韩洪彦
- 作品数：21 被引量：79H指数：5
- 供职机构：军事医学科学院放射与辐射医学研究所更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金海外青年学者合作研究基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- β-Netrin抗原表位的分析及其抗体的制备与鉴定被引量：7
- 2005年
- 目的:制备抗神经细胞突起生长诱向因子(β-Netrin)的多克隆抗体(pAb)和单克隆抗体(mAb),并对其特异性进行鉴定。方法:应用GoldKey软件分析人βNetrinC末端结构域氨基酸的序列(共114个氨基酸),确定抗原表位并人工合成多肽。然后采用碳化二亚胺法,将合成肽与载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)偶联作为抗原,免疫BALB/c小鼠。取免疫小鼠脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞常规融合,依次进行HAT选择培养,间接ELISA法筛选阳性的杂交瘤细胞并克隆化。对分泌的mAb的效价、Ig亚类(型)及特异性,分别用间接ELISA和Westernblot进行鉴定。同时,通过免疫细胞化学染色鉴定抗体的特异性。另外,以偶联的分子免疫新西兰白兔,制备抗β-Netrin的pAb,用Westernblot鉴定其特异性。结果:以确定的此16个氨基酸的序列NH2-FRGKRT-LYPESWTDRG-COOH作为抗原表位,以人工合成多肽与BSA偶联作为免疫原,获得3株可稳定分泌特异性抗β-Netrin mAb的杂交瘤细胞。免疫细胞化学染色结果表明,这3株抗体均能特异性地识别细胞中的抗原。另外,制备了高效价的抗β-Netrin的pAb,并能特异性地识别原核表达的β-Netrin蛋白。结论:采用人工合成多肽作为半抗原成功地制备出抗β-Netrin的pAb和mAb。
- 余利红高艳王利红韩洪彦孙志贤张成岗
- 关键词：合成肽抗原表位抗体制备抗体鉴定
- 军营一起腺病毒暴发的流行株分离和血清学分析被引量：8
- 1999年
- 目的：针对１９９７年８月３０日～９月上旬某军营暴发的一起流感样疾病，迅速明确疫情和找出病原体及血清学依据。方法：应用主要呼吸道病毒抗原桥联快诊技术和病毒分离以及双份血清学检测技术。结果：３２例患者分泌物中有１１例检出腺病毒（Ａｄｖ）抗原，３０例分泌物标本全部分离出病毒流行株，流行株仅与抗腺病毒共同抗原单抗结合（ＩＦＡ＋＋＋）。３０例患者的双份血清分别与流行株作用，有２８例患者血清抗体出现≥４倍升高。３０例密切接触者血清与流行株作抗体检测，抗体几何平均滴度（ＧＭＴ）高达５１．２。结论：结果证实此次流行病是军营新兵的腺病毒暴发流行，流行株属腺病毒那个亚型，尚需进一步鉴定分析。
- 段佩若林京韩洪彦韩洪彦李洪海曹俊英
- 关键词：病毒血清学分析
- 抗8种主要呼吸道病毒单抗杂交瘤细胞库的建立和临床应用被引量：2
- 1999年
- 目的：为了对流感病毒甲型和乙型、副流感病毒１、２和３型、呼吸道合胞病毒及腺病毒３、７型主要呼吸道病毒进行快诊。方法：从１９８６到１９９７年应用杂交瘤单抗技术，制备出以上４类８种抗病毒单抗细胞库，连同用于连接物的抗碱性磷酸酶单抗细胞株，共有１１７株单抗细胞株。将以上４类８种病毒单抗连接抗碱性磷酸酶单抗复合物，以兔抗鼠搭桥进行ＡＰＡＡＰ桥联快速诊断。结果：获得满意结果，此技术结果清晰，无内源性酶干扰，只需１台普通光学显微镜，２～３ｈ可获得准确结果。本系列快速诊断试剂已获得国家４项新药证书及５项生产文号。结论：此抗主要呼吸道病毒单抗细胞库，不仅可提供快诊试剂，也可提供病毒亚型分析。
- 段佩若张励力韩洪彦张容惠赵华林京
- 关键词：呼吸道病毒单克隆抗体
- 单克隆抗体用于APAAP桥联酶标技术快速检测副流感病毒3型抗原的研究被引量：7
- 1992年
- 作者将副流感病毒3型(PIV-3)单克隆抗体(McAb)用于APAAP桥联酶标技术快速检测患儿PIV-3抗原100例,并与IFA技术及血凝抑制试验(HAI)作了比较,获得满意效果。其与IFA的阳性和阴性符合率均>96％。与HAI的阳性符合率为88％,阴性符合率为100％。由于呼吸道细胞内很少含有碱性磷酸酶,因此没有内源酶的干扰。另外,此技术不需荧光显微镜,一般光学镜下染色格外清晰,两小时可得到准确结果。
- 段佩若张励力韩洪彦张容惠
- 关键词：副流感病毒单克隆抗体
- 大鼠脑红蛋白(NGB)可溶性原核表达和单克隆抗体制备及鉴定被引量：28
- 2003年
- 脑红蛋白 (NGB)是新发现的脑特异的携氧蛋白 .为了对其功能进行深入的研究 ,应用已构建大鼠NGB基因编码区原核表达载体pGEX 4T 2 NGB转化的大肠杆菌BL2 1 ,获得可溶性表达产物 .用谷胱甘肽S 转移酶 (GST)亲和层析柱纯化后作为抗原 ,免疫Balb c小鼠 .通过传统的细胞融合方法制备了抗大鼠NGB的单克隆抗体 ,并对全部 4株单抗进行了亚类和亚型、效价和特异性鉴定 .
- 孙健伟韩洪彦徐文琳王春丽王航雁徐淑玲杨建萍张家洁于凤琴张成岗
- 关键词：脑红蛋白原核可溶性表达单克隆抗体
- APAAP免疫印迹技术对抗副流感病毒1，3型单克隆抗体识别抗原表位的研究被引量：3
- 1994年
- 副流感病毒１，３型（ＰａｒａｉｎｆｌｕｅｎｚａＶｉｒｕｓｔｙｐｅ１，３：ＰＩＶ＿１．３）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）应用免疫印迹技术（Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ）识别抗原表位特性。结果表明：ＰＩＶ＿１．３抗原经还原剂处理后，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ５％～１５％梯度胶电泳，能分辨二十多条清晰的蛋白带。转印后采用碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶复合物（ＡＰＡＡＰ）染色，本底浅，呈玫瑰红色带，优于ＨＲＰ染色结果。ＰＩＶ＿１的５株ＭｃＡｂ：ＩＣ＿５、ＩＨ＿６、ＩＨ＿２、ＩＣ＿１０、３Ｄ＿５分别与６８ｋＤ～５０ｋＤ、６８ｋＤ、５８ｋＤ～２７ｋＤ、５５ｋＤ～５０ｋＤ、５０ｋＤ对应ＰＩＶ＿１的蛋白质抗原表位起反应。ＰＩＶ＿３的６株ＭｃＡｂ：２Ａ＿１０、５Ｇ＿３、２Ｄ＿１１、２Ｅ＿１０、２Ｂ＿１２、４Ｆ＿１２与７０ｋＤ、６８ｋＤ、６０ｋＤ～５０ｋＤ、５５ｋｐ～４０ｋＤ、５５ｋＤ、４０ｋＤ对应的蛋白质抗原表位特异结合，说明ＰＩＶ＿１．３的１１株ＭｃＡｂ同对应抗原表位点的结合分布较广，有利于对ＰＩＶ＿１．３抗原的快速、敏感、特异检测。
- 张励力韩洪彦段佩若李明刚李成文刘芳
- 关键词：APAAP免疫印迹技术副流感病毒
- 军队人群流感监测(1995～2000)被引量：3
- 2002年
- 目的 :建立“全军流感监测系统” ,获得流感流行病学数据和病毒变异及流行趋势 ,实施流感预测预报。方法 :按WHO规定的原理和方法进行 :对流感流行株、抗原和基因变异以及血清抗体和病毒多病原实行监测。结果 :获军队流感病毒流行株 4 0株 ,副流感Ⅱ型流行株 2株 ;6 0 0 0名战士血清流感抗体纵向监测表明 :每年每名战士平均受流感病毒侵袭 1.4次 ,流感抗体在 6个月之内下降 6 7%。流感抗体横向监测表明 :甲 1型流感抗体从 1995年以来呈阶梯形下降 ,易感人群由 15 %上升至 75 %。甲 3型流感抗体从 1997年以来长期处于高水平 ,预示将会发生变异。 10 0 0余名战士鼻咽分泌物多病原检测结果表明 :流感暴发流行期病毒总检出率为70 % ,一般流行季节约 5 0 %。抗原性变异和基因测序分析结果表明 :甲 1型流感株已发生明显变异 ,发现 3株新流行株与标准株的同源性仅有 92 %和 91% ,新株丢失了 130位氨基酸和 30 4位糖化位点。对 14 84 0名战士调查表明 :在流行季节 4 5d内 ,流感发病率 >2 1% ,缺勤约 5 0万工作日 ,军营病毒暴发流行疫情可在 6h作出报告。结论 :初步建立了军队人群流感监测系统 ,掌握了军队战士主要呼吸道病毒的发病率和易感率 。
- 段佩若马纯钢张励力韩洪彦张容惠赵华林京王希良严冰
- 关键词：流感监测抗原变异血清学分析基因分析军队
- 2型副流感病毒单克隆抗体的制备及临床快速诊断的应用被引量：3
- 1994年
- ２型副流感病毒单克隆抗体的制备及临床快速诊断的应用段佩若，张励力，韩洪彦，张容惠（中国人民解放军２６２医院临床实验科，北京１０００８８）２型副流感病毒（Ｐａｒａｉｎｆｌｕｅｎｚａｖｉｒｕｓｔｙｐｅ２，ＰＩＶ－２）又称ＣＡ病毒（Ｃｒｐｕｐａｓｓｏｃｉａ...
- 段佩若张励力韩洪彦张容惠
- 关键词：流行性感冒流感病毒抗体
- 甲型和乙型流感单克隆抗体用于碱性磷酸酶桥联酶标快速诊断被引量：5
- 1991年
- 作者将甲型和乙型流感单克隆抗体(McAb)用于桥联酶标技术快速诊断流感抗原125例,以IFA技术作对照,获得满意效果。其阳性符合率是87.5％;阴性符合率是96.1％。由于碱性磷酸酶主要存在于肠道,而呼吸道细胞几乎不含此酶,因此没有内源酶的干扰,结果在一般光学镜下格外清晰易辨。此技术诊断流感快速,2h内可得到准确结果。染色封片后半年内细胞着色不变。有利于实验室之间的质量控制和作回顾性研究。
- 段佩若张励力韩洪彦杨康强张桦牛艾茹陈杭薇付丽萍
- 关键词：流感单克隆抗体
- 呼吸道合胞病毒单克隆抗体用于纸上桥联酶标诊断的初步探讨
- 1991年
- 为了呼吸道合胞病毒(RSV)能够在基层及时帮助诊断和控制其流行,作者旨在更加简化RSV的快速诊断,将RSV-McAb移在微孔滤膜上以搭桥法和RSV抗原结合,由碱性磷酸酶催化底物,在膜上显色。作者将RSV-McAb用于RSV培养物的检测,并作了异种动物血清封闭试验以及vero细胞等阴性对照,证实RSV-Mc-Ab用于纸上桥联是特异性显色,对23例患儿鼻咽部脱落细胞同时作纸上桥联,免疫荧光及APAAP 3种RSV的快速诊断的比较,获得初步满意结果。
- 段佩若张励力韩洪彦常汝虚谢建平周天栋李冬于国慧徐文华
- 关键词：单克隆抗体呼吸道病毒
