赵振东
- 作品数:13 被引量:109H指数:5
- 供职机构:北京大学基础医学院免疫学系更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家科技部专项基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域:医药卫生文化科学生物学更多>>
- 白细胞介素18受体α与β真核表达载体构建及白细胞介素18受体β稳定表达细胞株的建立
- 2008年
- 目的:构建人白细胞介素18受体IL-18Rα,β真核表达载体pcDNA3.1-zeocin/IL-18RαpcDNA3.0/IL-18Rβ,并将pcDNA3.0/IL-18Rβ稳定转染293细胞,构建IL-18Rβ稳定表达细胞株,用于建立IL-18信号转导的体外细胞模型。方法:实验于2006-06/2007-05在北京大学医学部免疫系实验室完成。扩增并克隆人IL-18Rα和IL-18RβcDNA,构建真核表达载体pcDNA3.1-zeocin/IL-18Rα,pcDNA3.0/IL-18Rβ。将pcDNA3.0/IL-18Rβ转染293细胞,经G418筛选建立起稳定表达IL-18Rβ的细胞株,Western-blot方法检测稳定细胞株IL-18Rβ的表达,挑选表达较高的细胞转染IL-18Rα,通过NF-κB依赖的Luciferase检测IL-18信号转导通路的建立。结果:成功构建了IL-18Rα和IL-18Rβ的真核表达载体,IL-18Rβ的基因稳定转染到了293细胞中并获得了表达,通过瞬时转染IL-18Rα真核表达载体,在293细胞中建立了IL-18信号转导的体外细胞模型。结论:成功建立起了IL-18诱导NF-κB活化的体外细胞模型,为进一步研究IL-18信号转导途径奠定了基础。
- 陈燕赵振东
- 关键词:293细胞信号转导
- 传染性非典型肺炎病人外周血白细胞损伤的病理学研究被引量:6
- 2003年
- 目的 研究传染性非典型肺炎严重急性呼吸综合征 (SARS)病人外周血中白细胞的病理变化 ,及与SARS冠状病毒感染的关系 ,为探讨免疫细胞损伤在SARS发病机制中的作用提供形态学的依据。方法 采用 2 2例初步诊断的SARS病人外周血标本 ,及 4例正常成人外周血标本 ,分离收集所有的白细胞 ,进行透射电镜、免疫电镜和RT PCR检查。结果 白细胞的数量及亚型比例改变 :每个病例观察 10 0个细胞 ,分别计数粒细胞、淋巴细胞和单核细胞的数目。与正常组对照 ,粒细胞数目增多 (P <0 .0 5 ) ,淋巴细胞明显减少 (P <0 .0 5 ) ,T淋巴细胞 (CD4 5RO阳性 )仅占残存白细胞总数的 6 %~ 7%。在外周血白细胞胞浆内发现冠状病毒样颗粒者 6例 ,与RT PCR阳性者重合比例为5∶6。分别计数在各类白细胞中可观察到冠状病毒样颗粒的阳性细胞数 ,发现淋巴细胞中可观察到病毒的阳性细胞数最高。SARS病人血白细胞中的冠状病毒样颗粒为圆形 ,或略呈卵圆形 ,80~ 12 0nm左右 ,致密的双层质膜包绕 ,核心较疏松 ,膜外有放射状排列的纤细突起。散在分布于胞浆或粗面内质网、高尔基器及膜包绕的空泡中。淋巴细胞有变性和活化增殖的现象。结论 在SARS病人的血白细胞 ,内观察到冠状病毒样颗粒。提示 ,血细胞特别是淋巴细胞 ,也可能是冠状病毒攻?
- 钟延丰高晓明王盛兰谢志刚马悦方伟岗邹万忠李秀兰张黔英王薇赵振东顾江
- 关键词:传染性非典型肺炎病理学研究冠状病毒
- 以文献为导向的自我学习(RISE)——以问题为基础的学习(PBL)教学模式在《医学免疫学》教学中应用形式的探索
- '以文献为导向的自我学习'(Reference-Induced Self-Education,RISE)教学模式是一种适用于医学低年级学生学习前期基础课程教学的PBL教学模式.本文对RISE教学模式在《医学免疫学》课程教...
- 朱蕴兰高晓明马大龙徐晓军陈英玉鲁琰赵红珊赵振东袁志宏王月丹
- 关键词:基础医学课程医学免疫学高等医学教育自我学习
- 文献传递
- RISE与PBL教学模式在医学免疫学教学中的探索被引量:35
- 2006年
- “以文献为导向的自我学习”(Reference-Induced Self-Education,RISE)教学模式是一种适用于医学低年级学生学习前期基础课程教学的PBL教学模式。文章对RISE教学模式在医学免疫学课程教学中的应用及其效果进行分析,探索多种PBL教学模式在我国基础医学教学改革中的作用。
- 朱蕴兰马大龙徐晓军陈英玉鲁琰赵红珊赵振东袁志宏王月丹高晓明
- 关键词:PBL基础医学教育教学改革
- 检测SARS患者血清中抗-SARS-CoV IgG的四种试剂盒比较被引量:3
- 2004年
- 目的 比较4种试剂盒检测SARS患者血清中抗-SARS-CoV IgG的灵敏度和特异度。方法 用2种酶联免疫吸附试验(EIA)和2种间接免疫荧光法(IFA)试剂盒分别检测18例SARS患者的99份系列血清及123份阴性参比血清标本中抗-SARS-CoV IgG。结果 在患者发病第1周,4种试剂盒均未检出抗-SARS-CoV IgG;自发病第2周,除EIA甲未能检出外,EIA乙和2种IFA均从血清中检出抗-SARS-CoV IgG,其阳性率分别为57.1%(4/7)、57.1%(4/7)和42.9%(3/7)。4种试剂盒最早检出时间分别为发病后第16、12、13和9天。于发病后第3周该4种试剂盒的检出率分别为52.6%(10/19)、94.7%(18/19)、78.9%(15/19)和84.2%(16/19)。但自发病第4周后,该4种试剂盒的检出率相同。检测123份阴性参比血清表明,除EIA乙的特异度为94.9%外,其余3种试剂盒的特异度均为100%。结论 2种IFA的灵敏度和特异度均较2种EIA高;2种国产EIA试剂盒质量尚需进一步提高。
- 刘学恩李杰李永华王玲李彤陆海英王广发朱万孚高晓明王佑春赵振东徐小元庄辉
- 关键词:血清IGG试剂盒SARS严重急性呼吸综合征传染性非典型肺炎
- 不同人群血清SARS冠状病毒抗体检测及其意义被引量:14
- 2003年
- 目的 通过对不同人群SARS冠状病毒IgG抗体 (SARSCoVIgG)检测 ,明确该抗体对SARS的诊断意义。方法 采用酶联免疫法 (EIA)、间接荧光法 (IFA)和免疫印迹法 (WB)检测抗 SARSCoVIgG。结果 对 117例临床确诊为SARS患者的 336份系列血清检测表明 ,SARS病人血清抗 SARSCoVIgG最早于发病后第 9天阳转 ,其阳性率随病程延长而上升 ,于发病后 5~ 9、10~ 14、15~ 19、2 0~2 4和 2 5d以上抗 SARSCoVIgG阳性率分别为 12 .5 % (1/8)、73.9% (17/2 3)、91.5 % (43/47)、96 .6 %(5 7/5 9)和 10 0 % (198/198)。应用EIA初筛 12 2 3名非SARS人群 (包括 36 7名在SARS病房工作 1个月以上的医务人员 ,4 3名在生活中与临床确诊的SARS病人有密切接触史者 ,以及 813例未暴露于SARSCoV人群 ) ,其中 2 8名为抗 SARSCoVIgG弱阳性 (A <0 .5 ) ,但用 2种IFA和WB检测均为阴性 ,说明EIA初筛为假阳性。结论 应用EIA检测抗SARSCoVIgG有助于中晚期SARS病人的诊断。对EIA初筛为抗 SARSCoVIgG弱阳性的标本 (A <0 .5 ) ,应用其他方法如IFA和WB检测 ,以排除假阳性。
- 李永华李杰刘学恩王玲李彤陆海英王广发朱万孚高晓明王佑春赵振东徐小元庄辉钟金群杨丽芬张玮琦潘伟毅
- 关键词:血清SARS冠状病毒抗体非典型肺炎
- SARS冠状病毒刺突蛋白450-650片段抗原性及受体结合能力的研究
- 目的:SARS冠状病毒(SARS-CoV)刺突(S)蛋白在病毒与细胞表面受体血管紧张素酶2(ACE2)的结合过程中起关键作用。其受体结合结构域(RBM)位于424-494位氨基酸,并折叠成两个反向β片层(β5和β6)。我...
- 赵金存袁志宏贾汝静赵振东徐晓军吕平张岩高晓明
- 关键词:SARS冠状病毒刺突蛋白B细胞表位
- 文献传递
- 重组自噬标志分子LC3的抗血清制备被引量:4
- 2007年
- 自噬(autophagy)是胞内蛋白等大分子或细胞器直接或间接与溶酶体结合,从而得以降解的过程.微管相关蛋白1轻链3-β(microtubule-associated protein1light chain3-β,MAP1LC3-Ⅱ,简称LC3),是在高等真核细胞中发现的第一种自噬体膜蛋白,可以作为自噬的标志性分子用于检测自噬活动.为深入研究自噬的发生过程及其与健康和疾病的关系,通过构建pET28a(+)-LC3原核表达系统,应用多聚组氨酸结合树脂分离和纯化了重组LC3蛋白,以该蛋白为免疫原制备了抗LC3的抗血清,并利用HeLa细胞自噬模型采用Western印迹方法对该抗血清的特性进行了鉴定.结果显示,兔抗LC3抗血清同时可以识别LC3的2个亚型LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ,且可清晰检测到自噬发生时LC3-Ⅰ向LC3-Ⅱ的转化,表明该血清可以用于自噬的检测.
- 赵振东曾庆江陈丽娜宋泉声陈英玉
- 关键词:自噬抗血清
- SARS冠状病毒NS融合蛋白的重组表达纯化与免疫学性质分析(英文)被引量:1
- 2005年
- 刺突蛋白(S)和核心蛋白(N)是SARS冠状病毒的主要结构蛋白.在病毒细胞受体结合和病毒包装过程起重要作用.重组融合表达这2种蛋白具有较高的诊断学价值.对SARS病毒N蛋白和S蛋白氨基酸序列进行计算机分析,选择含有优势抗原表位的N蛋白1~227位氨基酸片段和S蛋白450~650位氨基酸片段,采用序列重叠延伸策略(sequenceoverlappingextension,SOE)构建编码N1227LinkerS450650新型融合蛋白的基因片段,导入原核表达载体,实现融合蛋白在大肠杆菌的高效表达.利用组氨酸标签亲和层析的方法纯化,获得高纯度的融合蛋白.对该融合蛋白的结构特征模拟分析的结果显示,其免疫化学性质均无显著改变.采用ELISA和Western印迹方法对其识别SARS冠状病毒特异性抗体的能力进行初步鉴定,显示该融合蛋白具有较好的抗原性和特异性,可有效特异性地检测恢复期SARS病人血清中抗SARS冠状病毒结构蛋白的抗体,可以作为SARS冠状病毒感染的辅助诊断手段.
- 贾汝静袁志宏赵金存王炜赵振东高晓明徐晓军
- 关键词:SARS冠状病毒组氨酸标签抗原性酶联免疫吸附实验
- 细胞粘附分子在邻苯二甲酸酐哮喘发病机制中作用的实验研究
- 赵振东
- 关键词:细胞粘附分子邻苯二甲酸酐哮喘发病机制