韩静贤 作品数:8 被引量:9 H指数:2 供职机构: 新乡医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 河南省教育厅科学技术研究重点项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 更多>>
细胞自噬和DNA识别受体与HTLV-1病毒复制关系 王辉 王洁 黄青松 杨波 牛志国 张文 高志涛 孙书明 吕壮伟 韩静贤 人类T细胞白血病1型病毒(human T-cell leukemia virus type 1, HTLV -1)是类似于HIV的一种嗜T细胞的逆转录病毒,主要通过血液、母婴、性等途径传播,可导致恶性血液病-成人T淋巴细...关键词: 胞外高迁移率组蛋白1对HTLV-1感染的T细胞中病毒复制的影响 被引量:4 2012年 目的探讨胞外的高迁移率组蛋白1(high mobility group box 1,HMGB1)对人T淋巴细胞白血病病毒1型(human T-cell leukemi int1,HTLV-1)感染的T细胞中病毒复制的影响。方法ELISA检测HTLV.1病毒阴性T细胞系Jurkat、MOLT4细胞及HTLV-1病毒阳性的T细胞系MT2、MT4细胞培养上清中的HMGBl水平;将HTLV-1的长末端重复序列荧光素酶报告基因pHTLV-1-LTR-luc转染病毒阳性细胞MT2,随后加入终浓度为0.25、0.50、0.75μs/ml的HMGBl多克隆抗体(PcAb)及其同型对照抗体,30、100、300ns/ml的重组人HMGB1蛋白(rhHMGB1)及其对照PBS,48h后检测荧光素酶活性;在病毒阳性细胞MT2中加入终浓度为0.25斗晷/ml的HMGBlPcAb及同型对照抗体,300ng/ml的rhHMGB1及对照PBS,real.timePCR检测病毒编码基因tax、poll、pol2、p19、gag、env。结果HTLv.1病毒阴性T细胞系和HTLV.1病毒阳性细胞系培养上清中的HMGBI水平无明显差异;0.25μg/ml的HMGBlPcAb可明显抑制HTLV-1-LTR的转录活性,而300ng/ml的rhHMGB1可明显促进HTLV.1.LTR的转录活性;real.timePCR检测显示0.25恤g/ml的HMGBlPcAb可明显抑制病毒编码基因poll,po/2、gag、e删的表达,300ns/ml的rhHMGB1可明显促进pol1、pol2、gag、env的表达。结论胞外的HMGB1可促进HTLV-1病毒感染T细胞的病毒复制。 王霞 牛志国 高彩 孙启蒙 王金恒 宋向凤 高志涛 韩静贤 王辉关键词:病毒复制 rhHMGB1对HTLV-1+MT2细胞中HMGB1相关受体表达的影响 被引量:3 2014年 目的探讨重组人高迁移率族蛋白1(recombinant human HMGB1,rhHMGB1)对人T淋巴细胞白血病病毒1型(HTLV-1)感染的T细胞中与HMGB1相关膜受体表达的影响。方法病毒阳性细胞MT2中加入终浓度为1μg/ml的人源化重组人rhHMGB1蛋白或等体积的PBS,培养24h后,以流式细胞术、免疫印迹、免疫荧光检测膜受体晚期糖基化终产物受体(receptor for advanced glycosylation end products,RAGE)、T细胞相关免疫球蛋白黏蛋白3(T cell immunoglobulin mucin3,TIM-3)、Toll样受体4(Toll like receptor4,TLR4)的表达及分布。结果流式细胞术检测结果显示1μg/ml rhHMGB1刺激MT2细胞后,与对照相比RAGE表达下降,TLR4的表达明显升高(P〈0.05);免疫印迹检测结果显示1μg/ml rhHMGB1刺激MT2细胞后,细胞总蛋白和胞质中,膜受体RAGE和TLR4表达均明显升高(P〈0.05),而TIM-3的表达没有明显变化;免疫荧光检测结果显示rhHMGB1刺激MT2细胞后TLR4和RAGE的荧光强度均有增加,而TIM-3的荧光强度没有明显变化,且TLR4、TIM-3集中于细胞膜,而RAGE则集中于细胞质,细胞膜表达较少。结论胞外的HMGB1可促进HTLV-1感染T细胞RAGE和TLR4的表达。 李向平 牛志国 韩静贤 高彩 刘威 宋向凤 高志涛 王辉HTLV-1 Tax蛋白阳性T细胞中EGR-1表达调控机制的研究 被引量:1 2014年 目的:探讨成人T淋巴细胞白血病病毒1型( HTLV-1病毒) Tax蛋白阳性T细胞TaxP中早期生长反应基因-1(EGR-1)表达调控的机制。方法构建不同长度的EGR-1调控序列报告基因,将其转染TaxP细胞,加入NF-κB抑制剂BAY 11-7082或同等体积的二甲基亚砜(DMSO),24 h后收集细胞检测荧光素酶活性;TaxP细胞上清中加入BAY 11-7082或同等体积的DMSO,24 h后免疫印迹检测EGR-1蛋白表达;将Tax及其突变体M22和M47分别转染293 T细胞,24 h后免疫印迹检测EGR-1蛋白表达。结果成功构建了不同长度及突变体的EGR-1调控序列荧光素酶报告基因;荧光素酶报告基因检测显示:相对于E1、E2而言, E3、DelE、MutE的荧光素酶活性明显降低,加入BAY 11-7082后,E1、E2的荧光素酶活性明显降低(P<0.01),而E3、DelE、MutE无明显变化;同样地,免疫印迹检测显示加入BAY 10-7082后,EGR-1蛋白表达明显降低;相对于野生型和M47,转染M22突变体后,293 T细胞EGR-1蛋白表达明显降低。结论 NF-κB是Tax蛋白阳性T细胞中EGR-1表达调控的关键核因子。 韩静贤 牛志国 刘威 高彩 宋向凤 张国俊 孙爱平 王辉关键词:TAX蛋白 早期生长反应基因-1 核因子ΚB HTLV-1病毒Tax蛋白阳性T细胞中EGR-1表达调控机制 目的:探讨HTLV-1 病毒Tax 蛋白阳性T 细胞TaxP 中早期生长反应基因-1 表达调控的机制.方法:构建不同长度的EGR-1 调控序列报告基因,将其转染TaxP 细胞,加入NF-κB抑制剂BAY 11-7082 ... 王辉 韩静贤 牛志国 刘威 高彩 宋向凤关键词:医学免疫学 TAX蛋白 早期生长反应基因-1 核因子ΚB HMGB1在HTLV--1感染的T细胞中促进病毒复制的分子机制 背景 三十年前,Poiese等从人皮肤T细胞淋巴瘤患者的淋巴细胞中分离出来人类T细胞白血病1型病毒(Human T-cell Leukemia Virus Type1, HTLV-1), HTLV-1是人类历史上第... 韩静贤关键词:HTLV-1 HMGB1 自噬 文献传递 人T细胞白血病1型病毒Tax蛋白、高迁移率组蛋白1及自噬 被引量:2 2015年 人T细胞白血病1型病毒(HTLV-1)是引起成人T细胞白血病的病原体,癌蛋白Tax在HTLV-1病毒复制及疾病转归过程中发挥重要的促进作用;自噬是细胞质内一种溶酶体降解途径,可以发挥细胞防御作用,参与病原体的清除。高迁移率组蛋白作为细胞应激的产物,在多种疾病中出现高表达,在细胞自噬、DNA损伤修复、炎症因子释放等生理或病理过程中发挥重要作用,与病原体感染关系密切。本文就Tax、高迁移率组蛋白1及细胞自噬三者之间的相互关系做一综述。 韩静贤 牛志国 王辉关键词:TAX蛋白 细胞自噬 HTLV-1病毒Tax蛋白阳性T细胞中EGR-1表达调控机制 目的:探讨HTLV-1病毒Tax蛋白阳性T细胞TaxP中早期生长反应基因-1表达调控的机制。方法:构建不同长度的EGR-1调控序列报告基因,将其转染TaxP细胞,加入NF-κB抑制剂BAY 11-7082或同等体积的DM... 王辉 韩静贤 牛志国 刘威 高彩 宋向凤关键词:医学免疫学 TAX蛋白 早期生长反应基因-1 核因子ΚB 文献传递