高旭东
- 作品数：3 被引量：9H指数：2
- 供职机构：解放军第307医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- LINE-1编码蛋白L1-ORF1的原核表达纯化和多克隆抗体制备被引量：3
- 2010年
- 目的:制备具有肿瘤组织特异性表达的L1-ORF1蛋白多克隆抗体并进行初步应用研究。方法:采取基因工程表达方法制备L1-ORF1蛋白,免疫家兔制备多克隆抗体,间接ELISA检测抗体效价,Western blot和细胞免疫荧光方法检测抗体特异性,免疫检测验证其识别肿瘤细胞内L1-ORF1蛋白的特异性。结果:制备的抗L1-ORF1蛋白多克隆抗体具有很高的敏感性与特异性,免疫学检测表明该抗体不仅能检测出正常细胞中瞬时表达的L1-ORF1蛋白,而且可检测出肿瘤细胞中天然表达的L1-ORF1蛋白。结论:制备的多克隆抗体具有较高的敏感性与特异性,为以后该抗体的进一步应用奠定了基础。
- 胡明明朱运峰王越王宇张亮高旭东董金凯于继云
- 关键词：原核表达蛋白纯化多克隆抗体间接免疫荧光
- 下调LINE-1编码蛋白ORF-1p对肺癌细胞A549生物学特征的影响被引量：7
- 2010年
- 目的:探索逆转座子LINE-1编码的ORF-1p在肺癌发病过程中的分子机制。方法:利用RNAi技术,在肺癌细胞A549中下调LINE-1编码蛋白ORF-1p,随后对下调后的A549细胞的生物学特征进行细胞增殖(MTT方法)、细胞周期(流式细胞技术)以及集落形成(软琼脂克隆形成试验)等分析,观察细胞生物学特征的改变。并利用报告基因,进一步对细胞周期相关蛋白进行分析。结果:在A549细胞中,下调ORF-1p后细胞的增殖能力明显下降(P<0.05),细胞周期出现S期明显阻滞(P<0.05),肿瘤细胞的集落形成能力明显减弱(P<0.05),p15/p21报告基因表达显示,两种蛋白被显著上调。结论:下调LINE-1基因编码蛋白ORF-1p能够抑制肺癌细胞的生长以及肿瘤的形成。
- 高旭东胡明明朱运峰
- 关键词：RNAI肺癌
- 非编码RNA的表观遗传学调控及在肿瘤中的异常表达被引量：1
- 2009年
- 非编码RNAs(ncRNAs)在体内广泛存在,它通过表观遗传方式广泛参与多种重要的调控。对其表观遗传学调控机制还有不同观点,如通过采取RNA干扰的原理进行调控,或通过脱腺苷化作用、脱帽作用等导致靶mRNA的不稳定或抑制翻译等。这些作用使ncRNAs在肿瘤细胞中多表达异常并涉及其发生与发展的整个过程。本文综述了该领域的研究进展。
- 高旭东朱运峰
- 关键词：非编码RNA表观遗传学调控肿瘤
