陈小乐
- 作品数:7 被引量:7H指数:2
- 供职机构:重庆市肿瘤研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金重庆市卫生局医学科研项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 内毒素耐受导致的GSK-3抑制对急性内毒素性肝损伤的保护机制
- 2013年
- 目的探讨内毒素(lipopolysaccharide,LPS)耐受导致的糖原合成酶激酶-3(glycogen synthase kinase-3,GSK-3)活性抑制对急性内毒素性肝损伤产生保护效应的潜在机制。方法建立LPS和GSK-3抑制剂氯化锂(LiCl)预处理的SD大鼠模型,采用半定量RT-PCR检测肝组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-10(IL-10)mRNA表达水平,以专用试剂盒检测代表肝组织中性粒细胞浸润程度的髓过氧化物酶(MPO)活性;用密度梯度离心法分离Kupffer细胞,建立LPS耐受和GSK-3抑制剂(LiCl和胰岛素)预处理的Kupffer细胞模型,用中性红法测定细胞吞噬活性;采用激光共聚焦显微镜和Western blot实验观察Kupffer细胞核因子-κB(NF-κB)p65的亚细胞定位和核转位情况。结果 LPS耐受和GSK-3抑制剂LiCl预处理均可减少大剂量LPS攻击导致的肝组织TNF-αmRNA上调表达(P<0.05)、促进IL-10 mRNA上调表达(P<0.05),减少LPS攻击导致的MPO活性升高(P<0.05);LPS耐受和GSK-3抑制剂(LiCl和胰岛素)均能增强Kupffer细胞吞噬活性(P<0.05);LPS耐受和GSK-3抑制剂LiCl预处理均可减少大剂量LPS导致的NF-κB p65核转位(P<0.05)。结论 LPS耐受导致的GSK-3功能活性抑制,可能通过对NF-kappaB p65核转位、炎症细胞因子分泌、中性粒细胞浸润和Kupffer细胞吞噬活性等下游事件产生影响,从而保护急性内毒素性肝脏损伤。
- 徐发良陈小乐朱宁生熊忠讯于峰黄春
- 关键词:糖原合成酶激酶-3氯化锂器官保护
- 特异性识别胃癌细胞的DNA适配子GCA‑5及其应用
- 本发明涉及基因工程领域,具体是一种特异性识别胃癌细胞的DNA适配子GCA‑5及其应用,DNA适配子GCA‑5的核苷酸序列为SEQ ID NO.1,经荧光类物质或酶类物质修饰后的GCA‑5在识别胃癌细胞方面的应用,包括用于...
- 徐发良陈小乐
- 文献传递
- 利用细胞-指数式富集的配体系统进化技术筛选肿瘤细胞DNA适配子
- 2013年
- 目的建立一种通用的细胞-指数式富集的配体系统进化(Cell-SELEX)技术平台,用于筛选特异性结合于肿瘤细胞的DNA适配子。方法采用PCR法建立随机双链DNA(dsDNA)寡核苷酸文库,用卵白素包被的琼脂糖珠从dsDNA库分离单链DNA(ssDNA)文库;以体外培养的肿瘤细胞作为正筛选的靶标,以相同组织来源的正常对照细胞作为负筛选的靶标,消减法进行Cell-SELEX筛选和PCR扩增以获取DNA适配子;流式细胞仪监测适配子的富集效率(亲和力);采用常规分子生物学技术进行适配子的克隆、测序和序列分析。结果成功建立了ssDNA库,经过12轮Cell-SELEX筛选,获得了特异性结合于肿瘤细胞的DNA适配子;挑选120个阳性克隆送测序,鉴定出21个适配子,采用NCBI网站提供的Blastn程序进行精确比对未发现相似序列。结论本实验建立的技术平台可在较短时间内获取特异性结合于特定肿瘤细胞的DNA适配子。
- 徐发良周琦匡毅陈小乐张海伟顾长国
- 关键词:适配子肿瘤靶向治疗
- 治疗乳腺增生症的消核类中药制剂组方分析被引量:4
- 2015年
- 目的:分析消核类中药制剂治疗乳腺增生症的组方及用药规律,为进一步调整治疗方法提供理论依据。方法:利用万方、维普和CNKI数据库,以"消核"和"乳腺增生"为关键词检索中文文献,记录符合纳入标准的文献中的临床症状、中药组方、用药方法、治疗效果等信息,运用辨证论治的方法分析其组方特点和用药规律。结果:检得文献30篇、纳入文献23篇,涉及消核类中药制剂25首,总有效率85.24%,涉及中药126味,用药频次438,这些药物中最常用的配伍是柴胡、夏枯草、当归、香附和牡蛎;主要药物的药性以味苦、辛为主,归经以肝经为主。结论:消核类中药制剂以疏肝理气、补益肝肾、软坚散结、调理冲任为主要原则,采用补泻同施、辨证施治的方法治疗乳腺增生症,取得了良好疗效;采用这些原则对消核类制剂进行调整和规范,还可能提高临床疗效。
- 徐发良陈小乐陈红
- 关键词:中医药乳腺增生症组方分析中药配伍
- 脂多糖预处理导致的糖原合成酶激酶-3抑制对肝糖原的影响和机制被引量:2
- 2014年
- 目的探讨脂多糖预处理时糖原合成酶激酶3(glycogen synthase kinase-3,GSK-3)功能活性的变化及其对肝组织糖原代谢的影响和机制。方法雄性SD大鼠随机分为正常对照、脂多糖预处理和GSK-3抑制剂氯化锂预处理组,分别进行相应处理后再接受大剂量脂多糖(10 mg/kg)攻击以建立脂多糖诱导的急性肝损伤模型;采用PAS染色法观察肝组织糖原聚集,用试剂盒法定量检测肝组织糖原含量,以Western Blot法半定量分析GSK-3的蛋白表达和抑制性磷酸化水平,采用考马斯亮兰比色法测定肝组织钙依赖蛋白酶的活性。结果尽管大剂量脂多糖攻击后各组动物肝组织糖原含量组间比较均无显著差异(P>0.05),但均较攻击前有显著降低(P<0.05),且脂多糖和氯化锂预处理均可导致肝组织糖原含量增加(P<0.05);尽管诱导脂多糖预处理并未改变GSK-3的蛋白表达水平(P>0.05),但导致GSK-3β抑制性磷酸化(P<0.05)和GSK-3α不完全裂解;大剂量脂多糖攻击后肝组织钙依赖蛋白酶活性较前显著升高(P<0.05),但组间比较无显著差异(P>0.05)。结论脂多糖预处理导致GSK-3β抑制性磷酸化和GSK-3α不完全裂解,促进肝组织糖原合成和聚集,但不影响钙依赖蛋白酶活性,有利于增加肝组织糖原储备并可能在遭受大剂量脂多糖攻击时提供能量需求。
- 陈小乐龚建平徐发良
- 关键词:糖原合成酶激酶-3器官保护GLYCOGENSYNTHASE
- 特异性识别胃癌细胞的DNA适配子GCA-5及其应用
- 本发明涉及基因工程领域,具体是一种特异性识别胃癌细胞的DNA适配子GCA-5及其应用,DNA适配子GCA-5的核苷酸序列为SEQIDNO.1,经荧光类物质或酶类物质修饰后的GCA-5在识别胃癌细胞方面的应用,包括用于临床...
- 徐发良陈小乐
- 消核糖浆治疗男性乳房发育症的初步评价被引量:1
- 2014年
- 目的:初步评价中药制剂消核糖浆治疗男性乳房发育症的疗效、安全性和经济性。方法:将适合药物治疗的男性乳房发育症患者按照3∶1的比例随机分为单药治疗组和联合用药组;单药治疗组再随机分为3个亚组分别接受消核糖浆、红金消结胶囊或托瑞米芬治疗;联合用药组则随机分为2个亚组分别接受消核糖浆-托瑞米芬、红金消结胶囊-托瑞米芬联合治疗;治疗2个疗程后复查,并进行临床疗效、安全性和经济性的初步评估。结果:消核糖浆治疗男性乳房发育症的有效率为72.7%,与红金消结胶囊或托瑞米芬的疗效相当(P>0.05),但复发率9.43%显著低于托瑞米芬(P=0.029);消核糖浆联合托瑞米芬的有效率为91.3%,与对照组的疗效相当(P>0.05);消核糖浆和红金消结胶囊的不良反应发生率相似(P>0.05),均显著低于托瑞米芬组(P=0.024);成本-效果分析显示,如果获得相同的临床疗效,消核糖浆组的成本低于红金消结胶囊组,其经济性更佳。结论:消核糖浆治疗男性乳房发育症的疗效与两个对照药物相似,但复发率和不良反应发生率比托瑞米芬低,经济性比红金消结胶囊合理,因而在男性乳房发育症的治疗中具有一定的优势。
- 陈小乐徐发良陈红朱宁生刘晓渝曾晓华
- 关键词:男性乳房发育症中医药药物治疗