许静
- 作品数：19 被引量：30H指数：4
- 供职机构：天津医科大学总医院更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金天津市应用基础与前沿技术研究计划天津市科委资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- hTSHR膜外区氨基端基因原核表达载体的构建和鉴定被引量：1
- 2005年
- 目的:为研究人促甲状腺素受体膜外区氨基端(hTSHR462bp)肽段的免疫学特性,将hTSHR462bpcDNA片段在原核表达系统中表达,故构建原核表达载体。方法:以人Graves病患者甲状腺组织中提取mRNA为模板,利用RT-PCR方法扩增双链甲状腺组织cDNA,又以PCR技术扩增目的基因,定向克隆法构建融合基因的原核表达载体pET102-hTSHR462bp。结果:获得了重组目的基因原核表达载体并经PCR鉴定、酶切鉴定插入片段方向、大小正确,DNA测序分析表明插入处接头和读框与预期序列相符。结论:成功构建了融合基因的原核表达载体pET102-hTSHR462bp,为进一步的蛋白表达、其生物学功能研究和未来临床应用奠定了基础。
- 陈慧方佩华陆凤先李宁吕枚许静
- 关键词：基因克隆测序
- 甲状腺疾病患者血清可溶性细胞间粘附分子-1的研究被引量：4
- 2008年
- 目的探讨血清可溶性细胞间粘附分子-1（SICAM-1）水平与甲状腺疾病的关系。方法采用^125Ⅰ-sICAM-1 RIA方法，检测了健康人273名（对照组），Graves（GD）病患者557例，初诊慢性淋巴细胞性甲状腺炎（HT）患者33例，初诊单纯性甲状腺肿（SG）患者17例，初诊非毒性结节性甲状腺肿（NTNG）患者9例的血清sICAM-1水平，比较各组间差异及其与其他指标的相关性。变量资料为正态分布时，应用ANOVA或t检验进行组间比较；不满足条件时，应用秩和检验（Kruskal-Wallis或Mann-Whitney）进行分析。结果初诊GD组[58例，（255．04±82．40）ug/L]和HT组[（227．22±77．08）ug／L]sICAM-1水平均高于对照组[（149．89±39、45）-L]（GD：Z=-9．401，HT：Z=-5．902；P均〈0．01），而SG组[（173．82±59．50）ug/L]和NTNG组[（159．31±28．73）ug/L]与对照组差别无统计学意义（SG：Z=-1．9，NTNG：Z=-0．949；P均〉0．05）。初诊及各治疗阶段GD伴突眼组sICAM-1水平均高于非突眼组，但仅在治疗≥19个月组差异有统计学意义[（211．58±53．58）与（189．50±39．99）ug/L；t=2．004，P〈0．05]。复发GD突眼及非突眼组sICAM-1水平亦显著高于对照组（X^2=88．257，P〈0．01）。在经抗甲状腺药物（ATD）治疗后甲状腺功能恢复正常且病情稳定的GD患者中，sICAM-1水平随疗程延长逐步缓慢降低，且当疗程≥19个月时，GD组在非突眼及突眼患者中，其血清sICAM-1[（189．50±39．99），（211．58±53．58）ug/L]与各自初诊组[（244．75±81．58），（287．36±79．20）ug/L]差异有统计学意义（F=9．986和3．398，P〈0．01和P〈0．05），但直至停药时仍高于对照组[（185．25±39．64）与（149．89±39．45）ug/L；Z=-3．813，P〈0．05]。结论血清sICAM-1可反映自身免疫性甲状腺疾病（AITD）患者体内的自身免疫状态，其测定对GD、HT有辅助诊断价值，这对于了解GD患者的�
- 刘金泉方佩华冯凭李宁孟召伟吕枚许静
- 关键词：甲状腺疾病细胞粘着分子放射免疫检测
- 促甲状腺素受体基因突变一个家系研究
- 2005年
- 目的:探讨1个甲状腺发育不良先天性甲状腺功能减退症(先天性甲减)患者家系促甲状腺素受体(TSHR)基因突变遗传规律。方法:调查包括先证者3代家系成员共计13人,检测血清甲状腺激素。用TKM法提取基因组DNA,PCR扩增TSHR基因第10外显子序列,对PCR产物正反向测序,测序结果同Genbank人TSHR基因序列对比。结果:先证者TSHR基因同时存在2个位点纯合子型点突变R450H/D727E,家系12人甲状腺功能均正常,6人为R450H/D727E杂合子型点突变,其中5人血清sTSH轻度升高。结论:R450H/D727E纯合子导致先证者甲状腺发育不良及先天性甲减,R450H/D727E杂合子甲状腺功能正常仅sTSH轻度升高。
- 马绍刚方佩华吕枚陈慧许静李宁冯洁
- 关键词：促甲状腺素受体基因突变家系研究先天性甲状腺功能减退症甲状腺功能正常家系成员
- 原癌基因c-fos在Graves'病和甲状腺乳头状癌中表达的研究被引量：3
- 2003年
- 目的 :引入细胞管家基因β-actin作为内参照物 ,研究c-fos在Graves'病和甲状腺乳头状癌中的表达。方法 :各组织标本均采用TRIzol法提取mRNA ,RT -PCR法获取cDNA ,多重PCR法同时扩增371bp 片段的c -fos和227bp 片段的β-actin ,产物经1.5 %琼脂糖凝胶电泳并照相存盘 ,用GelBase/GelBiot -Pro软件分析得标本c -fos和β-actin的密度值并计算比较。结果 :正常对照组 ,Graves'病组和甲状腺乳头状癌组c -fos/β-action比值分别为 (x±s) :0.67687±0.07712 ,0.76096±0.05804和0.60630±0.11233方差分析3组间差异有显著性 (P<0.01) ,q检验表明 :c -fos在Graves'病组的表达明显高于正常对照组 (P<0.05)和甲状腺乳头状癌组 (P<0.01) ,在甲状腺乳头状癌组的表达明显低于正常对照组 (P<0.05)。结论 :以β-actin为内参照物 ,观察到原癌基因c -fos在Graves'病中的表达增高 。
- 杨立平许静方佩华冯洁李宁崔景秋孟召伟吕枚
- 关键词：甲状腺乳头状癌原癌基因C-FOSΒ-ACTIN
- 重组hTSHR片段蛋白建立hTRAb ELISA及临床应用
- 李宁方佩华吕枚许静张艳丽李莎
- 重组人甲状腺球蛋白检测TgAb间接ELISA法的建立及其初步应用
- 2008年
- 目的:探讨用重组人甲状腺球蛋白(hTg)建立检测甲状腺球蛋白抗体(TgAb)的间接ELISA法及其临床意义。方法:用该法测定300例健康体检者(正常对照组)和各种甲状腺疾病患者484例;其中桥本甲状腺炎(HT)219例,Graves’病(GD)212例(初诊91例、复诊121例),非自身免疫性甲状腺疾病(AITD)患者53例。结果:确立本法正常界限值为0.74(A405值),血清TgAb水平HT组与正常对照组、非AITD组、GD组相比差异均有统计学意义(均P<0.01);GD组与正常对照组、非AITD组相比差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);非AITD组与正常对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。HT、GD初诊、GD复诊患者的阳性率分别为70.8%、38.8%和28.6%,3类非AITD患者阳性率均不超过5.3%。结论:以重组hTg为抗原建立检测TgAb的ELISA法有助于各种甲状腺疾病的临床鉴别。
- 李莎吕枚冯洁方佩华李宁许静杨立昌
- 关键词：甲状腺球蛋白格雷夫斯病
- Graves’病患者甲肿组织中原癌基因h-ras和c-myc的表达研究
- 目的：以细胞管家基因β-actin 为内参照物,研究原癌基因 h—ras 和 c-myc 在 Graves’病(GD)甲状腺肿大组织中的表达。方法：Trizol 法提取各组织标本中的 mRNA,RT-PCR 法获取 cD...
- 吕枚杨立平冯洁杨立昌许静李宁李莎孟召伟方佩华
- 文献传递
- 先天性甲状腺功能减退症钠碘转运体基因突变研究
- 2005年
- 目的研究天津市区先天性甲状腺功能减退症(简称甲低)患者钠碘转运体(NIS)基因突变情况。方法用TKM法提取18例先天性甲低、35例随机正常对照者外周血DNA,分别聚合酶链反应(PCR)扩增NIS基因第1～15外显子,单链构象多态性分析(SSCP)筛查NIS基因15个外显子突变,突变经直接测序证实。结果所有研究对象NIS基因15个外显子均可以PCR扩增,经SSCP分析无异常电泳条带,表明18例先天性甲低无NIS基因突变。结论所研究的天津市区先天性甲低患者无NIS基因突变。
- 马绍刚方佩华杨箐岩刘戈力马咸成许静李宁陈慧冯洁
- 关键词：先天性甲状腺功能减退症突变研究先天性甲低NIS基因外周血DNA钠碘转运体
- 裸鼠模型的人钠/碘转运体基因转染人大细胞肺癌介导放射性核素显像被引量：3
- 2009年
- 目的在动物体内实验观察人钠/碘转运体(hNIS)基因转染人大细胞肺癌介导放射性核素显像是否可行。方法①利用重组质粒以脂质体转染法将hNIS基因转染入人大细胞肺癌H460细胞系中,获得稳定表达hNIS的细胞株(hNIS-H460)。②用hNIS-H460细胞株建立大细胞肺癌荷瘤裸鼠模型,进行放射性核素99mTcO4-显像和131I显像。结果①体外实验表明hNIS-H460细胞株可以摄取碘。②裸鼠大细胞肺癌(hNIS-H460)移植瘤的99mTcO4-和131I显像结果较清晰。结论转染后的hNIS-H460细胞具有一定的摄碘能力。裸鼠大细胞肺癌(hNIS-H460)移植瘤可以进行99mTcO4-和131I显像;99mTcO4-显像的质量优于131I显像。
- 郑薇谭建李玮李宁许静
- 关键词：转染放射性核素
- 人重组甲状腺球蛋白检测TgAb间接ELISA方法的建立及其初步临床应用
- 目的:提取含有 Tg 抗原决定簇基因的原核表达型质粒 pET102/D-TOPO,在原核表达系统中表达。将得到的重组人甲状腺球蛋白(hTg)作为包被抗原建立检测甲状腺球蛋白抗体(TgAb)的间接 ELISA 方法并初步用...
- 李莎吕枚冯洁方佩华李宁许静杨立昌
- 文献传递
