马骏双
- 作品数：6 被引量：54H指数：4
- 供职机构：江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 地衣芽孢杆菌α-淀粉酶基因的克隆和及其启动子功能鉴定被引量：23
- 2006年
- 根据已知α-淀粉酶编码基因保守区核苷酸序列,通过PCR和反向PCR技术克隆出Bacillus licheniformisCICIM B0204α-淀粉酶编码基因amyL全长序列及其上下游序列。B.licheniformisCICIM B0204amyL由1539bp组成,其上游180bp为启动子序列,下游160bp为终止子序列;成熟肽由512个氨基酸残基组成,氨基端的29个氨基酸残基为α-淀粉酶的信号肽。通过基因及其氨基酸序列比对发现,amyL及其编码产物与芽孢杆菌来源的α-淀粉酶具有高度相似性。将amyL的结构基因在PT7介导下于大肠杆菌中诱导表达,获得具有α-淀粉酶活性的表达产物。将amyL的启动子序列和信号肽序列与B.licheniformisCICIM B2004的β-甘露聚糖酶结构基因进行读框内重组,在大肠杆菌中获得了β-甘露聚糖酶的分泌表达,重组大肠杆菌表达295U/mL的β-甘露聚糖酶酶活。
- 牛丹丹徐敏马骏双王正祥
- 关键词：地衣芽孢杆菌Α-淀粉酶Β-甘露聚糖酶基因克隆启动子信号肽
- 高渗透压对细菌电转化率的影响被引量：13
- 2004年
- 研究了革兰氏阴性细菌大肠杆菌JM109和革兰氏阳性细菌地衣芽孢杆菌0204在电转化过程中,高渗溶液如山梨醇、甘露醇、甘油、蔗糖和葡萄糖对其电转化率的影响.结果表明,高渗溶液能够有效保护细胞,提高转化率.在复苏培养基中,0.7mol/L甘露醇对地衣芽孢杆菌0204的保护效果最好,0.1mol/L蔗糖对大肠杆菌JM109的保护效果最好.由此得到质粒DNA对地衣芽孢杆菌0204的最高电转化率为9.8×102转化子/μg,质粒DNA对大肠杆菌JM109的最高电转化率为5.9×108转化子/μg.
- 徐敏马骏双王正祥
- 关键词：电转化地衣芽孢杆菌大肠杆菌
- 地衣芽孢杆菌β-甘露聚糖酶的基因克隆和鉴定被引量：12
- 2007年
- 通过PCR技术从Bacillus licheniformis CICIM-B2004染色体DNA中克隆出编码β-甘露聚糖酶成熟肽的基因manL,并对其进行了鉴定.manL由1110bp组成,编码由332个氨基酸残基组成的β-甘露聚糖酶成熟肽.将manL在大肠杆菌JM109中表达,在12h内可表达325u/mLβ-甘露聚糖酶.
- 王正祥马骏双牛丹丹石贵阳
- 关键词：地衣芽孢杆菌Β-甘露聚糖酶基因克隆
- 嗜热芽孢杆菌2004产β-甘露聚糖酶产酶条件优化和酶学性质被引量：9
- 2006年
- 对芽孢杆菌2004 β-甘露聚糖酶进行了产酶条件优化、初步纯化及其酶学性质的研究.条件优化结果：1.5 g/dL槐豆胶,2 g/dL蛋白胨,培养温度为40 ℃,250 mL三角瓶装液量为70 mL,其他因素影响不大.此最佳产酶条件下,嗜热芽孢杆菌2004 12 h的产酶水平平均为41.92 U/mL,比原来提高了30倍.培养液离心得到上清液,经硫酸铵沉淀,Sephadex G-200分子凝胶过滤和DEAE纤维素离子交换,酶比活达到722 U/mg,纯化了23.94倍,收率为35.1 %.该酶的最适反应温度为70～80 ℃;反应的最适pH值为5.8～6.0;pH值稳定范围为4.0～9.0.金属离子Mg2＋和K＋对酶略有激活作用.适当浓度的Mg2＋不仅对酶有激活作用,还对酶的热失活具有保护作用.
- 马骏双姚婷婷石贵阳王正祥
- 关键词：Β-甘露聚糖酶发酵优化酶学性质
