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重组人骨形态发生蛋白-2和-6对人骨肉瘤细胞株MG63和U2OS的作用: 2009年; 为研究重组人骨形态发生蛋白rhBMP-2和rhBMP-6对人骨肉瘤细胞株MG63和U2OS的作用,分别用含rhBMP-2和rhBMP-6及重组绿色荧光蛋白的条件培养液干预人骨肉瘤细胞MG63和U2OS,利用台盼蓝拒染法、TUNEL法、吖啶橙/溴乙啶(AO/EB)荧光双染法、Transwell小室和碱性磷酸酶活性测定法分别检测细胞增殖、凋亡、迁移以及成骨分化能力的变化。结果显示与未实施任何干预的空白对照组和用rGFP干预实验对照组相比,rhBMP-2和rhBMP-6的干预致两种骨肉瘤细胞株:细胞存活率均随时间逐渐降低;凋亡率呈时间依赖性增加;穿膜数明显减低;碱性磷酸酶(ALP)活性逐渐增加。以上差异均有统计学意义(P<0.01)。表明rhBMP-2和rhBMP-6可抑制人骨肉瘤细胞株MG63和U2OS的增殖和迁移、诱导其凋亡和向成骨细胞分化。; 何焕玲李星星吴丽美陈英华卫佳苗静琨周兰; 关键词：骨形态发生蛋白细胞迁移碱性磷酸酶活性

外源性S100A6对人骨肉瘤细胞株U2OS的增殖、凋亡及β-catenin表达的影响被引量：11: 2009年; 目的:探讨外源性S100A6对骨肉瘤细胞株U2OS的生物学作用及其可能机制。方法:MTT法检测S100A6对U2OS细胞增殖的影响及浓度依赖性,台盼蓝拒染法计数活细胞检测S100A6对U2OS增殖作用的时间依赖性,Hoechst染色检测细胞凋亡,Westernblot法及免疫细胞化学法检测细胞内β-catenin的表达变化。结果:S100A6作用3d时,浓度为30、100、300和1000μg/ml的重组S100A6(GST-S100A6)组的OD值分别比相应浓度的GST对照组的OD值减少20.5%、23.7%、32.2%和36.8%,P<0.05;蛋白浓度为100μg/ml时,GST-S100A6组的细胞数在前2d与GST组相似,第3、4、5d的细胞数分别降低到GST组的59%、46%、48%,P<0.05;GST-S100A6干预3d后细胞凋亡率增高3.16倍,P<0.01;免疫细胞化学法测得经GST-S100A6处理3d后β-catenin的平均光密度值比GST组增加22.9%,P<0.01;经携带S100A6基因的重组腺病毒(Ad-S100A6)处理3d后,Westernblot法检测细胞中β-catenin的校正灰度值为1.4204±0.1999,比对照组(Ad-GFP组,0.9996±0.1000)显著增高,P<0.01。结论:外源性S100A6能够抑制U2OS细胞的增殖、促进其凋亡和增加U2OS细胞中β-catenin水平。; 陈英华卫佳李星星吴丽美马闻张彦何通川周兰; 关键词：S100A6 骨肉瘤

人骨形态发生蛋白2,3,6,12对大鼠骨肉瘤细胞株UMR106的作用: 2010年; 目的:研究人骨形态发生蛋白(human bone morphogenetic proteins,hBMP)对大鼠骨肉瘤细胞株UMR106的作用。方法:用hBMP2,3,6,12重组腺病毒(AdBMP2,3,6,12)干预大鼠骨肉瘤细胞株UMR106,利用台盼蓝拒染法、TUNEL法、吖啶橙/溴乙啶(AO/EB)荧光双染法、Transwell小室和碱性磷酸酶活性测定法分别检测细胞增殖、凋亡、迁移以及成骨分化能力的变化。结果:与空白对照组和实验对照组比较,AdBMPs的干预致骨肉瘤细胞株细胞存活率降低,并呈一定的时间依赖性;凋亡率均随时间延长而增加,并且TUNEL和AO/EB两种检测方法的结果一致;3个检测时间点的细胞穿膜数均明显减低;碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性在干预第3天开始逐渐增加,至第9天仍可观测到,以上差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:以腺病毒介导基因转入的作用方式,hBMP2,3,6,12可以抑制大鼠骨肉瘤细胞株UMR106的增殖和迁移,并诱导其凋亡和向成骨细胞分化。; 李星星何焕玲吴丽美马闻陈英华卫佳苗静琨周兰; 关键词：骨形态发生蛋白细胞迁移碱性磷酸酶活性

hBMP9在人骨肉瘤细胞株MG63、U2OS和143B中的内源性表达被引量：1: 2010年; 目的:研究人骨形态发生蛋白(Human bone morphogenetic protein,hBMP)9在人骨肉瘤细胞株MG63、U2OS和143B中的内源性表达,为下一步研究hBMP9对骨肉瘤的体内外作用奠定实验基础。方法:利用免疫细胞化学法和Western blot法检测hBMP9在人骨肉瘤细胞株MG63、U2OS和143B中的内源性表达。结果:在MG63、U2OS和143B中,hBMP9均呈不同程度的阳性表达,并且两种检测方法所得结果一致。结论:hBMP9在人骨肉瘤细胞株MG63、U2OS和143B中均有内源性表达。; 吴丽美何焕玲李星星卫佳陈英华马闻周兰; 关键词：骨形态发生蛋白骨肉瘤细胞免疫细胞化学 BLOT

人S100A6对人骨肉瘤细胞系β-catenin的作用被引量：5: 2009年; 目的研究人S100A6对人骨肉瘤细胞系MG63和U2OS中β-catenin的作用。方法分别用携带人S100A6及其siRNA基因的重组腺病毒AdS100A6和AdSiS100A6感染MG63和U2OS,分别使细胞中S100A6表达上调和下调;RT-PCR、蛋白印迹和免疫细胞化学法分别检测细胞中β-catenin mRNA和蛋白表达。结果上调骨肉瘤细胞系MG63和U2OS中S100A6后,β-catenin mRNA和蛋白表达均增加(P<0.05),蛋白的增加以胞核更明显。下调S100A6则使细胞中β-catenin mRNA及蛋白表达减少(P<0.05),蛋白的减少也以胞核更甚。结论增加Wnt信号途径活性可能是S100A6参与肿瘤发生发展的机制之一。; 卫佳陈英华吴丽美马闻张彦何通川周兰; 关键词：S100A6 Β-CATENIN 骨肉瘤

β-catenin降低外源性hS100A6对骨肉瘤细胞的抑制作用被引量：1: 2010年; 目的研究外源性hS100A6抑制骨肉瘤细胞作用与Wnt/β-catenin信号途径的关系。方法用携带人β-catenin及其siRNA基因的重组腺病毒Adβ-catenin和AdSiβ-catenin分别上调和下调MG63和U2OS细胞中β-catenin水平,再用重组hS100A6处理这些细胞,然后通过MTT法检测细胞增殖能力的变化,Hochest染色法检测细胞凋亡的变化,划痕愈合实验和Transwell实验检测细胞迁移能力的变化。结果①外源性hS100A6抑制2株骨肉瘤细胞的增殖(P<0.05);β-catenin过表达和低表达则分别减弱和增强hS100A6对这2株细胞的增殖抑制作用(P<0.05);②外源性hS100A6促进2株骨肉瘤细胞的凋亡(P<0.05);β-catenin过表达和低表达则分别增强和减弱hS100A6对这2株细胞的促凋亡作用(P<0.05);③外源性hS100A6抑制骨肉瘤细胞株MG63的迁移(P<0.05);β-catenin过表达和低表达则分别减弱和增强hS100A6对MG63的迁移抑制作用(P<0.05)。结论β-catenin负性调节hS100A6对骨肉瘤的抑制作用;hS100A6对骨肉瘤的抑制作用可能经由Wnt信号途径及其他信号途径共同调控。; 卫佳李星星陈英华吴丽美马闻何通川周兰; 关键词：Β-CATENIN S100A6 生物学作用骨肉瘤

人骨形态发生蛋白3抑制骨肉瘤细胞系MG63和U2OS的体外生长被引量：3: 2009年; 目的研究人骨形态发生蛋白3(hBMP3)对骨肉瘤细胞系MG63和U2OS的生物学作用。方法hBMP3的重组腺病毒和表达hBMP3的条件培养液(rhBMP3-CM)干预MG63和U2OS,台盼蓝拒染法、TUNEL法、吖啶橙/溴乙啶荧光双染法、Transwell小室和碱性磷酸酶活性测定法分别检测细胞增殖、凋亡、迁移以及成骨分化能力的变化;空白组不做任何处理,实验对照组用AdGFP和rGFP-CM处理。结果实验对照组和空白组间差别无显著性。与各自的对照组相比,在观察时间内,两种处理均致实验组细胞:(1)存活率降低;(2)凋亡率增加;(3)穿膜细胞数减少;(4)碱性磷酸酶活性增加。结论hBMP3对骨肉瘤细胞系具有抑制作用,并促其向成骨方向分化。; 吴丽美何焕玲李星星陈英华卫佳左国伟苗静琨王嫣周兰; 关键词：骨形态发生蛋白骨肉瘤细胞迁移

外源性hS100A6对骨肉瘤细胞MG63的作用研究: 目的:研究外源性hS100A6对人骨肉瘤细胞系MG63增殖、凋亡及迁移的作用,并探讨其对Wnt/β-catenin信号途径的影响。方法:制备携带人S100A6基因的重组融合蛋白GST-hS100A6及其对照蛋白GST,使...; 陈英华卫佳李星星苗静琨吴丽美马闻何通川周兰; 关键词：S100A6 生物学作用骨肉瘤; 文献传递

外源性S100A6对黑色素瘤B16细胞增殖、凋亡的影响及其机制被引量：3: 2012年; 目的探讨外源性S100A6对黑色素瘤B16细胞增殖、凋亡的影响及其机制。方法采用MTT、台盼蓝拒染、Hoechst、Western blot、免疫细胞化学、免疫荧光和荧光素酶活性分析法检测S100A6对B16细胞增殖、凋亡、β-catenin的水平和分布、β-catenin/TCF4转录活性及经典Wnt信号途径(即Wnt/β-catenin信号)的下游靶基因c-myc表达的影响。结果 GST-hS100A6可抑制B16细胞的增殖,且呈时间-剂量依赖性;GST-hS100A6作用72 h后,B16细胞的凋亡率较GST对照组增加1.43倍;携带S100A6基因的重组腺病毒AdS100A6作用72 h后,B16细胞中β-catenin的表达量较对照腺病毒AdGFP组增加43.9%;GST-hS100A6可使B16细胞中β-catenin的表达增加,且以胞核增加为主;GST-hS100A6作用后,B16细胞的β-catenin/TCF4转录活性增至GST对照组的7.4倍,且该信号途径的靶基因之一c-myc的表达也增加70.4%。上述结果与GST对照组之间的差异均有统计学意义(P均<0.05或0.01)。结论 S100A6具有抑制黑色素瘤增殖、促进凋亡和上调其Wnt/β-catenin信号途径活性的作用,且上调Wnt/β-catenin信号途径活性可能是S100A6对黑色素瘤抑制性作用的机制之一。; 陈英华孙双双卫佳李星星游莉邹正渝黎玉叶何通川周兰; 关键词：S100蛋白质类黑色素瘤细胞增殖

S100A6抑制多种肿瘤细胞的增殖并促进其凋亡: 目的:探讨S100A6对多种肿瘤细胞包括小鼠黑色素瘤细胞株B16、人卵巢癌细胞低转移株HO8910和高转移株HO8910 PM、人结肠癌细胞株HCT116和SW480和人骨肉瘤细胞株MG63和U2OS细胞的增殖、凋亡的影...; 陈英华卫佳李星星何通川周兰; 关键词：S100A6 肿瘤细胞生物学作用; 文献传递

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陈英华

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