颜江华
- 作品数：142 被引量：321H指数：9
- 供职机构：厦门大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金福建省自然科学基金厦门市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 诱骗受体DcR3的基因构建、表达及特异性鉴定被引量：3
- 2006年
- 目的:构建适于原核表达的人诱骗受体DcR3基因,并进行重组蛋白的表达纯化及特异性鉴定。方法:查得人DcR3cDNA全序列,将其分段设计引物,通过重叠PCR获得DcR3基因。构建pET-22b(+)/DcR3表达载体,转化大肠杆菌Rosseta-gami,IPTG诱导表达,Ni柱纯化。采用ELISA进行特异性鉴定。结果:通过重叠PCR获得了编码正确氨基酸序列的目的基因。目的蛋白以包涵体的形式表达,表达量占菌体总蛋白的30%以上。纯化后,蛋白纯度达95%以上。ELISA结果表明所纯化的蛋白可与抗DcR3抗体发生特异结合。结论:诱骗受体DcR3基因的成功构建、表达及纯化,为进一步的功能研究奠定了基础。
- 李文珠陶惠然颜江华张长弓苏金华王阶平杨桂旺庄国洪
- 关键词：DCR3基因构建基因表达
- MTT比法在细胞活性检测中的影响因素
- 本文应用微孔板培养细胞,利用水不溶性的tetrazolium．salt(MTT)在活细胞中能被还原成水不溶性的甲(?)产物,紫红色的甲(?)产物可被有机溶剂溶解,其光密度值的变化可做为测定的指标。结果表明溶解在DMSO中...
- 郑耘杨善民颜江华陈瑞川
- 关键词：MTT细胞数水不溶性活性检测
- 文献传递
- 一种新型融合蛋白(RGD)3/tTF的基因表达与活性分析被引量：6
- 2007年
- 为了发展一种新型的融合蛋白(RGD)3/tTF用于肿瘤血管的选择性栓塞治疗,利用PCR技术重组(RGD)3/tTF融合基因,克隆于pET22b(+)载体,表达于E.coliBL21(DE3)。用镍柱纯化融合蛋白。凝血实验与FⅩ活化实验检测融合蛋白tTF组分的活性。间接ELISA分析(RGD)3/tTF与αvβ3的特异结合能力。pET22b(+)/(RGD)3/tTF重组质粒成功获得并表达于E.coliBL21(DE3)。纯化蛋白(RGD)3/tTF能有效诱发血液凝固,活化FⅩ。(RGD)3/tTF与αvβ3的特异结合能力比RGD/tTF提高了32%。新型融合蛋白(RGD)3/tTF已在E.coli系统成功表达,表达蛋白保持tTF的活性并显示比RGD/tTF更高的与αvβ3的结合能力。
- 颜江华杨桂旺王阶平吴娜庄国洪
- 关键词：TTFRGD融合蛋白凝血
- 一种有效递呈胃癌抗原的树突状细胞的制备方法
- 一种有效递呈胃癌抗原的树突状细胞的制备方法，涉及树突状细胞。胃癌细胞MGC-803总RNA的提取、鉴定；SOCS1拮抗剂pJAK2(1001－1013)多肽的合成；外周血单个核细胞的分离；单核细胞的获取；未成熟树突状细胞...
- 陈玉强王勇军颜江华王生育
- 文献传递
- 作为免疫相关性疾病靶点的DcR3的研究进展被引量：2
- 2006年
- 诱骗受体3(decoy receptor 3,DeR3)是肿瘤坏死因子受体超家族的新成员。它通过拮抗Fas／FasL系统及LIGHT／ LTβR、LIGHT／HVEM/TR2系统的作用,在肿瘤及免疫性疾病中发挥重要作用。DcR3的基因位于20q13．3,在人肿瘤细胞中会发生基因扩增和重排;在多种肿瘤、自身免疫疾病中高表达;作用机制有LIGHT和配体FasL途径等;促肿瘤发生;可下调宿主免疫功能,能降低T细胞对同种抗原应答,有重大开发潜能。
- 李文珠庄国洪颜江华陶惠然
- 关键词：DCR3肿瘤自身免疫病移植免疫
- 九孔鲍球状病毒病研究
- 1999年2-5月,素有鲍鱼岛美称的东山县人工养殖的九孔鲍(杂色鲍)暴发了一起急性、烈性、毁灭性的传染病,并迅速波及全岛。全县约有60%的鲍鱼场发病并全部死亡,损失数千万元。此后,每年的冬、春低温季节,该传染病不断发生,...
- 黄印尧吴文忠方莹陈信忠颜江华倪子绵
- 关键词：九孔鲍人工养殖烈性传染病球状病毒
- 肺癌靶向血栓蛋白hu3D3V_H-tTF的表达及活性鉴定被引量：2
- 2008年
- 目的制备一种用于肺癌血管靶向栓塞治疗的融合蛋白hu3D3VH-tTF,并鉴定其生物学活性。方法利用重叠PCR技术构建tTF与hu3D3VH的融合基因,克隆至表达载体pET22 b(+),在E.coliBL21(DE3)中表达,镍亲和色谱柱纯化目的蛋白。ELISA检测融合蛋白hu3D3VH组分与肺腺癌细胞A549选择性结合活性,凝血实验和FⅩ活化实验鉴定融合蛋白tTF组分的促凝血活性。结果获得序列正确的hu3D3VH/tTF/pET22 b(+)重组子,融合蛋白在E.coliBL21(DE3)中高效表达。纯化后的融合蛋白与肺腺癌细胞A549具有选择性结合活性,并能活化FⅩ、有效促发血液凝固。结论成功构建hu3D3VH/tTF/pET22 b(+)重组子,hu3D3VH/tTF融合蛋白具有hu3D3VH的选择性结合能力同时具有TF的促凝血活性,为开展选择性肺肿瘤血管血栓性栓塞研究奠定了基础。
- 颜江华王生育王阶平王勇军黄志平王臻
- 关键词：TTF血栓肺癌
- 131I标记抗NRP-1单克隆抗体A6在荷瘤裸鼠体内分布和显像研究被引量：2
- 2014年
- 目的制备131I标记的抗神经纤毛蛋白-1（NRP-1）单克隆抗体A6（131I-A6），探讨其作为NRP-1靶向显像新型分子探针的可行性。方法（1）采用Iodogen法对A6进行131I标记，检测其标记率、放化纯和体外稳定性。（2）以人胶质瘤细胞株U87MG为实验细胞进行体外实验，测定131I—A6生物学活性、结合率及其与受体的亲和力。（3）将荷U87MG胶质瘤模型裸鼠采用随机抽样法分为5组，每组5只，分别于注射1．2MBq 131I-A6后24、48、72、96和120h处死，计算各脏器放射性摄取（％ID／g）、肿瘤／血液（T／B）和肿瘤／肌肉（T／M）比值。（4）取6只荷瘤裸鼠，以随机抽样法分为未阻断组和竞争阻断组，前组注射3．7MBq 131I-A6；后组注射3．7MBq 131I-A6和未标记的700仙gA6，均分别于注射后24、48、72、96和120h行SPECT／CT显像。采用两样本t检验对实验数据进行统计学分析。结果（1）131I—A6标记率为（95．46±3．34）％，放化纯〉95％；131I—A6在室温下PBS溶液中放置至96h，其放化纯仍〉85％。（2） 131I-A6与U87MG胶质瘤细胞特异性结合率1h达到最高值，为（15．80±1．30）％，在加入未标记的抗体A6时，U87MG细胞对131I-A6明显受抑制（t=2．862，P〈0．05）；与细胞表面抗原的亲和力（kd）为（1．67±0．14）nmol／L。（3）24h时131I—A6在荷瘤裸鼠血液放射性最高，为（8．00±1．42）％ID／g；其次是肝脏和肿瘤组织，分别为（7．68±1．56）和（6．00±1．24）％ID／g；脑、骨、肌肉组织放射性计数较低。给药后24h，T／B和T／M分别为0．78±0．10和3．20±0．30，随时间延长比值逐渐增高，在120h达到最高，分别为1．87±0．50和7．13±0．24。（4）体内显像示，注射 131I-A6后24h肿瘤略显影，随时间延长变清晰，120h显影为最清晰，阻断后未见肿瘤显影。结论 131I-A6的标记方法简单易行，标记率高，产物稳定性好，�
- 豆晓锋张亚飞蒋怡臻刘鹏颜江华吴华苏新辉
- 关键词：碘放射性同位素
- ^(131)I-McAbJHⅢFab′片段在荷瘤裸鼠体内的定位显像
- 1997年
- 用蛋白酶切技术制备ＭｃＡｂＪＨⅢＦａｂ′片段，回收率约１０％。片段活性相当于完整ＭｃＡｂ的１１０２稀释浓度。用氯胺Ｔ法标记ＭｃＡｂＪＨⅢＦａｂ′，对荷人肝细胞癌ＢＥＬ－７４０２裸鼠体内的放射免疫显像进行了研究。腹腔注射１３１Ｉ－ＭｃＡｂＪＨⅢＦａｂ′后２４～９６ｈ，肿瘤部位有放射性浓聚，以４８～７２ｈ影像最为清晰；而注射１３１Ｉ－ＭｃＡｂＪＨⅢ肿瘤部位也有积聚现象，但本底消除更慢。１３１Ｉ－ＭｃＡｂＪＨⅢＦａｂ′注射后７２ｈ，１３种器官的肿瘤组织与非瘤组织的放射性比值均大于３，肿瘤的定位指数为２．５６。
- 苏金华颜江华俞浩俞浩
- 关键词：酶解作用裸鼠放射免疫显像
- 抗人神经纤毛蛋白1的单域抗体及其制备方法
- 抗人神经纤毛蛋白1的单域抗体及其制备方法，属于基因工程和抗体工程技术领域。制备方法：克隆抗人神经纤毛蛋白1单域抗体基因，并将其导入载体，构建重组载体；将重组载体导入宿主细菌，构建表达抗人神经纤毛蛋白1单域抗体的重组工程菌...
- 颜江华王生育罗芳洪吴婷倪二茹王勇军
- 文献传递
