陈宗正 作品数:9 被引量:20 H指数:2 供职机构: 西北农林科技大学动物科技学院动物脂肪沉积与肌肉发育实验室 更多>> 发文基金: 国家科技重大专项 转基因生物新品种培育专项 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
猪SFRP4基因的表达规律及抑制剂SP600125对前体脂肪细胞分化的影响 被引量:1 2012年 分泌型卷曲相关蛋白4(secreted frizzled-related protein 4,SFRP4)是Wnt信号通路可溶解的调控子.通过高通量测序(Solexa)技术、实时定量PCR(RT-qPCR)技术对瘦肉型和脂肪型猪不同生长阶段脂肪组织、脂肪细胞中SFRP4表达规律进行研究;用JNK信号通路特异性抑制剂SP600125处理猪原代前体脂肪细胞,研究抑制JNK信号通路对猪前体脂肪分化以及SFRP4 mRNA和蛋白表达的影响.结果显示,SFRP4在脂肪型猪脂肪组织表达量显著高于瘦肉型猪(P<0.01);不同组织检测结果发现,SFRP4广泛表达于各个组织,并高表达于脂肪组织;前体脂肪细胞向成熟脂肪细胞分化过程中SFRP4表达量逐渐升高;SP600125促进前体脂肪细胞分化,引起PPARγ、FABP4、ATGL、Perilipin的显著升高(P<0.01),而SFRP4表达被显著抑制.本研究为调控脂肪细胞分化关键基因的筛选提供新的理论参考. 关华 郑加盟 陈宗正 宋子仪 杨浩 杨公社关键词:高通量测序 前体脂肪细胞 分化 猪骨骼肌卫星细胞体外培养方法 本发明公开了一种猪骨骼肌卫星细胞(Skeletal Muscle Satellite Cell,SMSC)体外培养方法,包括以下步骤:样品采集;培养皿的预处理;骨骼肌纤维的移植;单根肌纤维的移除;SMSC的传代培养;SM... 杨公社 刘月光 史新娥 沈清武 杨秋梅 高晓娟 陈宗正文献传递 EGCG通过抑制Wnt/β-catenin信号通路调节猪骨骼肌卫星细胞的增殖和分化 被引量:2 2012年 为了阐明Wnt/β-catenin信号通路在猪骨骼肌卫星细胞增殖分化中的作用,利用Wnt/β-catenin信号通路抑制剂(-)-表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)处理猪骨骼肌卫星细胞,采用MTT、流式细胞术、免疫荧光和Western印迹等方法检测了细胞增殖和分化情况.结果显示,与对照组相比,EGCG以时间、浓度依赖方式抑制猪骨骼肌卫星细胞的增殖.流式细胞术检测细胞周期结果表明,与对照组相比,经EGCG处理后,猪骨骼肌卫星细胞的G1期细胞比例上升,而G2和S期细胞比例下降,这说明细胞被阻滞在G1期,细胞的增殖受到抑制.免疫荧光检测分化过程中MyHC的表达,与对照组相比,EGCG促进猪骨骼肌卫星细胞的分化,并降低增殖标志基因MyoD以及细胞周期蛋白D的表达量,而提高了分化标志基因MyoG和MyHC的表达量.在猪骨骼肌卫星细胞增殖分化过程中,EGCG降低β-联蛋白的表达量,且核内的β-联蛋白明显减少.结果表明,EGCG通过抑制Wnt/β-catenin信号通路抑制猪骨骼肌卫星细胞的增殖,促进其分化. 陈宗正 仇杨 吴国芳 史新娥 沈清武 杨公社 孙世铎关键词:骨骼肌卫星细胞 wnt/β-catenin信号通路对动物卫星细胞向不同肌纤维类型分化的作用 被引量:1 2012年 动物出生后骨骼肌在生长发育和再生过程中,卫星细胞发挥着十分重要的作用,其分化及形成肌纤维的类型与肉品质密切相关,wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路是调节此过程的重要信号通路。近几年,wnt/β-catenin信号通路在骨骼肌生长和再生过程中的作用及机制研究受到人们的重视,已积累了一些相关研究成果。本综述系统阐述了wnt/β-catenin信号通路在卫星细胞自我更新、分化以及肌纤维类型形成中的作用。 史新娥 刘月光 杨秋梅 陈宗正 杨公社关键词:WNT/Β-CATENIN 卫星细胞 肌纤维类型 EGCG对猪骨骼肌卫星细胞增殖分化影响及其机制的初步研究 骨骼肌组织是由终末分化状态的多核肌纤维组成,哺乳动物出生后肌纤维数量基本不变,而当其受到外界刺激(损伤、锻炼等)时,处于静息状态的骨骼肌卫星细胞就会被激活,从肌纤维肌膜与基底膜之间(解剖学位置)游离出来,经历增殖和定向分... 陈宗正关键词:EGCG WNT/Β-CATENIN 骨骼肌卫星细胞 文献传递 猪骨骼肌单根肌纤维分离、培养方法的建立 骨骼肌由肌纤维组成,动物出生后,肌纤维数量一般保持恒定不变,肌肉生长主要依赖于肌纤维体积的增大。骨骼肌卫星细胞是位于肌纤维膜与基膜之间的肌源性干细胞,通常以静息状态存在,当受到外界刺激(生长、远动、损伤等)时,就会被激活... 刘月光 史新娥 沈清武 杨秋梅 陈宗正 高晓娟 杨公社关键词:骨骼肌纤维 卫星细胞 Wnt/β—catenin信号通路相关基因及MyHCs在猪骨骼肌发育中的表达规律 猪生后骨骼肌纤维.根据其代谢和收缩功能分为慢速氧化型、快速氧化型、快速酵解型和中间型四种,分别由不同的肌球蛋白重链(MyHC)异构体MyHCI、MyHCIIa、MyHCIIb和MyHCIIx表示。猪骨骼肌纤维数目在出生前... 杨秋梅 史新娥 沈清武 刘月光 高晓娟 陈宗正 杨公社关键词:WNT/Β-CATENIN 肌纤维类型 信号通路 Wnt/β-catenin信号通路相关基因及MyHCs在猪骨骼肌发育中的表达规律 被引量:4 2011年 为研究Wnt/β-catenin信号通路对猪骨骼肌纤维类型发育的影响,并探讨其潜在的作用机制。本研究以1日龄、1周龄、2周龄、1月龄、2月龄和6月龄大白猪背最长肌组织为研究材料,利用Real-time PCR、Westernblot、冰冻切片免疫组化等方法,研究Wnt/β-catenin信号通路相关基因及MyHCs在猪骨骼肌发育过程中的表达规律。Real-time PCR结果显示:MyHC-Ⅰ、GSK-3β、β-catenin和Fz3mRNA随着个体日龄增加表达量下降,My-HC-Ⅱb mRNA表达逐渐升高,MyHC-Ⅱa mRNA表达量在1日龄~2周龄阶段升高后又降低,MyHC-Ⅱx mRNA表达量变化不显著;免疫组化结果显示:快肌蛋白呈棕色,慢肌蛋白呈灰白色,在出生1日龄~1周龄时,快、慢肌呈弥散交叉分布,到2周龄时慢肌簇被快肌包被在肌束中间,随着年龄增加,慢肌簇逐渐减少。Western blot检测结果显示:慢肌蛋白从出生到2周龄显著下降,在2周龄~2月龄阶段下降不明显,生长到6月龄时又显著降低;快肌蛋白随日龄增加而增加,在2周龄~6月龄期间增加极显著;β-catenin、GSK-3β蛋白表达量与其mRNA表达一致,而p-β-catenin在2周龄时显著高于1日龄,且随后持续上调;Tyr216 p-GSK-3β蛋白表达量早期生长下调极显著;Ser9p-GSK-3β蛋白表达量则是在后期生长显著降低。上述基因表达变化规律揭示,Wnt/β-catenin信号通路相关基因β-catenin、Fz3、GSK-3β与MyHC-Ⅰ表达呈正相关,与MyHC-Ⅱ表达呈负相关,其在骨骼肌生长过程中对肌纤维类型组成具有重要影响。 杨秋梅 史新娥 沈清武 刘月光 高晓娟 陈宗正 杨公社关键词:WNT/Β-CATENIN信号通路 肌纤维类型 背最长肌 发育