高必峰 作品数:58 被引量:124 H指数:8 供职机构: 科罗拉多大学 更多>> 发文基金: 上海市科委国际合作基金 上海市教育委员会重点学科基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
正常气虚小鼠下丘脑-垂体-睾丸轴相关基因转录的特征 被引量:2 2011年 目的:观察正常气虚小鼠下丘脑-垂体-睾丸轴与睾酮合成调节相关基因的转录特征。方法:采用小鼠标准化诊法和辨证方法,筛选出正常气虚小鼠与正常小鼠,采用GeneChip Mouse Exon 1.0 ST Array等技术,检测其下丘脑-垂体-睾丸轴有关基因的转录水平。结果:与正常对照小鼠比较,正常气虚小鼠下丘脑Gnrh1表达略增;垂体上Gnrh受体上调,但Cga、Fshb和Lhb下调;睾丸Cyp11a1、Cyp17a1、Hsd3b1、Hsd3b6等与睾酮合成相关酶一致上调。结论:正常小鼠出现气虚证时,垂体促性腺激素表达量略减,而睾丸合成睾酮的系列关键酶的表达活跃,这构成了正常气虚证小鼠下丘脑-垂体-睾丸轴的特征。 吴中华 方肇勤 潘志强 刘小美 卢文丽 管冬元 梁超 高必峰关键词:下丘脑 垂体 睾丸 气虚 证候 基因芯片 H22荷瘤小鼠肿瘤发生后睾丸表达改变显著的基因 被引量:2 2009年 目的:探讨H22荷瘤小鼠肿瘤发生后睾丸基因表达谱改变的特征。方法:采用荷瘤小鼠标准化四诊及辨证方法,以及Gene Chip Mouse Exon1.0 ST Array等技术,检测H22荷瘤小鼠睾丸组织早期邪毒壅盛证和气虚证、中期阳气虚证、中晚期气阴阳虚证3个阶段4个证候睾丸基因表达谱的差异,重点关注肿瘤发生后一致上调或下调明显且表达量大的基因。结果:肿瘤发生后三个阶段一致上调的基因5个;一致下调的基因12个,其中7个与性激素和生殖有关;早期上调、中期和中晚期下调的基因1个;早期和中期上调、中晚期下调的基因3个。在这些基因中,Saa3在晚期气阴阳虚证表达上调了近60倍,Abpg、Pip、Car6在早期邪毒壅盛证表达上调了40-80倍,值得关注。结论:肿瘤发生后荷瘤小鼠睾丸基因表达的改变以下调为主,性激素合成与生殖受到影响;一些表达显著改变的基因值得进一步研究。 陈宝英 方肇勤 潘志强 卢文丽 梁超 吴中华 刘小美 侯俐 张辉 高必峰关键词:小鼠 肿瘤 睾丸 证候 基因 基因芯片 阳气虚证H22荷瘤小鼠胸腺独特上、下调的高表达基因 被引量:3 2010年 目的:观察荷瘤小鼠中期阶段阳气虚证胸腺独特上调和下调的高表达基因。方法:综合采用荷瘤小鼠及其标准化四诊及辨证方法,以及GeneChip Mouse Exon 1.0 ST Array等技术,检测在肿瘤中期阳气虚证H22荷瘤小鼠胸腺组织基因的表达,筛选独特上调或下调者,并重点关注表达量高的基因。结果:肿瘤中期阳虚证荷瘤小鼠胸腺独特上调的基因达260个,下调仅15个。结论:(1)荷瘤小鼠发展到中期的阳气虚证,其胸腺虽然已出现萎缩的现象,但仍处于代偿阶段;(2)Hey2、Hivep2、Stat6、Prdm1、Avpr1a、Ralb、Trdn、Mcmdc1、Olfr1351、Avil、Gns、Ros1等高表达上调的基因,可能与促进T细胞的分化成熟有关;(3)St8sia4、Nxph4、Spred2、Bcas3、Tbcd、Ctns等独特下调基因标志着胸腺内基因表达调节在整体上出现了紊乱,可能预示着胸腺衰竭阶段的到来。这些构成了肿瘤中期阶段阳气虚证荷瘤小鼠胸腺基因表达层面的特征。 丁善萍 方肇勤 卢文丽 潘志强 梁超 刘小美 侯俐 高必峰关键词:胸腺 基因 小鼠 证候 基因芯片 大鼠肝癌高表达基因cDNA序列的克隆 被引量:3 2008年 目的克隆出大鼠肝癌高表达EST片段相关基因的cDNA完整表达序列,为进一步揭示其生物学功能奠定基础。方法通过基因芯片检测出DEN诱发的大鼠肝癌高表达的EST片段;其中部分高表达的EST片段,采用电子克隆与PCR相结合的方法,克隆出其cDNA完整表达序列。结果与正常大鼠肝组织比较,肝癌组织中明显高表达的EST片段有34个。采用EST电子克隆技术与PCR技术相结合的方法,成功克隆出4个EST片段的cDNA序列,经进一步BLAST对比分析,证明G15、G20、G36、G40等4个基因为新基因,并进行GenBank登录,登录号分别为DQ480746、DQ480747、DQ480744、DQ912022。结论利用大鼠基因芯片高通量地筛选出DEN诱发的肝癌组织高表达的有关基因,并在充分利用生物信息学资源的基础上,成功克隆出4个新基因的cDNA序列,为今后进一步深入观察这些基因的功能及其在肝癌发生、发展过程中的作用机制打下良好的研究基础。 管冬元 方肇勤 朱希 吴中华 高必峰关键词:肝肿瘤 基因表达 基于芯片数据分析丝裂原激活蛋白激酶信号通路基因在不同证候H22肝癌小鼠肾上腺的表达差异 被引量:3 2009年 目的:探索丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)信号通路基因在不同证候H22肝癌荷瘤小鼠肾上腺的表达特征。方法:采用小鼠标准化四诊及辨证方法,以及GeneChip Mouse Exon 1.0 ST Array等技术,检测H22肝癌小鼠早期邪毒壅盛证和气虚证、中期阳气虚证、中晚期气阴阳虚证共4个证候肾上腺基因表达的差异,分析不同证候小鼠肾上腺组织MAPK信号通路的表达特征。结果:与正常小鼠比较,①肝癌小鼠各证候中,ERK通路、p38/MAPK通路、ERK5通路基因在肾上腺中表达升高;②JNK通路基因在各证候肝癌小鼠肾上腺中表达下降;③其他级联激酶基因在MAPK信号通路中表达也下降。结论:H22肝癌小鼠肿瘤发生后,其肾上腺组织MAPK信号转导中与TGF-β相关的p38/MAPK通路被激活,而JNK通路被抑制;另外两条ERK与ERK5通路同样也被激活。提示不同证候肝癌小鼠的肾上腺组织主动参与了MAPK信号转导过程。 潘志强 方肇勤 卢文丽 梁超 吴中华 刘小美 高必峰关键词:信号转导通路 丝裂原激活蛋白激酶 P38 证候 肾上腺 健脾益气法对DEN大鼠肝癌后基因组转录调控的生物信息学分析 被引量:8 2014年 目的研究健脾益气法对DEN大鼠肝癌基因表达谱的影响,初步探讨健脾益气法治疗肝癌的分子机制。方法利用affymetrix NetAffxTM、DAVID和STRING等在线分析软件,对前期用Affymetrix Rat 230A GeneChip arrays检测到的不同中医治法干预后的DEN大鼠肝癌基因表达谱进行生物信息学分析。结果健脾益气法对肝癌基因表达的调节要明显优于其它治法,其调节的差异基因440个,包括上调表达130个和下调表达310个。这些差异基因编码蛋白在生物学过程中主要参与对有机物的应答反应和胞外刺激反应,在分子功能上主要参与特定蛋白的结合,而在信号通路中主要参与Gq蛋白激活的花生四烯酸-HETEs代谢通路;这些差异蛋白的相互作用主要集中在Adcy3、Gnao1、Tgfb1、Vim等15个基因的表达产物,结合文献挖掘发现健脾益气法对肝癌基因表达的调节主要表现在对TGF-β1诱导的上皮-间质转化(EMT)的下调、cAMP含量的上调和PPARα等核受体的逆向调节等,其中以TGF-β1-EMT蛋白网络相关分子在DEN大鼠肝癌中的表现及健脾益气法对其下调作用最明显。结论健脾益气法对DEN肝癌大鼠的治疗是多方位的;对TGF-β1诱导的肝癌EMT过程和Gq蛋白激活的花生四烯酸-HETEs代谢通路的下调作用可能是健脾益气法治疗肝癌的重要机制。 卓少元 方肇勤 管冬元 吴中华 高必峰关键词:肝癌 基因 MT1E在肝癌细胞中的作用及不同中医治法对其表达调控的差异研究 目的比较常用不同中医治法对MT1E表达调控作用的差异,以及初步探讨MT1E在肝癌细胞中的生物学功能。方法1)以DEN诱发大鼠肝癌形成为模型,应用基因芯片检测健脾益气、清热解毒、活血化瘀等常用中医治法对MT1E基因表达的差... 管冬元 方肇勤 代小平 梁超 胡卫 吴中华 高必峰中晚期气阴阳虚证H_(22)荷瘤小鼠肿瘤组织差异表达基因的分析 被引量:2 2009年 目的:揭示H22荷瘤小鼠中晚期气阴阳虚证肿瘤组织基因表达的特征。方法:采用GeneChipMouse Exon 1.0 ST Array等技术及芯片分析方法,观察H22荷瘤小鼠中晚期气阴阳虚证与其他3个典型证候早期邪毒壅盛和单纯气虚证,及中期阳气虚证肿瘤组织基因表达的差异。结果:①筛选到中晚期阴虚证独特性高表达的基因12个,包括与蛋白酶或其抑制因子有关的基因Mmp10、Slpi等4个,与B淋巴细胞有关的基因Cxcl13、Pou2af1等3个,及其他相关的基因Igl-V1、Abpg等5个;②筛选到中晚期阴虚证独特性低表达的基因12个,包括与小鼠生殖、发育有关的基因Ldhc、Fabp9、Mael等9个,及其他功能类基因Cxcl9、Atp8b3等3个。结论:中晚期阴虚证H22荷瘤小鼠肿瘤组织中存在大量独特性表达的基因,可能是该证候与其他证候区别的内在特征。 卓少元 方肇勤 卢文丽 潘志强 梁超 吴中华 刘小美 侯俐 张辉 廖明娟 高必峰关键词:证候 同病异证 阴虚证 小鼠 荷瘤小鼠气阴阳诸虚证垂体独特上调和下调基因的表达及特征 被引量:1 2008年 目的:筛选荷瘤小鼠中晚期气阴阳诸虚证垂体独特上调和下调的基因并描述其特征。方法:采用荷瘤小鼠及其标准化四诊及辨证方法,及GeneChip MouseExonl.0STArray等技术,检测H22荷瘤小鼠早期邪毒壅盛证和气虚证、中期阳气虚证、中晚期气阴阳虚证共3阶段4个证候垂体基因表达的差异,重点关注那些表达量大、差异显著的基因,筛选气阴阳虚证独特上调和下调的基因。结果:筛选到气阴阳虚证独特上调的基因13个:Apoe、S100a8、Anxal、LOC383949、H2-Ea、S100a6、Vim、Tinf2、Ngp、Gbp5、Myc、C1s、Ltf;独特下调的基因5个:Klklb5、A1b1、Scdl、Bglap2、Gc。结论:①存活到中晚期的气阴阳虚证荷瘤小鼠,垂体细胞的增殖与代谢十分活跃;②这些基因的表达变化可能是肿瘤小鼠气阴阳诸虚证的标志之一。 刘小美 方肇勤 潘志强 卢文丽 梁超 吴中华 侯俐 张辉 卓少元 廖明娟 高必峰关键词:小鼠 垂体 证候 基因 基因芯片 邪毒壅盛证H_(22)荷瘤小鼠肿瘤组织基因的表达特征研究 被引量:4 2009年 目的揭示H22荷瘤小鼠邪毒壅盛证肿瘤组织基因表达的特征。方法采用GeneChip Mouse Exon 1.0 STArray等技术及芯片分析方法,观察H22荷瘤小鼠邪毒壅盛、早期气虚、中期阳气虚及中晚期气阴阳虚证肿瘤组织基因表达的差异。结果筛选到邪毒壅盛证独特性高表达的基因32个,其中包括Tcte3、Phf7、Ldhc等参与睾丸发育、精子或卵子发生的基因22个,Adipoq、Nrcam、Tnfaip6等与肿瘤有关的基因4个,以及Atp8b3、Pnpla3、Retn等其他功能的基因6个。筛选到邪毒壅盛证独特性低表达的基因2个,有Cort和LOC668417。结论邪毒壅盛证H22荷瘤小鼠肿瘤组织中存在大量独特性表达的基因,可能是该证候与其他证候区别的内在特征。 卓少元 方肇勤 卢文丽 潘志强 梁超 吴中华 刘小美 侯俐 张辉 廖明娟 高必峰关键词:肿瘤 证候 同病异证 基因芯片 小鼠