谢纯政 作品数:8 被引量:34 H指数:3 供职机构: 广东省农业科学院 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 广东省自然科学基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
花生ARAhPR10基因启动子序列的克隆及分析 被引量:3 2012年 PR10(pathogenesis-related class10protein)类蛋白与植物的抵御外来病害及系统获得性抗性(SAR)有着紧密联系,本文采用基于PCR的基因组DNA步移法,从抗黄曲霉花生品种粤油20中克隆ARAhPR10(Aspergillus flavus-resistant AhPR10)基因起始密码子ATG上游256bp类似启动子序列,并对其进行植物顺式作用元件数据库PLACE预测分析。结果表明,该类似启动子序列含有4处TATA box和2处CAAT box保守的启动子结构元件,还有6处W-box、1处BIHD1和3处GT-1motif抗逆应答元件,其中W-box常见于PR蛋白的启动子区内参与病程应答。我们初步认为本研究克隆的序列可能是ARAhPR10基因的启动子。 温世杰 谢纯政 李玲 刘海燕 梁炫强关键词:HYPOGAEA 启动子 顺式作用元件 花生EST研究进展 2008年 EST技术是一种快速有效揭示基因组容量的方法,已成为基因发现、基因表达及重组蛋白表达等研究的强有力的分子生物学工具。花生是世界主要油料作物,花生基因组大而复杂,功能基因组的研究较晚,但发展迅速。概述了花生EST研究及其在花生功能基因组研究中的应用进展。 谢纯政 梁炫强 李玲 刘海燕关键词:花生 功能基因组 花生病程诱导蛋白基因AhPIP1和启动子的克隆、序列分析及原核表达 被引量:5 2009年 本文采用RACE法克隆了花生病程诱导基因(pathogenesis-induced protein gene)全长,命名为AhPIP1,并在GenBank登录,登录号为EU860093。序列分析表明该基因的开放读码框579bp,编码193个氨基酸。以YY20基因组DNA为模板PCR扩增获得AhPIP1基因组序列长1883bp,包含3个外显子和长度分别为602bp和600bp的2个内含子。同源性比较发现AhPIP1与辣椒病程诱导蛋白CaPIP1(ABF72432,AAT35532)相似性达82%。采用Genome Walking方法获得AhPIP1启动子,序列分析表明该启动子序列长513bp,包含干旱胁迫、病程胁迫应答元件和生长素、赤霉素应答元件。构建pET32a-AhPIP1原核表达载体,转化表达受体菌E.coli BL21,原核表达获得大小约40kD AhPIP1融合蛋白,与推测的AhPIP1基因编码产物的大小一致,表明AhPIP1基因在大肠杆菌中能够表达。 谢纯政 李万福 刘海燕 李玲 梁炫强关键词:花生 克隆 原核表达 花生种子吸涨诱导蛋白质与抗黄曲霉关系的研究 <正>花生的黄曲霉污染问题是一个严重的国际性农业问题。国内外学者已对其做了大量研究,但至今对于花生的抗黄曲霉浸染及产毒机制还不能全面解释清楚。在生产实践及对它作物的研究中发现,种子萌发过程中其抗黄曲霉菌污染的能力明显增强... 王通 谢纯政 李万福 梁炫强 李玲文献传递 花生抗黄曲霉相关基因AIAh PR10的克隆 <正>干旱条件下,黄曲霉(Aspergillus flavus)更易侵染花生,引起花生黄曲霉污染。黄曲霉污染是目前影响花生品质和贸易的重要因素之一。为深入了解花生在干旱、黄曲霉胁迫下的抗性机制,筛选抗黄曲霉相关基因,进而... 谢纯政 王通 李万福 刘海燕 李玲 梁炫强文献传递 花生抗黄曲霉污染相关蛋白质的研究 花生是最容易受黄曲霉毒素污染的农作物之一。花生黄曲霉毒素污染已成为严重影响花生产业继续发展和人类健康的世界性问题,受到世界各国的高度重视。培育抗性品种是解决花生黄曲霉污染问题最有效、最经济的控制方法, 王通 谢纯政 李玲 梁炫强 张二华文献传递 花生抗黄曲霉相关ARAhPR10基因克隆及其原核表达 被引量:13 2009年 花生黄曲霉污染已成为制约我国花生及花生制品出口贸易的关键因素。基于花生抗黄曲霉相关EST序列,RT-PCR法克隆花生ARAhPR10基因(gb|EU661964.1),开放读码框471bp,编码157个氨基酸,分子量16.9kD,等电点5.03。与已报导AhPR10(gb|AY726607)相似性为49.3%。推导氨基酸序列含有PR10家族的高度保守"P-loop"基序(G*GG*G)和Betv1保守疏水结构域"GVALP PTAEK ITFET KLVEG PNGGSIGKLT LKY",推测ARAhPR10是该花生PR10家族的新成员。其基因组扩增序列长度561bp,两个外显子间存在一个长度为87bp的内含子。原核表达ARAhPR10的融合蛋白约25kD,Ni+-NTA树脂亲和纯化后获得电泳单一条带。纯化的ARAhPR10融合蛋白具有体外核酸酶活性,预测其具有抗黄曲霉活性。该基因的克隆及其原核表达融合蛋白的获取为ARAhPR10功能研究奠定了基础。 谢纯政 梁炫强 李玲 刘海燕关键词:花生 黄曲霉 原核表达 植物病程相关蛋白PR10研究进展 被引量:15 2008年 PR(pathogenesis related protein)蛋白产生与积累是植物体应答生物或非生物胁迫的主要特征之一。近年来大量PR蛋白被鉴定,根据它们的结构,亲源关系和生物活性,被分为17个功能家族。PR10蛋白具有核酸酶相似结构,一般为分子量16~19kD的酸性蛋白。近年来相关研究表明一些PR10蛋白具有核酸酶活性和体外抗菌活性,在植物防御反应中发挥重要作用,具有较为广泛的应用前景。本文就PR10蛋白的生理功能、基因结构、表达调控及其与植物抗病的关系等方面的最新研究进展作一综述,并结合本实验室工作展望其在植物抗性育种方面的应用前景。 谢纯政 刘海燕 李玲 梁炫强关键词:病程相关蛋白 基因