂可以作为新型疫苗佐剂用于禽流感疫苗的制备。 刘春国 刘明 万春和 陈浩 李洪涛 孙恩成 杜金玲 刘大飞关键词:禽流感 H5N1亚型 细胞苗 佐剂 禽流感病毒A/Turkey/Canada/63毒株HA和NA基因的克隆及序列分析 被引量:8 2006年 用SPF鸡胚增殖禽流感病毒(AIV)A/Turkey/Canada/63毒株,提取病毒基因组总RNA,应用RT-PCR技术分别扩增该病毒分离株的HA和NA基因全片段,并克隆到pMD18-T载体上。测序结果表明,该毒株的HA基因全长为1745bp,含有完整的阅读框架,编码566个氨基酸;NA基因全长1467bp,编码469个氨基酸。BLAST序列比较结果显示,该毒株HA基因属于H6亚型,NA基因属于N2亚型。将获得的HA和NA基因与AIV数据库中H6和N2基因进行遗传演化分析,表明该毒株HA基因与其他H6基因核苷酸的同源性为80.5%~87.3%,氨基酸的同源性为88.0%~93.1%;NA基因与其他N2基因核苷酸的同源性为86.0%~93.5%,氨基酸的同源性为90.6%~96.3%。 潘蔚绮 刘明 刘春国 张云 杨涛关键词:HA基因 NA基因 马流感疫苗研究进展 被引量:2 2013年 马流感(Equine influenza,EI)是由正黏病毒科、流感病毒属的A型流感病毒中的马流感病毒(Equine influenzavirus,EIV)引起的马属动物一种严重的上呼吸道急性高度接触性传染疾病,多呈暴发性流行,传播迅速而且范围广泛。OIE规定马流感为法定报告动物疫病,我国将其列为三类传染病。 刘春国 刘飞 彭永刚 刘明 相文华关键词:马流感病毒 A型流感病毒 传染疾病 上呼吸道 马属动物 法定报告 空肠弯曲杆菌和结肠弯曲杆菌双重PCR鉴别检测方法的建立 被引量:7 2016年 为快速检测和鉴定空肠弯曲杆菌和结肠弯曲杆菌,本研究设计并合成了空肠弯曲杆菌马尿酸酶基因hipO和结肠弯曲杆菌cdtC基因的2对特异性引物,建立并优化了快速检测空肠弯曲杆菌和结肠弯曲杆菌的双重PCR方法。结果显示,双重PCR对空肠弯曲杆菌hipO基因和结肠弯曲杆菌cdtC基因的扩增产物的大小分别为653bp和313bp。PCR扩增条件最终确定为退火温度为52℃,dNTP终浓度为0.4mmol/L,hipO和cdtC基因引物的终浓度均为2 5μmol/L。该双重PCR的灵敏度可达到6.6 8×1 0-2μg/mL,对多杀性巴氏杆菌、产单核细胞李氏杆菌、产气荚膜梭菌、伤寒沙门菌和金黄色葡萄球菌扩增均无目的条带,说明该PCR方法具有良好的灵敏性和特异性。符合试验结果与单一PCR方法结果相同。用所建立的方法对本实验室采集的鸡肛拭子划线培养后的可疑菌落进行PCR鉴定,结果显示2株为空肠弯曲杆菌,2株为结肠弯曲杆菌。结果表明,本研究建立的双重PCR可以用于同时检测空肠弯曲杆菌和结肠弯曲杆菌。 孙久鹤 郭东春 李安 刘家森 刘春国 刘大飞 侯振中 曲连东关键词:空肠弯曲杆菌 双重PCR 用于同时检测猫泛白细胞减少症病毒、猫杯状病毒和猫疱疹病毒1型的多重PCR引物组 本发明公开了用于同时检测猫泛白细胞减少症病毒、猫杯状病毒和猫疱疹病毒1型的多重PCR检测引物组,所述引物组由三对引物组成,其中,用于猫泛白细胞减少症病毒检测的引物序列为SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示;... 刘大飞 张洪英 曲连东 刘春国 林欢文献传递 H1亚型猪流感病毒血凝素基因在昆虫细胞中的表达及其间接ELISA方法的初步建立 根据 GenBank 发表的 H1亚型猪流感 HA 基因序列设计引物,扩增出 HA 基因片段,将其克隆到 pFastBacGP67B 杆状病毒载体上,筛选阳性重组转座载体 pFastBacGP67B-H1,转化含有杆状病... 万春和 刘明 刘春国 张晓霁 杨涛 张云 郭东春文献传递 珍珠鸡传染性法氏囊病病毒超强毒株的分离及其VP2基因的分子遗传特征 被引量:3 2015年 为了确诊某动物园珍禽的疑似传染性法氏囊病(IBD)疫情,通过RT-PCR和病毒分离的方法对采集的病料进行鉴定,并对病毒的VP2基因进行分子和遗传分析。结果显示,分离到了1株传染性法氏囊病病毒(IBDV),其VP2基因与荷兰株D6948的亲缘关系最近,达到98.8%,同属于超强毒株分支;VP2蛋白关键氨基酸位点及七肽基序均符合超强毒的分子特征,从分子水平上证实此次珍禽疫情是由超强IBDV感染导致的;同时本试验首次发现IBDV导致白鹇和孔雀的发病死亡,说明IBDV的感染谱正在不断拓宽。结果表明,加强野生禽类IBD的分子流行病学研究,对IBD的防控具有重要意义。 刘永相 刘春国 刘大飞 李秀云 刘鑫 蒋艳妹 郭冬春 田进 仇铮 邹希明 曲连东关键词:传染性法氏囊病病毒 超强毒株 VP2基因 分子特征 不同亚型流感病毒NP基因的原核表达研究 为了进一步研究 A 型流感病毒核蛋白功能及在诊断中的应用。本研究采用 RT-PCR 技术分别扩增 A/Swine/Guangdong/LM2/05(H1N1)、A/Chicken/Guangdong/W2/04(H5N1... 刘大飞 杨涛 刘明 刘春国 何利昆 刘大程 桑学波关键词:流感病毒 原核表达 文献传递 一种伪狂犬灭活疫苗及其制备方法 本发明涉及一种伪狂犬灭活疫苗及其制备方法,所述伪狂犬灭活疫苗的病毒株为伪狂犬病毒PRV-HB株,其保藏号为CGMCC NO.8758,保藏日期为2014年01月13日,保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心... 刘大飞 刘春国 程景 张洪英 曲连东文献传递