谢健平
- 作品数：12 被引量：17H指数：3
- 供职机构：汕头大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生文化科学更多>>
- 基于TQM理论的网络教学质量保障体系探索——以汕头大学医学院为例被引量：1
- 2020年
- 为应对2019年底的突发疫情,教育部提出“停课不停学”的要求。本文以汕头大学医学院TQM理论框架下网络教学质量保障体系为例,探讨在网络教学环境下,如何形成有效的医学院校教学质量保障体系。该体系包括教学管理层、课程负责人(教师)、学生干部三层管理架构,从输入、过程、输出三个阶段进行调控,从而达到质量持续改进的“过程管理”目的。这个体系的构建保障了本院网络教学有序运行,质量控制逐步从第一周的保障网络教学流程到第二周保障达成知识目标,逐步升级至保障学生能力与素养发展的育人目标,形成比较理想的三级质量保障体系。
- 谢健平郑少燕王骁伍倩婷吴静韵丁小蕴林常敏
- 关键词：医学教育质量保障体系过程管理
- 基于计算机网络的课堂教学质量学生评价系统的创建及应用被引量：3
- 2004年
- 学生通过计算机网络平台进行教学质量评价,是一种新型的教学管理手段。它具有反馈信息及时,监督力度高,便于快速统计等优点。在其软件编制中,我们从评价标准和人机交互两方面进行探讨,应用中取得了理想的效果,也为教学质量监评的信息化提供了有益的经验。
- 林若薇王汉琦谭海珠杨棉华谢健平
- 关键词：计算机网络课堂教学教学质量教学管理人机交互
- 兔辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢/还原酶的表达、纯化、活性鉴定及多克隆抗体制备
- 维甲酸类物质是脊椎动物体内重要的生理活性物质,通过调节基因的转录参与形态发生、细胞生长、细胞分化、免疫功能调节等生理过程;在抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞分化、凋亡以及抗感染等病理过程中也具有广泛的生物学效用。细胞内维甲...
- 谢健平
- 关键词：活性鉴定
- 文献传递
- 人宫颈癌细胞辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢/还原酶选择性剪接新亚型的表达及多克隆抗体制备被引量：1
- 2008年
- 目的制备宫颈鳞癌细胞中辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢/还原酶(NRDR)选择性剪接新亚型NRDRB1多克隆抗体,为NRDRB1的功能研究奠定基础。方法扩增NRDRB1开放阅读框,重组入Gateway原核表达系统pDEST14,并在大肠杆菌BL21-AI中诱导表达,制备NRDRB1包涵体,使用从SDS-PAGE凝胶中回收的NRDRB1重组蛋白作为免疫原,经肩胛骨下注射免疫新西兰白兔。斑点杂交测定抗血清效价,HiTrapProteinG柱纯化兔IgG,免疫印迹和免疫组织化学鉴定抗体特异性。结果NRDRB1在大肠杆菌BL21-AI中高效表达,回收的NRDRB1蛋白溶液浓度为0.42mg/ml。所有免疫的动物在第2次追加免疫之后都产生了高效价的抗血清。血清效价为l∶2000,对NRDRB1蛋白的检测极限是6.4ng。纯化后的NRDRB1抗体具有较高的免疫活性和特异性。结论NRDRB1原核表达载体的构建、蛋白表达、纯化及多克隆抗体的制备为今后研究该蛋白的功能奠定了良好的基础。
- 宋旭红梁斌刘戈飞谢健平李蕊黄东阳
- 关键词：宫颈肿瘤
- 兔辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢/还原酶多克隆抗体的制备
- 2009年
- 目的:制备兔辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢/还原酶(NRDR)多克隆抗体。方法:应用原核表达的兔NRDR免疫豚鼠,制备豚鼠抗兔NRDR多克隆抗体,并以Western blot法分析抗体特异性。结果:免疫豚鼠获得了高效价抗血清,效价为1∶2 000时检测极限为160 ng蛋白,与NRDR蛋白能特异性结合。结论:获得的多克隆抗体应用于Western blot中检测兔NRDR效果良好,为NRDR的进一步研究打下基础。
- 谢健平刘戈飞宋旭红李蕊梁斌杜昆
- 关键词：多克隆抗体
- 兔肝辅酶Ⅱ依赖性视黄醛还原酶在大肠杆菌中的表达及其对维生素K3的还原作用和产物的鉴定被引量：1
- 2008年
- 目的:检测兔辅酶Ⅱ依赖性视黄醛还原酶(NDRR)对维生素K3的催化活性并对该酶还原K3所生成的产物进行鉴定。方法:构建含6×His标签的兔NDRR的表达菌株,诱导表达并超声裂解后,通过Ni2+亲和层析纯化得到重组兔NDRR。在相对去氧隔绝空气反应体系以及存在高浓度十二烷基磺酸钠的反应条件下,利用高效液相色谱(HPLC)对兔NDRR还原K3的催化活性进行酶动力学研究。利用化学合成,HPLC及荧光光谱扫描对其还原产物进行鉴定。结果:诱导表达后的细菌裂解上清液经一步亲和层析后得到单一酶蛋白,其对K3的比活性分别是原空白菌裂解上清液和经诱导表达后的菌裂解上清液的比活性的18.6和7.3倍。经过HPLC测定,兔NDRR对K3的Km值为30.7,Vmax0.046μmoL/(min.mg)。利用四氢硼酸钠与K3化学合成的产物进行HPLC分析,其保留时间与酶反应所产生的产物峰保留时间一致,而且反应后短时间内能利用荧光光谱扫描得到K4相应的光谱图。结论:兔NDRR对K3存在还原活性,并生成K4。
- 肖李锋刘戈飞宋旭红谢健平张巧霞李蕊黄东阳
- 关键词：维生素K3维生素K4高效液相色谱
- 兔肝辅酶Ⅱ依赖性视黄醇氧化还原酶全长cDNA的克隆与分析被引量：4
- 2006年
- 目的:克隆兔肝辅酶Ⅱ依赖性视黄醇氧化还原酶(NRDR)的全长cDNA,并分析其特征。方法:根据GenBank中已发表的NRDR的cDNA部分序列信息,运用cDNA末端快速扩增技术得到全长cDNA,然后利用生物信息学的方法对其进行分析。结果:得到NRDR全长cDNA序列,并提交到GenBank。分析发现该cDNA具有短链脱氢酶(SDR)家族的保守模序,而且在5′端同一个读码框架内有2个起始密码子。结论:新克隆的NRDR全长序列在GenBank编号为DQ229110,NRDR蛋白属于SDR家族。
- 杜昆谢健平刘戈飞宋旭红黄东阳
- 抗兔辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢/还原酶单克隆抗体的制备和鉴定
- 2008年
- 背景与目的:制备抗兔辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢/还原酶[NADP(H)-dependent retinol dehydrogenase/reductase,NRDR]的单克隆抗体(mAb),并鉴定其特性。材料与方法:以基因工程重组兔NRDR为抗原免疫BALB/c小鼠,用杂交瘤技术建立稳定分泌兔NRDRmAb的细胞株。以间接ELISA法筛选阳性克隆、鉴定Ig亚类、细胞培养上清及腹水效价,同时采用Westernblot方法检测mAb的特异性。结果:获得3株可分泌特异性mAb的杂交瘤细胞(NR1、NR2和NR5)。其抗体亚类均为IgG1,细胞培养上清效价依次为1∶20、1∶40和1∶20,腹水效价分别为1∶106、1∶107和1∶106。Westernblot结果显示NR1、NR2和NR5抗体均能有效识别兔肝组织中的NRDR及重组表达的兔NRDR。结论:成功地建立了稳定分泌兔NRDRmAb的杂交瘤细胞株,为NRDR生物学功能的进一步研究打下了基础。
- 杜牡丹宋旭红刘戈飞梁斌张巧霞李蕊谢健平甘雪琼黄东阳
- 关键词：单克隆抗体杂交瘤
- 兔辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢/还原酶的功能性表达、纯化及活性鉴定被引量：5
- 2007年
- 目的:用原核蛋白表达系统对兔辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢/还原酶(NRDR)进行功能性表达,并对其活性进行鉴定。方法:从兔肝中克隆出NRDR全长序列,运用Gateway表达系统将其编码区序列构建到表达载体(pDEST 17)上,再转化到大肠杆菌(E.coli)(BL21-AI)中表达出兔NRDR蛋白并鉴定其表达形式;取工程菌裂解上清通过金属离子亲和层析纯化出目的蛋白,再运用反相高效液相色谱法(HPLC)测定该酶的Km值和Vmax值。结果:构建出含兔NRDR编码区(768 bp)的表达克隆,转化到BL21-AI中表达出氨基端含6×His标签的重组兔NRDR蛋白,诱导表达4 h后目的蛋白可占总蛋白量的41.4%;经一步亲和层析得到的兔NRDR纯度为97.2%,比活性提高了64倍;经HPLC测定,该酶对视黄醛的Km值为(4.55±0.33)μmol/L,Vmax为(0.307±0.065)μmol/(min.mg)。结论:应用pDEST 17可在BL21-AI中对兔肝NRDR进行高效的功能性表达。
- 谢健平刘戈飞宋旭红杜昆李蕊梁斌张巧霞黄东阳
- 关键词：纯化
- 汕头大学医学院PBL教学的实施与评价
- 杨棉华何萍谢健平黄东阳顾江
