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倪建强: 作品数：48 被引量：181H指数：8; 供职机构：中国动物疫病预防控制中心更多>>; 发文基金：国家科技基础性工作专项国家现代农业产业技术体系建设项目国家科技支撑计划更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>

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猪伪狂犬病毒和猪细小病毒双重PCR方法的建立及初步应用被引量：3: 2011年; 目的本研究旨在建立一种适用于临床样品和动物源性生物制品中猪伪狂犬病毒和猪细小病毒同时检测的双重PCR技术。方法针对猪伪狂犬病毒(PRV)的gE基因和猪细小病毒(PPV)的VP2基因的保守区域分别设计引物。结果经条件优化后,所建立的双重PCR方法能特异性地检测出样品中的PRV(581bp)和PPV(202bp)。结论本方法具有良好的特异性、敏感性和稳定性,适用于临床样品中对PRV和PPV的同时检测,也可用于猪源性生物制品的检测。; 夏应菊汪葆玥訾占超韩雪曲萍倪建强顾小雪遇秀玲翟新验田克恭; 关键词：双重PCR 猪伪狂犬病毒猪细小病毒生物制品

欧洲型、美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体的间接ELISA检测方法: 本发明提供一种鉴别欧洲型、美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体的血清学方法，该方法是针对美洲型PRRSV非结构蛋白Nsp7蛋白的1～23和59～259氨基酸序列，建立美洲型PRRSV Nsp7蛋白的原核重组表达载体pET-3...; 田克恭邱鹏倪建强顾小雪曲萍翟新验陈西钊; 文献传递

猪圆环病毒2型10JS-2株的分离与全基因组序列分析被引量：4: 2012年; 本试验从江苏某猪场采集猪血清,进行猪圆环病毒2型(PCV2)的检测和分离,根据GenBank中登录的PCV2全基因组序列,设计1对特异性引物,扩增PCV2全基因组,并且进行序列测定和分析。发现一株PCV2 10JS-2的基因组全长为1779nt,在病毒复制起始区域含有11个碱基的插入。在GenBank中对含有11个碱基插入的毒株序列进行BLAST发现,有两株PCV2(AY321993和EF565360)也有11个碱基的插入,但是与10JS-2比较,插入的碱基和插入的位置不同。遗传进化分析显示10JS-2属于PCV2a基因型,AY321993和EF565360属于PCV2b基因型,因此推断10JS-2可能是由PCV2a基因型的毒株在复制起始区域发生碱基插入形成的。这是首次发现此类PCV2毒株。; 蔡林胡冬梅李晓霞汪葆玥韩雪倪建强周智遇秀玲翟新验王文良田克恭; 关键词：猪圆环病毒2型全基因组序列

猪繁殖与呼吸综合征鉴别诊断技术的研究进展被引量：4: 2016年; 当前,猪繁殖与呼吸综合征在我国猪群中的流行现状十分复杂,毒株种类繁多,包括美洲型和欧洲型,美洲型中又包括经典株和高致病性变异株,同时多种弱毒疫苗的使用干扰了该病的诊断。本文对我国PRRSV基因型的流行现状、PRRSV疫苗使用情况进行了概述,并分别对美洲型和欧洲型、美洲型经典株和美洲型变异株、野毒和疫苗毒的鉴别诊断技术进行了分析,为我国猪场有效诊断和防控本病提供参考。; 顾小雪原霖倪建强吴佳俊翟新验王传彬刘金华; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征

伪狂犬病病毒微滴数字PCR定量检测方法的建立被引量：23: 2017年; 为了建立伪狂犬病病毒(PRV)微滴数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)的检测方法,以伪狂犬病病毒gB基因为靶基因,建立了可对其准确定量的微滴数字PCR方法。对ddPCR反应中的引物浓度、探针浓度、退火温度进行了优化。对建立的ddPCR方法的特异性和敏感性也进行测定,并且应用于临床样品的检测。结果表明,ddPCR的最佳引物浓度为0.9μmol·L^(-1),探针浓度为0.25μmol·L^(-1),退火温度为60℃。ddPCR方法线性相关系数(R2)为0.998,显示呈良好的线性关系。检测限为6.1copies·μL^(-1),比荧光定量PCR(Real Time PCR,qPCR)的检测限低,变异系数为2.81%,与其他病毒无交叉反应。通过对临床样品的检测,与病毒分离比较,ddPCR方法的敏感性为87.5%,特异性为96.2%,符合率为97%。结果表明新建立的ddPCR方法,敏感性高、特异性强,可用于伪狂犬病病毒的定量检测。; 陈亚娜王静訾占超亢文华汪葆玥倪建强原霖; 关键词：伪狂犬病病毒

猪细环病毒和猪圆环病毒2型混合感染状况的调查被引量：12: 2012年; 为分析我国猪细环病毒(TTSuV)和猪圆环病毒2型(PCV2)的共感染情况,利用所设计的TTSuV(TTSuV1、TTSuV2)和PCV2特异性引物对我国29个省市采集的猪群血清样品同时进行PCV2和TTSuV(TTSuV1、TTSuV2)PCR检测,分析混合感染情况。结果所检测的1 898份样品中,TTSuV阳性为1 103份(58%),PCV2阳性为435份(23%)。阳性样品中呈混合感染的有275份(14%),其中TTSuV1和PCV2为249份(13%),TTSuV2和PCV2为200份(10%),均为阳性的有174份(9%)。调查结果显示,我国猪群中TTSuV和PCV2混合感染现象较为普遍,对地区性分布特征和饲养模式等影响因素的分析表明TTSuV和PCV2混合感染情况存在地区性差异(P<0.01),但饲养模式并不是共感染的关键因素。; 夏应菊訾占超蔡林韩雪翟新验田克恭倪建强; 关键词：猪圆环病毒2型

猪繁殖与呼吸综合征病毒单克隆抗体的制备和鉴定: 2012年; 目的制备抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)单克隆抗体并对其生物学特性进行鉴定。方法以纯化的PRRSV全病毒抗原免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术制备单克隆抗体,并测定其免疫球蛋白亚类、效价和特异性。结果成功获得2株能稳定分泌抗PRRSVM蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞,命名为3C3、3D2,经鉴定亚类均为IgG2a、kappa链。2株单克隆抗体腹水ELISA效价达105～107,IPMA效价达1:2560～1:10240,与猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒等无交叉反应。结论获得特异性针对猪繁殖与呼吸综合征病毒的单克隆抗体,为研究该病的快速诊断技术奠定基础。; 曹振邓小雨张倩倪建强周智遇秀玲赵德明田克恭; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒单克隆抗体酶联免疫吸附试验

伪狂犬病毒gB、gE双重微滴数字PCR绝对定量检测试剂盒: 本发明公开了一种伪狂犬病毒微滴数字PCR绝对定量检测试剂盒。本发明提供的引物探针组合由gB‑F1R1P1和gE‑F1R1P1组成；引物gB‑F1为序列1所示；引物gB‑R1为序列2所示；探针为序列3所示；引物gE‑F1为...; 原霖杨林王传彬宋晓晖亢文华吴佳俊倪建强周智韩焘訾占超王晓英毕一鸣王静汪葆玥陈亚娜; 文献传递

我国部分地区原种猪场3种猪腹泻病毒的血清学调查被引量：11: 2018年; 为了解猪流行性腹泻病毒（PEDV）、猪轮状病毒（PoRV）、猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）在我国原种猪场的流行情况，采用ELISA检测方法对2016年1—6月采集的896份发病种猪血清样品进行了血清学检测。结果显示，PEDV、PoRV、TGEV抗体阳性率分别为62．3％，89．0％，23．0％，且存在混合感染情况，其中PEDV＋PoRV、PEDV＋TGEV、PoRV＋TGEV混合感染率分别为42．3％，8．5％，5．6％，PEDV＋PoRV＋TGEV混合感染率为8．9％；同时对检测样品进行了不同种猪类别的比较和不同日龄段的比较，发现不同类别种猪抗体阳性率和不同目龄种猪抗体阳性率的分布特征显著。结果说明我国原种猪场3种腹泻病毒中PoRV感染率最高，其次是PEDV和TGEV，且在不同种猪类别和不同日龄段的种猪中呈现规律性分布。本试验对国内原种猪场猪血清进行PEDV、PoRV和TGEV抗体阳性率检测，为我国种猪病毒性腹泻的防控提供了参考。; 王婧怡申之义原霖倪建强张瑜陈亚娜李文杰; 关键词：种猪猪轮状病毒猪传染性胃肠炎病毒血清学检测

猪细小病毒微滴数字PCR绝对定量检测试剂盒: 本发明公开了一种猪细小病毒微滴数字PCR绝对定量检测试剂盒。本发明提供的引物探针组，由序列1所示的引物F2、序列2所示的引物R2和探针P2组成；探针P2的核苷酸序列如序列表的序列3所示，一个末端具有荧光报告基团，另一个末...; 原霖杨林宋晓晖王传彬韩焘吴佳俊亢文华倪建强周智訾占超王晓英毕一鸣王静汪葆玥陈亚娜; 文献传递

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