郭继彤
- 作品数：40 被引量：338H指数：10
- 供职机构：内蒙古大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划内蒙古自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 成年体细胞克隆山羊研究
- 1.比较了切剖法和抽吸法从屠宰山羊卵巢表面卵泡采集得到的可用卵母细胞数。实验切剖了4201个卵巢，平均采集可用卵母细胞数4.95枚/卵巢（20794枚/4201卵巢）。用抽吸法抽取了360个卵巢，平均采集可用卵母细胞数为...
- 郭继彤
- 关键词：体细胞细胞克隆卵母细胞
- 山羊皮肤组织细胞分离与培养的研究
- 李裕强张涌郭继彤寇全安
- 该实验研究了山羊皮肤组织细胞的分离、培养、纯化方法和生长特征，获得了传代培养的山羊皮肤上皮样细胞与成纤维样细胞。组织块贴附培养和分散单细胞接种培养均能获得原代山羊皮肤细胞。用150 IU/mL胶原酶I TCM199液（1...
- 关键词：
- 关键词：皮肤组织细胞分离体外培养山羊
- 用PCR法构建乳腺特异性表达非乳蛋白基因的研究被引量：1
- 1997年
- 将ＰＣＲ法分别从绵羊和人血基因组ＤＮＡ中扩增出的绵羊β－乳球蛋白基因（ＢＬＧ）５′端调控区８９８ｂｐ的片段和人骨髓单核细胞表面分化抗原ＣＤ１４基因（ｈＣＤ１４）成熟肽１２４５ｂｐ的片段连接．连接片段插入ｐＵＣ１９ＥｃｏＲＩ－ＫｐｎＩ位点，构建成ｐＢＬＧ－ｈＣＤ１４质粒．该质粒经ＫｐｎＩ及ＥｃｏＲＩ－ＨｉｎｄＩＩ酶切、ＰＣＲ法扩增ＢＬＧ和ｈＣＤ１４分析后，进一步用３２Ｐ－ＢＬＧ探针杂交确证．用ＥｃｏＲＩ－ＨｉｎｄＩＩ酶切质粒片段ＢＬＧ－ｈＣＤ１４产生转基因小鼠以检测ＢＬＧ－ｈＣＤ１４在乳腺的表达能力．用免疫杂交法证实在转基因阳性小鼠乳汁中表达了ｈＣＤ１４．
- 郭继彤李雪玲于海泉王达珍张肇英
- 关键词：转基因动物乳腺基因表达
- 绵羊β-乳球蛋白基因5′端及上游调控序列的PCR扩增的方法学研究
- 2001年
- 本文对绵羊 β-乳球蛋白基因 5′端及上游调控序列的 PCR方法扩增进行了研究 .经比较分析 ,将从羊血中提取的绵羊基因组 DNA的模板用量定为 4μl( 0 .4μg/μl) ,Taq DNA聚合酶用量为 0 .83μl( 3u/μl) ,变性为 94℃ 1 min,退火为 64℃ 1 m in,72℃延伸 2 min,循环次数为32次 ,获得的 PCR产物经电泳检测 ,条带明亮 ,特异性高 ,大小为 898bp.经序列分析发现 ,与已知基因组序列一致性达 99%以上 ,可用于指导外源基因在转基因动物乳腺中表达 .
- 李雪玲郭继彤于海泉王达珍张肇英
- 关键词：PCR
- 阿拉伯马染色体G带核型分析被引量：7
- 2011年
- 为了比较阿拉伯马与普通马的差异,利用培养的阿拉伯母马体细胞,制备和分析了其染色体组型。试验采用体外培养的阿拉伯马成纤维细胞,用常规染色体标本制作技术,制备了阿拉伯马染色体G带,并完成了染色体组型配对分析。结果显示阿拉伯马染色体数目为2n=64,包括31对常染色体和1对XX性染色体。其中1~13号染色体为中或亚中着丝粒染色体,14~31号染色体为端着丝粒染色体,X染色体则为第2对大亚中着丝粒染色体。G带核型显示阿拉伯马染色体G带明暗相间,每对染色体都有独特的带纹特征。本研究是首次在国内报道阿拉伯母马染色体G带特征。这将为阿拉伯马细胞遗传学研究和疾病诊断提供资料,也将为认识阿拉伯马与普通马的不同提供细胞水平的依据。
- 张静南刘永斌张金吨苏杰李云霞孙伟赵丽霞郭继彤李喜和
- 关键词：成纤维细胞染色体核型G带
- 马羊膜上皮细胞分离、培养及影响因素的研究
- 2014年
- 为了建立马羊膜上皮细胞(equine amniotic epithelial cells,e AECs)的分离、培养方法,并对其影响因素进行研究,试验从胎盘剥离羊膜,采用Trypsin-乙二胺四乙酸(EDTA)或Tryp LE消化法分离获得上皮细胞,然后进行上皮细胞培养传代研究。结果表明:通过0.25%Trypsin-EDTA消化,每克羊膜平均获得2.2×106个细胞,其3代传代倍增时间平均为(1.32±0.21)d;通过0.25%Tryp LE消化,每克羊膜平均获得1.9×106个细胞,其3代传代倍增时间平均为(1.26±0.17)d,两者间差异显著(P<0.05)。Tryp LE消化结果比较稳定,更适合从马羊膜层消化、分离上皮细胞。
- 张福全温世勇丛姗郭继彤曹贵方
- 血清饥饿对兔成纤维细胞生长的影响被引量：5
- 1999年
- 用含体积分数０．５％ 血清的ＤＭ ＥＭ 直接饥饿胎儿及皮肤成纤维细胞，细胞数先是略有增长，然后逐渐下降。胎儿和皮肤成纤维细胞在血清梯度饥饿期间，更换含体积分数为４％ ，２％ 和１％ 血清的ＤＭＥＭ，细胞仍缓慢增长；更换含体积分数为０．５％ 血清的培养液后，细胞数逐渐降低。血清饥饿成纤维细胞后，细胞直径明显小于对数生长期的细胞（２０，１９ＶＳ３６ μｍ ，Ｐ＜ ０．０１）。血清饥饿的成纤维细胞，ＰＣＮＡ 单抗染色阴性，证明离开了细胞周期，进入Ｇ０ 期。
- 寇全安张涌李裕强郭继彤
- 关键词：成纤维细胞体外培养血清饥饿胚胎移植
- 外源基因在转基因动物乳腺中的特异性表达研究被引量：6
- 1998年
- 动物基因工程研究最大的突破就是转基因动物研究的进展．自八十年代初第一批转基因小鼠问世以来，转基因动物的研究已从方法学研究步入了应用性研究阶段．转基因动物除作为研究工具广泛地应用于发育生物学、免疫学、遗传学以及医学等生命科学领域外，外源基因在转基因动物的特异性表达，尤其是在乳腺的表达，又可将转基因动物用作生物反应器进行生物活性蛋白的生产而应用于商业生产．在转基因动物乳腺的特异性表达研究中，寻找乳蛋白基因调控构件是非常必要的，特别是获得高效而稳定表达的基因调控构件更为重要．迄今为止，已获得了多种乳蛋白基因调控构件．在这些构件的指导下从转基因动物乳汁中生产了不同的人体非乳蛋白，且都具有生物活性．
- 郭继彤张肇英
- 关键词：转基因动物乳腺基因表达外源基因
- 利用piggyBac载体制备小鼠诱导性多能干细胞被引量：5
- 2012年
- 小鼠体细胞可通过转入干细胞转录因子而诱导生成多能干细胞,这种干细胞称为诱导性多能干细胞(iPSC).利用逆转录病毒、慢病毒、腺病毒、质粒载体、多蛋白表达系统、合成性mRNA及microRNA已成功将小鼠和人的体细胞诱导成多能干细胞.piggyBac是转座频率较高的转座子载体,也已作为载体成功诱导出多能干细胞.为了研究以piggyBac载体诱导出的多能干细胞的体内外分化能力,利用携带Oct4,Sox2,Klf4和c-Myc转录因子的piggyBac转座载体进行了小鼠体细胞的转染诱导,结果诱导获得的iPS细胞碱性磷酸酶染色呈阳性;免疫组化染色OCT4,NANOG,SSEA-1为阳性;RT-PCR检测Oct4,Sox2,c-Myc和Klf4呈阳性.同时诱导获得的iPS细胞系在体外自发分化后,免疫组化染色AFP,BRACHYURY和NCAM1呈阳性,表明分化形成了3个胚层的细胞;该细胞系皮下注射免疫缺陷小鼠iPS细胞形成了畸胎瘤.实验发现,获得的干细胞系可与小鼠8-细胞聚合,进入到嵌合胚胎的内细胞团.这些结果表明,由piggyBac载体诱导的小鼠多能干细胞iPS具有干细胞的主要特性,包括体内外的分化能力.
- 张金吨赵丽霞吴宝江李云霞张静南苏杰孙伟戴雁峰郭继彤胡树香李瑶汪玮刘鹏涛李喜和
- 关键词：小鼠PIGGYBAC诱导性多能干细胞拟胚体
- 牛孤雌生殖胚与体外受精胚体外发育比较被引量：7
- 2004年
- 从卵巢采集的卵丘-卵母细胞复合体(COCs)经体外成熟培养24h后,随机分为2组分别用于孤雌激活与体外受精。在相同培养条件下,比较孤雌生殖胚与体外受精胚的发育率和发育速度。结果表明:将牛孤雌生殖胚与体外受精胚分别置于mSOFaa和mBECMaa培养液中培养,卵裂率(89.3%vs.80.1%;83.2%vs.82.5%)、囊胚发育率(27.5%vs.24.0%;28.9%vs.21.9%)和孵化率(58.7%vs.56.7%;51.5%vs.53.3%),均无显著差异(P>0.05);孤雌生殖胚与体外受精胚在体外发育的速度基本相同。对孤雌生殖胚胎进行培养可以代替体外受精胚胎筛选最佳体外培养系统。
- 张琇李雪峰安志兴郭继彤张涌
- 关键词：孤雌生殖体外受精胚胎体外发育囊胚发育率发育速度孤雌激活
