丁学锋
- 作品数:23 被引量:28H指数:3
- 供职机构:军事医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学文化科学化学工程更多>>
- 一种用于检测动物焦虑的高架平台及其应用方法
- 本发明涉及一种新的用于检测动物焦虑的高架圆形平台及其应用方法。该发明利用动物对高空的恐惧和探索本能之间的心理冲突制备焦虑模型。根据动物大小制备一定直径大小的圆形平台,并将其置于相应的高度,将平台半径分为若干等份,从而将平...
- 丁学锋赵永岐范明朱玲玲刘淑红赵彤
- 文献传递
- 小鼠Cpne5基因mRNA水平的表达分布及其在胚胎的表达定位被引量:3
- 2013年
- 目的明确小鼠Cpne5基因在mRNA水平的组织表达分布及其在胚胎的表达定位。方法提取新生、成年小鼠主要脏器的总RNA,利用RT-PCR法检测Cpne5 mRNA的表达量;合成针对Cpne5 mRNA的杂交探针,取不同胎龄胎鼠进行整体原位杂交。结果 Cpne5 mRNA在成年小鼠10种脏器组织均有不同程度的表达,以大脑,小脑,睾丸和肺脏表达量较高;而肝脏和肌肉未表达。新生小鼠9种脏器中,Cpne5表达量最高的是脑组织,眼和肾次之,肺和肝脏表达量很少。制备并评估Cpne5原杂探针的产量,SP6转录的反义探针浓度为100ng/μL,T7转录的正义探针浓度为10ng/μL,原位杂交结果显示Cpne5 mRNA主要表达于胎鼠的端脑、间脑、中脑及菱脑原节。结论在新生和成年小鼠的脑组织中Cpne5基因mRNA高水平表达,并在胎鼠发育过程中定位于胎脑。
- 靳雁斌丁学锋司慧远吴彦瑞王晓文吴燕范文红
- 关键词:信使RNA整体原位杂交小鼠
- 一种精子存活率分析的新方法
- 本发明涉及分析男性精子存活率的新方法。采用一定浓度的龙胆紫溶液对精液样品染色,在显微镜下观察染色结果,通过着色差异,判定存活精子和死亡精子,计算精子存活率。同一样本采用世界卫生组织推荐的伊红Y标准染色方法染色后计算精子存...
- 赵永岐刘淑红周明非范明朱望林凯吴燕丁学锋王飞赵彤房涛葛学铭
- 文献传递
- 人copineⅤ蛋白多克隆抗体的制备被引量:1
- 2008年
- 目的:制备兔抗人copineⅤ多克隆抗体。方法:将copineⅤN端423 bp(626~1 048 bp)构建到原核表达载体pET28a(+),转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下进行蛋白表达;以镍柱纯化后的蛋白为抗原,与等体积佐剂混合后免疫家兔3次;用ELISA和Western印迹检测抗血清,用(NH4)2SO4沉淀法初步纯化抗体。结果:表达并纯化了copineⅤN端蛋白,ELISA检测表明抗血清具有高亲和性,Western印迹检测表明抗体能特异性识别内源性和过表达的copineⅤ。结论:制备了具有高亲和性和特异性的抗人copineⅤ多克隆抗体。
- 丁学锋靳雁斌王晓文吴燕刘淑红宋小国范文红范明
- 关键词:原核表达多克隆抗体
- 59.不同氧浓度对线粒体自噬的影响
- 何云凌吴丽颖赵彤黄欣丁学锋王飞张宽朱玲玲范明
- 文献传递
- 阿的平对微波辐射小鼠血液系统炎症反应的影响被引量:3
- 2011年
- 本研究旨在探讨阿的平(Quinacrine)对微波辐射后小鼠外周血粒细胞、淋巴细胞、血清白介素1(IL-1)、白介素6(IL-6)含量的影响,观察阿的平对微波辐射引起的炎症反应的拮抗作用。130只BALB/c小鼠随机分为4组:正常对照组、辐射对照组(注射用水组)、低剂量组(阿的平12.6 mg/kg)、高剂量组(阿的平50.4 mg/kg)。小鼠灌胃给予阿的平后1小时,将辐射对照组、低剂量组、高剂量组用强度为50 mW/cm2的微波照射30分钟。在照射后即刻、1天、2天、7天处死小鼠取血,用血细胞分析仪测定外周血粒细胞数,用放射免疫法检测血清IL-1β、IL-6含量的变化。结果表明,微波辐照后粒细胞和淋巴细胞数量随时间延长明显增加,在给药组这些细胞数量改变的趋势均明显延缓;50 mW/cm2微波辐射1天后小鼠血清IL-1β水平明显升高,直至7天后方逐渐恢复至正常水平,而2个浓度的阿的平灌胃均能抑制辐射引起的血清IL-1β水平升高;50m W/cm2微波辐射后血清IL-6水平从即刻至7天逐渐升高,阿的平灌胃能够明显延缓IL-6的升高,在辐射后2天内阿的平的作用尤为明显。结论:辐照前灌胃给予阿的平能够明显延缓微波辐射引起的小鼠粒细胞和淋巴细胞数量增加,能够部分抑制血清IL-1β和IL-6水平的增高并产生了一定的拮抗作用。本研究结果提示阿的平可能有一定的抗微波辐射效应。
- 吴燕苏振涛周红梅王飞刘淑红丁学锋赵永岐范明
- 关键词:微波辐射炎症反应外周血粒细胞外周血淋巴细胞
- CopineV在发育中小鼠脑部表达分析
- 目的人copineV是从胎脑中分离出的新基因,属于具有Ca依赖的磷脂结合特性的copines家族。其N端有2个C2domain,参与Ca依赖的磷脂结合作用;C端具有1个A domain,介导与其他蛋白的相互作用。从其来源...
- 丁学锋吴燕靳雁斌刘淑红吴彦瑞吴海涛范文红范明
- 关键词:中枢神经系统原位杂交免疫组织化学
- 文献传递
- 亚甲蓝的一种抗急性脑缺血损伤用途
- 本发明涉及亚甲蓝(methylene blue,MB)的一种抗急性脑缺血新用途。亚甲蓝能够明显减小由永久性大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)引起的脑缺血梗死灶,缓...
- 吴丽颖范明朱玲玲邸瑶赵彤何云凌丁学锋吴奎武黄欣赵永岐刘淑红
- 文献传递
- SH-SY5Y细胞凋亡过程中Cpne5蛋白表达的变化
- 2013年
- 目的探讨Cpne5蛋白在SH-SY5Y细胞凋亡中表达量的变化。方法显微镜观察细胞形态及流式细胞术检测凋亡率,鉴定A23187诱导SH-SY5Y细胞凋亡及血清剥夺诱导凋亡的模型;免疫印迹法检测两种凋亡过程中Cpne5蛋白表达量的变化。结果 10μmol/L A23187诱导SH-SY5Y细胞24h,细胞出现皱缩、凋亡率增加。A23187诱导0.5h,Cpne5蛋白表达量即出现明显的上升,持续至12h;在24h时Cpne5蛋白表达量回落至诱导前水平。血清剥夺72h的SH-SY5Y细胞24份,凋亡率为23.2±2.1%,与对照组1.1±0.1%比,差异有统计学意义(P<0.01)。免疫印迹结果表明,SH-SY5Y细胞分别经血清剥夺1h、6h、12h、24h、72h对Cpne5蛋白表达量无明显变化。结论 A23187诱导SH-SY5Y细胞凋亡早期Cpne5蛋白表达量有显著变化;提示Cpne5基因可能参与凋亡调控的钙信号通路。
- 靳雁斌司慧远吴彦瑞丁学锋王晓文范文红
- 关键词:A23187血清剥夺细胞凋亡蛋白免疫印迹
- 不同浓度的添加剂N2和B27对神经干细胞增殖的影响被引量:1
- 2012年
- 目的:通过比较添加不同浓度的无血清培养添加剂N2、B27对神经干细胞增殖的影响,探讨一种最优的体外培养大鼠胚胎神经干细胞的方法。方法:分离培养胚胎13.5d SD大鼠的神经干细胞,采用CCK-8细胞计数、BrdU掺入、测量神经球直径的方法,比较不同浓度N2、B27对神经干细胞增殖的影响。结果:N2与B27合用对神经干细胞增殖和成球的作用最为明显,单独添加2%B27的作用优于1%B27和N2组。结论:1%N2和1%B27同时添加更有利于神经干细胞的增殖和自我更新,此方法为神经干细胞的应用提供了实验依据。
- 赵彤黄欣丁学锋吴奎武吴丽颖朱玲玲范明
- 关键词:神经干细胞增殖添加剂N2B27