陈中璞
- 作品数：23 被引量：57H指数：5
- 供职机构：东南大学附属中大医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省“科教兴卫工程”医学重点人才基金江苏省医学重点人才培养基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 心脏成纤维细胞分化可能与DNA甲基化修饰调控有关被引量：1
- 2016年
- 目的:以转化生长因子-β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)体外诱导心脏成纤维细胞分化,探讨其中DNA甲基化的调控作用。方法:分离培养SD大鼠心脏成纤维细胞并行免疫细胞化学鉴定。取P1代细胞,分别以TGF-β1、DNA甲基转移酶(DNA methyltransferases,DNMT)抑制剂5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-aza-2′-deoxycytidine,5-aza-d C)及TGF-β中和抗体进行干预。Western blot及细胞免疫荧光检测α平滑肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达,实时定量PCR检测α-SMA以及DNMT1、DNMT3a、DNMT3b的基因表达,并进行DNMT活性测定。结果 :与对照组相比,TGF-β1与5-aza-d C一样均可诱导心脏成纤维细胞表达α-SMA,且TGF-β1可显著抑制总DNMT的活性(P<0.05),并可抑制DNMT1及DNMT3a的表达(P<0.01),但对DNMT3b的表达无明显影响(P>0.05)。结论:心脏成纤维细胞分化可能与DNA甲基化修饰调控有关,本研究从表观遗传学角度为心肌纤维化防治研究提供了新的治疗靶点。
- 潘啸东何砚如陈中璞刘玉马根山
- 关键词：转化生长因子-Β1DNA甲基化DNA甲基转移酶
- 急性心肌梗死模型制备中电风暴的不同处理方法比较
- 李拥军汤涌潘啸东陈中璞章晓国马根山
- 基质细胞衍生因子-1提高小鼠心肌干细胞增殖和迁移能力的机制研究
- 陈中璞马根山
- CXCR4基因转染猪MSCs提高细胞体外迁移能力的研究
- 目的：探讨基质细胞衍生因子-1（SDF-1）受体-CXCR4基因转染猪骨髓间充质干细胞（MSCs）提高细胞体外迁移能力的可行性。
方法：（1）按照Nancer方法培养MSCs，转染带荧光的CXCR4基因，流式细胞仪...
- 陈中璞
- 关键词：基质细胞衍生因子-1CXCR4基因心肌样细胞
- 文献传递
- SDF-1干预小鼠心肌干细胞促进c-kit(+)细胞增殖的体外研究
- 陈中璞马根山
- 人心肌干细胞的体外改良培养被引量：4
- 2013年
- 目的:用改良的培养基培养人心肌干细胞,并筛选鉴定。方法:通过心脏外科手术取下右心耳组织,用组织块培养法来获得原代心肌干细胞,用改良的心肌干细胞培养液培养,增殖传代后进行心肌干细胞表面标志物的鉴定,再用免疫磁珠筛选以获得较纯的目的心肌干细胞。结果:培养约2周后,贴壁良好的心肌组织块周围可见有小、圆、亮的细胞爬出,用Accutase(细胞消化液)短时间消化后冲洗细胞,培养增殖传代,其增殖能力与传统心肌干细胞培养液培养的细胞比较无显著差异,用流式细胞术鉴定c-Kit(干细胞表面标志物),其阳性率(6.8±2.1)%,之后用含抗c-Kit抗体(anti-c-Kit)的磁珠进行分选,即得较纯的c-Kit阳性(c-Kit+)心肌干细胞,它们可以分化为心肌细胞。结论:通过心脏组织块贴壁培养法,用改良后的心肌干细胞培养基培养,再借助免疫磁珠的分选,同样可得到较纯的c-Kit+心肌干细胞。
- 胡圣大马根山姚玉宇陈中璞严凤娣
- 关键词：心肌干细胞流式细胞术磁珠分选
- DNA甲基化在基质细胞衍生因子--1α促进小鼠心脏祖细胞c--kit基因表达中的作用
- 陈中璞
- 基质细胞衍生因子-1α对小鼠心脏干细胞凋亡的影响及其机制被引量：2
- 2013年
- 目的 探讨基质细胞衍生因子-1α（stromal cell-derived factor-1 α,SDF-1α）对体外血清剥夺诱导的心脏干细胞（cadiac stem cells,CSC）凋亡的抑制作用,并探讨其机制.方法 体外分离培养小鼠CSC.免疫磁珠分选c-kit＋ CSC,纯化后分为5组,即正常对照组、饥饿组、饥饿＋SDF-1α组（又根据SDF-1α不同浓度分为10、50、100、200 ng/ml干预亚组）、饥饿＋SDF-1α＋ AMD3100组和饥饿＋ SDF-1α＋LY294002组.原位末端转移酶标记法（TUNEL法）和异硫氰酸荧光素/碘化丙啶（Annexin V-FITC/PI）流式双标法检测各组CSC凋亡情况,CCK-8法检测CSC活力,Westem blot法检测抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤2（Bcl-2）以及磷酸化丝氨酸苏氨酸激酶（p-Akt）的表达水平,并使用比色法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（caspase-3）活性.结果 CSC经磁珠分选后c-kit阳性率可达85％以上.饥饿组细胞凋亡率明显高于正常对照组[（27.03±0.80）％比（1.51±0.54）％,P＜0.01].饥饿＋SDF-1α组各亚组细胞凋亡率均明显低于饥饿组（P均＜0.01）,CSC凋亡率在饥饿＋SDF-1α 10、50、100 ng/ml干预组渐次降低,以100 ng/ml干预组为最低[（10.67±1.06）％,与饥饿组比较P＜0.01].饥饿＋SDF-1α 100 ng/ml组p-Akt和Bcl-2的蛋白表达均明显高于饥饿组（P均＜0.01）,而caspase-3活性则均明显低于饥饿组（P均＜0.01）.饥饿＋SDF-1α＋ AMD3100组和饥饿＋SDF-1 α＋LY294002组p-Akt和Bcl-2的蛋白表达均较饥饿＋SDF-1α 100 ng/ml组低（P均＜0.01）,而caspase-3活性均明显高于饥饿＋SDF-1α100 ng/ml组（P均＜0.01）.结论 SDF-1α可抑制血清剥夺诱导的CSC凋亡,且该作用是通过SDF-1 α/CXCR4轴激活PI3K/Akt通路实现的.
- 黄荣马根山潘啸东陈中璞盛祖龙胡圣大姚玉宇陈忠
- 关键词：干细胞细胞凋亡基质细胞衍生因子-1Α
- 基质细胞衍生因子-1通过促进c-kit表达提高小鼠心肌干细胞增殖和迁移能力的研究
- 2013年
- 目的:探讨基质细胞衍生因子-1(SDF-1)提高小鼠心肌干细胞(CSCs)增殖和迁移能力的机制。方法:从小鼠心肌中分离、培养出CSCs,并用免疫磁珠法筛选出c-kit(+)CSCs,用流式细胞仪检测CSCs表面标志:干细胞因子受体c-kit、干细胞抗原Sca-1。用SDF-1及SDF-1特异性拮抗剂AMD3100干预c-kit(+)CSCs,qPCR及Western blotting检测c-kit的mRNA和蛋白表达,用CCK-8试剂盒及transwell趋化实验检测细胞增殖和迁移能力。结果:分离、培养出的细胞经免疫磁珠筛选后,流式细胞仪检测c-kit和Sca-1表达均大于80%。SDF-1干预后,qPCR和Western blotting结果显示c-kit mRNA和蛋白表达均增高,CCK-8及transwell趋化实验结果显示SDF-1干预后细胞的增殖及迁移能力明显提高,并且可以被AMD3100拮抗。结论:SDF-1通过促进c-kit表达提高c-kit(+)CSCs的增殖及迁移能力。
- 陈中璞潘啸东姚玉宇马根山
- 关键词：C-KIT心肌干细胞基质细胞衍生因子-1CXCR4小鼠
- 瑞舒伐他汀对猪骨髓间充质干细胞增殖、凋亡及分泌功能的影响被引量：2
- 2011年
- 目的观察不同浓度的瑞舒伐他汀在体外水平对猪骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖、凋亡及细胞分泌功能的影响。方法分离培养猪BMSCs,取第3代细胞随机分为对照组和不同浓度瑞舒伐他汀(0.001、0.01、0.1、1.0μmol/L)干预组。MTT比色法检测各组细胞增殖情况,膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)流式细胞术检测各组抗凋亡情况,ELISA法测定细胞上清液中血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维生长因子(bFGF)含量。结果与对照组相比,瑞舒伐他汀在一定浓度范围内(0.001～0.1μmol/L)可促进BMSCs增殖,抑制其凋亡,在0.01～1.0μmol/L内增加BMSCs VEGF和bFGF的分泌(P<0.05);当瑞舒伐他汀浓度升高至1.0μmol/L时则未见促增殖和抑制凋亡的作用(P>0.05)。结论瑞舒伐他汀在一定浓度范围内可促进猪BMSCs增殖,抑制其凋亡,并对VEGF和bFGF的分泌有促进作用。
- 潘啸东李拥军陈中璞姚玉宇马根山
- 关键词：瑞舒伐他汀骨髓间充质干细胞
