金晓媚 作品数:49 被引量:138 H指数:7 供职机构: 云南省疾病预防控制中心 更多>> 发文基金: 国家科技重大专项 中央高校基本科研业务费专项资金 云南省应用基础研究计划面上项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
利用翻译延伸因子1-α启动子在毕赤酵母中表达人乳头瘤病毒16L1蛋白 被引量:2 2014年 目的利用翻译延伸因子1-α(translation elongation factor 1-α,TEF1-α)启动子在毕赤酵母中表达人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)16 L1蛋白。方法从毕赤酵母GS115中扩增组成型TEF1-α启动子(PTEF1-α)基因,通过基因重组替换商业化表达质粒pPink-HC和pPink-LC的启动子PAOX1;在PTEF1-α下游分别克隆绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因和HPV 16 L1基因,构建重组质粒pTEF-GFP和pTEF-16 L1;将重组质粒电转化感受态毕赤酵母PichiaPink strain 1,培养不同时间后,荧光显微镜下观察GFP的表达;分别在YPD、YPG、YPM、YPSor培养基中培养pTEF-16 L1转化菌,检测菌体在不同培养基中的增殖情况;Western blot检测HPV 16 L1蛋白的表达水平。结果重组质粒pTEF-GFP和pTEF-16 L1经双酶切鉴定和序列分析表明构建正确;荧光显微镜检测显示,在不同培养时间PTEF1-α指导了GFP的成功表达,且表达量随培养时间的延长而降低;重组毕赤酵母在YPD和YPG培养基中生长迅速;4种培养基中均有HPV 16 L1蛋白的特异性表达,且在YPG和YPSor培养基中获得了HPV 16 L1蛋白较持续的表达。结论成功实现了组成型启动子PTEF1-α控制的HPV16 L1蛋白的表达,为HPV疫苗的低成本及方便生产提供了一个可供选择的有效方案。 金晓媚 姚宇峰 黄惟巍 杨旭 孙文佳 刘存宝 龙琼 马雁冰关键词:启动子 毕赤酵母 绿色荧光蛋白 人乳头瘤病毒16 L1蛋白 云南省社会组织开展HIV快速检测情况调查 被引量:5 2020年 社会组织在艾滋病的防治工作中发挥了重要的作用[1]。近年来社会组织逐步具备艾滋病咨询检测的能力,纳入艾滋病检测工作的范围[2]。为了解云南省社会组织开展艾滋病病毒(HIV)快速检测的现状,对2018年云南省开展快速检测的社会组织进行调查。1对象与方法1.1对象云南省2018年参与到艾滋病快速检测工作的社会组织。 张露文 金晓媚 陈会超 董莉娟 戴洁 杨敏 杨朝军 马艳玲 陈敏关键词:艾滋病 社会组织 1例HIV全长基因结构和亚型重组分析 被引量:1 2018年 云南省艾滋病的流行时间较长,疫情也比较严重,在吸毒人群和男男性行为者(MSM)中先后出现过艾滋病暴发流行^([1-2])。为了了解云南省MSM的艾滋病分子流行病学特征及制定艾滋病防治策略提供依据,选择了昆明市MSM哨点的一份HIV抗体初筛阳性样本(编号为YNZG31)进行了病毒的全长基因分析。 杨朝军 陈敏 陈会超 戴洁 董莉娟 金晓媚 杨敏 杨莉 马艳玲关键词:艾滋病病毒 男男性行为者 全长基因 HIV-1感染者不同免疫状态的抗体及病毒载量研究 被引量:4 2021年 目的了解不同免疫抑制程度下HIV-1感染者的病毒学及免疫学指标差异,分析HIV-1感染者初筛检测结果S/CO值,病毒载量检测结果以及WB带型与免疫状态之间的相关性。方法对2017-2019年河南省、北京市和云南省三个现场的639份抗病毒治疗前HIV-1抗体确证阳性样本,根据CD4细胞计数分成4个不同免疫抑制组:无免疫抑制组(CD4≥500个/μl),轻度免疫抑制组(350个/μl≤CD4<500个/μl),中度免疫抑制组(200个/μl≤CD4<350个/μl),重度免疫抑制组(CD4<200个/μl)。采用χ2检验比较不同免疫抑制组之间S/CO值、WB带型的差异,分析各项指标与免疫状态的关系。结果各免疫抑制组的S/CO值>20出现率最高(>37%)且随机体免疫力增强呈递减趋势(P<0.05),119%),078%),而核心蛋白(gag)的p55(<40%)、p39(<3%)出现率最低,gp41和p51的出现率在不同免疫抑制组间的差异均有统计学意义(P<0.05)。S/CO值结合病毒载量时对无、轻、中、重度免疫抑制组判定的曲线下面积分别为0.651(95%CI:0.600~0.702;P<0.05),0.587(95%CI:0.540~0.635;P<0.05),0.605(95%CI:0.560~0.650;P<0.05),0.647(95%CI:0.586~0.708;P<0.05)。结论 S/CO值联合病毒载量对于对无免疫抑制状态的判定效能最好;同时缺失gp41和p51,S/CO>20时可分别提示患者可能处于无免疫抑制状态和重度免疫抑制状态。 林倩茹 于贺军 张辉 李桂英 孙燕鸣 杨敏 金晓媚 马丽英 金聪 肖瑶关键词:HIV-1 CD4 S/CO值 联合3种快速试剂用于HIV感染诊断的可行性探讨 被引量:7 2017年 目的探讨联合3种快速试剂用于HIV感染诊断的可行性。方法对所有筛查阳性的样本同时使用6种快速检测试剂和蛋白印迹法(WB)检测,WB不确定者进行随访和核酸检测。以WB阳性,或WB不确定、核酸阳性为HIV感染的判断标准,比较分析3种快速试剂组合与HIV感染诊断结果的一致性。结果在20种组合中,16种组合与HIV感染状况的一致性为100%,4种组合与HIV感染诊断结果一致性为99.81%。结论联合3种快速试剂可用于HIV感染的诊断。 陈会超 冯瑞琳 杨朝军 董莉娟 胡斌 廖斌 戴洁 陈敏 金晓媚 马艳玲 贾曼红关键词:艾滋病病毒 蛋白印迹法 昆明市2018年~2020年新发现HIV-1感染男男性行为人群新近感染分析 2022年 目的了解2018年~2020年昆明市通过社会组织新报告的HIV-1感染男男性行为人群(men who have sex with men,MSM)的新近感染情况和影响因素,为该人群的艾滋病防治提供参考。方法对昆明市2018年1月至2020年12月经抗体筛查和确证检测后的MSM阳性样本采用HIV-1限制性抗原亲和力酶联免疫方法(HIV-1 LAg-Avidity enzyme immunoassay,LAg-Avidity EIA)结合CD4+T淋巴细胞计数判断新近感染,采用Logistic回归分析新近感染影响因素。结果共收集389份阳性样本,2018年1月至2020年12月HIV-1新近感染者比例分别为48.1%(90/187)、51.6%(49/95)、30.8%(33/107),2018年1月和2019年12月的新近感染比例,差异无统计学意义(P>0.05),2020年的新近感染比例低于2018年和2019年(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示职业为学生(P=0.017,OR=2.989,95%CI:1.221~7.318)检测出新近感染的比例高。结论昆明市MSM人群HIV-1新近感染的比例出现下降趋势,在部分人群中新近感染的比例较高,需要有针对性地采取措施,加强新近感染的监测,通过社会组织加强干预服务的可及性,进一步促进检测。 曹瑞 徐畅 金晓媚 戴洁 陈会超 董莉娟 杨敏 杨莉 陈敏关键词:HIV 男男性行为者 云南省边境县艾滋病实验室检测能力和人力资源分析 被引量:1 2021年 目的对云南省25个边境县艾滋病实验室检测能力和人力资源现状进行分析,查找存在问题,进一步提升艾滋病防控能力。方法根据"云南省艾滋病检测实验室质量管理系统"内实验室信息数据对艾滋病检测能力进行分析,对实验室人员数量进行统计。结果25个边境县共有37家实验室具备CD4^(+)T淋巴细胞检测能力,覆盖24个县。共有25家(覆盖25个县)实验室开展蛋白印迹试验,65家实验室开展快速检测替代试验。可开展酶联免疫吸附试验/化学发光免疫分析的艾滋病检测实验室24家,覆盖13个县。25个边境县共有1284家快速检测点,平均每县51.4家,高于全省平均的42.7家,每万人1.8家,高于全省平均的1.1家。村级快速检测点833家,平均每县33.3家,高于全省平均的24.5家,每万人1.2家,高于全省平均的0.7家。25家县级艾滋病中心实验室检测人员平均为4.0人,略低于4.2人的全省平均水平。艾滋病检测实验室检测人员平均为5.2人,高于全省平均的2.2人。快速检测点检测人员平均为2.1人,低于全省平均的2.5人,10个边境县不足2人。村级快速检测点检测人员平均1.7人,低于全省平均的1.8人,15个边境县不足2人。结论云南省边境县检测能力略高于全省平均水平,但艾滋病实验室人力资源不足,快速检测点(尤其是村级检测点)实验室人员数量亟需提升。 陈会超 董莉娟 戴洁 金晓媚 杨敏 曾志君 孙鹏艳 杨莉 杨朝军 陈敏关键词:艾滋病实验室 人力资源 2015-2019年云南省梅毒血清学实验室质量考核分析 被引量:1 2021年 目的了解云南省性病实验室梅毒血清学检测能力总体情况,发现并纠正问题,促进全省梅毒血清学检测质量和实验室质量管理能力的提升。方法统一发放5份考核盲样,参加考核的实验室对每份样品进行梅毒螺旋体血清学试验及非梅毒螺旋体血清学定性及定量试验,对考核结果进行汇总和分析。结果2015-2019参加考核的实验室分别是670、742、755、777、2335家,血清学质量考核总体符合率分别为84.67%、96.28%、95.13%、97.00%、99.12%,非梅毒螺旋体血清学定性试验的符合率分别为99.53%、100%、100%、100%、99.52%,定量试验的符合率分别为68.97%、92.42%、90.17%、93.92%、97.26%,梅毒螺旋体血清学试验的符合率在2015-2018均为100%,2019年为99.88%。结论2015-2019年云南省梅毒血清学实验室检测能力得到了一定的提升,但是非梅毒螺旋体血清学定量符合率以及开展两类检测的实验室比例偏低,今后要加强性病实验室能力建设和质量管理,提升云南省梅毒血清学检测质量。 曾志君 董莉娟 陈会超 戴洁 金晓媚 孙鹏艳 杨敏 杨朝军 陈敏 马艳玲 杨莉关键词:梅毒 血清学检测 主动免疫治疗慢性哮喘的呈递IL-33的VLP疫苗构建方法 本发明提供一种主动免疫治疗慢性哮喘的呈递IL-33的VLP疫苗构建方法,包括以下步骤:从小鼠提取IL-33总RNA,通过逆转录得到IL33总cDNA,用设计的特异性引物将得到的总cDNA通过PCR扩增,得到编码IL-33... 马雁冰 龙琼 黄惟巍 姚宇峰 杨旭 孙文佳 金晓媚 李杨 褚晓杰 刘存宝文献传递 昆明市2018年男男性行为者HIV-1基因型及耐药特征分析 被引量:5 2020年 目的了解2018年昆明市MSM的HIV-1基因型及耐药特征。方法收集昆明市2018年1-12月新报告HIV-1感染的MSM的血浆样品193份,提取病毒RNA,采用巢式PCR扩增gag、pol和env区基因片段,进行基因分型和耐药分析,通过Bayesian Markov Chain Monte Carlo(MCMC)方法分析昆明市MSM感染者中CRF55_01B和CRF68_01B的进化特征。结果193份样品中发现多个HIV-1基因型,包括CRF07_BC(39.4%,76/193)、CRF01_AE(34.2%,66/193)、独特型重组(20.2%,39/193)、CRF08_BC(3.1%,6/193)、CRF55_01B(1.6%,3/193)、B亚型(1.0%,2/193)和CRF68_01B(0.5%,1/193)。Bayesian进化分析结果显示CRF55_01B从外省进入昆明市后已开始在本地传播,而CRF68_01B可能来自于我国东部地区。2018年昆明市MSM抗病毒治疗前的HIV-1耐药株流行率为2.6%(5/190),对非核苷类反转录酶抑制剂的耐药突变发生率最高(2.1%,4/190)。结论昆明市MSM的HIV-1基因型多样性逐年增加。MSM未接受抗病毒治疗HIV-1感染者耐药发生率虽然较低,但存在抗病毒治疗一线药物的多重耐药株。 戴洁 孙鹏艳 陈会超 董莉娟 金晓媚 李佑芳 王珏 杨朝军 杨敏 曾志君 马艳玲 陈敏关键词:男男性行为者 艾滋病病毒 基因型 耐药