许培 作品数:25 被引量:27 H指数:3 供职机构: 安徽安科生物工程(集团)股份有限公司 更多>> 发文基金: 安徽省科技攻关计划 国家科技重大专项 安徽省优秀青年科技基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 化学工程 理学 生物学 更多>>
响应曲面法优化还原型特利加压素氧化工艺研究 2022年 利用过氧化氢氧化还原型特利加压素,研究反应时间、样品浓度(以还原型特利加压素计算)、反应pH、氧化剂与样品摩尔比(以还原型特利加压素计算)、反应温度对还原型特利加压素氧化率的影响。通过五因子二水平三中心点(分辨度Ⅴ)的部分析因试验得到影响显著的因子,即反应时间、反应pH、反应温度;随后进行三因子三水平的响应曲面试验,经过优化得到最佳反应条件为:反应时间26.72min、反应pH7.29、反应温度25.25℃,在该条件下还原型特利加压素的氧化率为90.14%。 史文青 葛传军 陈冉 董世建 李增礼 王荣海 许培关键词:特利加压素 响应曲面法 盐酸米托蒽醌聚乙二醇化脂质体的制备及包封率考察 被引量:1 2012年 目的:制备盐酸米托蒽醌聚乙二醇化(PEG化)脂质体,建立包封率测定方法。方法:采用乙醇注入结合高压均质法制备空白PEG化脂质体;以铵根离子梯度法进行主动载药制备盐酸米托蒽醌PEG化脂质体;采用G-25葡聚糖凝胶色谱分离脂质体和游离药物;使用紫外-可见分光光度法测定脂质体的包封率。结果:空白脂质体平均粒径为88.7nm,载药后粒径为95.3nm;在所建立色谱条件下,脂质体与游离米托蒽醌分离良好;盐酸米托蒽醌在0.5~10μg.ml-1范围内线性关系良好(R2=0.9997),精密度高;脂质体的平均包封率大于96%。结论:乙醇注入-高压均质法结合铵根离子主动载药法适用于制备盐酸米托蒽醌PEG化脂质体;所建立分析方法简单快捷、准确可靠,可用于盐酸米托蒽醌长循环脂质体包封率的测定。 凌云 戎隆富 孙彦华 程婷 许培 宋礼华关键词:盐酸米托蒽醌 紫外-可见分光光度法 包封率 一种提高重组人干扰素α2b天然构象含率的制备工艺 本发明公开了一种提高重组人干扰素α2b天然构象含率的方法,操作如下:将重组人干扰素α2b表达菌体裂解后的菌体裂解液依次用pH不低于7.0的第一透析液和pH低于4的第二透析液进行透析,透析后分离纯化得到天然构象含率高的重组... 宋礼华 王荣海 许培 董世建 周乐春 李增礼 沈毅聚乙二醇修饰天花粉蛋白的初步研究 被引量:5 2006年 目的:研究聚乙二醇(PEG)修饰天花粉蛋白(TCS)的条件、纯化方法、生物活性及致过敏反应程度。方法:用SDS-PAGE检测反应条件对产物成分的影响,利用离子交换和分子筛凝胶层析对修饰产物进行分离纯化,通过SDS-PAGE和HPLC检测聚乙二醇化天花粉蛋白(PEG-TCS)的纯度,小鼠引产实验测定PEG-TCS体内生物学活性,用TCS和PEG-TCS作为抗原对豚鼠进行致敏和攻击。结果:在PEG修饰TCS的反应中,PEG与TCS的投料(质量)比和pH值是影响修饰效率的主要因素,修饰反应一般在24~48h内达到平衡;纯化的PEG-TCS经SDS-PAGE检测纯度大于95%,HPLC显示单一峰;小鼠引产实验表明,经过PEG修饰后的TCS,引产活性加强;豚鼠过敏反应实验表明,PEG-TCS具有极低的全身性过敏反应。结论:PEG修饰TCS的最佳反应条件为:TCS与PEG投料比为1:6,pH6.0,反应时间为48h,催化剂氰基硼氢化钠浓度为40mmol·L^(-1);PEG-TCS纯度大于95%; PEG-TCS体内活性能较好的保留,且全身性过敏反应降低。 许培 戎隆富 王荣海 宋礼华关键词:天花粉蛋白 聚乙二醇修饰 全身性过敏反应 脂质体在抗癌药物给药系统中的研究和应用 被引量:3 2012年 癌症,是现今威胁人类健康的一大杀手,目前常规的治疗手段之一是予以大剂量的化疗药物进行治疗。但大多数抗癌药物因具有广泛而强烈的细胞毒性,在杀伤癌细胞的同时也无选择性的杀伤了正常人体细胞,使得患者在接受治疗的同时承受了较大的痛苦,降低了癌症患者的生存质量。因而在药剂学研究中,须以提高药效、增强靶向性及降低毒副作用等为目标,合理地选择和开发抗癌药物给药系统。自脂质体作为新型药物传递技术引入癌症治疗以来,因其独特的理化性质和递药机理,高效低毒地递送抗癌药物至病灶,因而成为现今抗癌药物给药系统研究中的热点。本文结合国内外的相关资料和最新报道,综述了脂质体抗癌药物的递药优势、研究进展与存在的问题,并在分析了产业化现状的基础上,对这一新型给药系统在抗癌药物递送领域中的发展做一展望。 凌云 戎隆富 程婷 许培 宋礼华关键词:脂质体 抗癌药物 给药系统 聚乙二醇化重组人干扰素α2b位置异构体比例离子交换高效液相色谱测定法的建立及修饰位点分析 2021年 目的建立聚乙二醇化重组人干扰素α2b(PEGylated recombinant human interferonα2b,PEG-rhIFNα2b)位置异构体比例的离子交换高效液相色谱(ion exchange high performance liquid chromatography,IEC-HPLC)测定法,并对各异构体修饰位点进行分析。方法色谱柱采用Proteomix SCX-NP10(10.0 mm×250 mm,10μm);流动相A为:1.8 mmol/L一水合柠檬酸-3.3 mmol/L十二水合磷酸氢二钠(pH 5.3),流动相B为:30 mmol/L柠檬酸三钠-35 mmol/L二水合磷酸二氢钠(pH 6.0);线性梯度洗脱:0~180 min(0%B→12%B),180~220 min(12%B→15%B);流速为:0.4 mL/min;柱温为:25℃;进样量:不低于100μg。同时对IEC-HPLC法进行专属性及重复性验证。采用建立的方法测定3批PEG-rhIFNα2b的位置异构体比例,并通过SPSS 19.0软件进行分析,拟定5个位置异构体比例质量标准。采用建立的方法富集5个位置异构体的洗脱峰,进行修饰位点定位。结果空白对照和rhIFNα2b原液无色谱峰出现,对PEG-rhIFNα2b位置异构体测定无干扰,PEG-rhIFNα2b可见5个异构体峰,且分离度良好;同批PEG-rhIFNα2b连续测定3 d,峰1、2、3、4和5面积的总RSD分别为1.96%、2.53%、2.54%、1.05%和1.86%,均<3.0%。PEG-rhIFNα2b的5个位置异构体比例质量标准可拟定为:峰1为5%~9%、峰2为14%~21%、峰3为7%~10%、峰4为30%~34%、峰5为31%~39%。PEG-rhIFNα2b位置异构体峰1修饰位点主要为K31,峰2主要为K134,峰3主要为K131和K164,峰4主要为K83,峰5主要为K121,未检测到N-末端PEG修饰。结论建立了PEG-rhIFNα2b位置异构体比例的IEC-HPLC测定法,该方法具有良好的专属性及重复性,可用于PEG-rhIFNα2b位置异构体比例的测定。 董世建 许培 许培 李增礼 李增礼 程婷 王荣海关键词:位置异构体 蒸发光散射法测定重组人生长激素注射液中泊洛沙姆188含量 2019年 本试验建立了定量测定重组人生长激素注射液中泊洛沙姆188含量的蒸发光散射—高效液相色谱分析方法。该方法以TSK gel G3000SWXL为色谱柱,以25%乙腈为流动相,等度洗脱,流速为0.6mL/min,蒸发光散射检测器检测。结果显示,该方法专属性强,系统重复性、精密度及耐用性良好,洛沙姆188在质量浓度0.2~1.6mg/mL范围内,线性关系良好(R 2=0.9989),低、中、高3个浓度的回收率分别为99.91%、99.93%和101.38%,可用于测定重组人生长激素注射液中泊洛沙姆188的含量。 陆春燕 董世建 许培 李增礼 王荣海关键词:泊洛沙姆188 蒸发光散射 高效液相色谱 不同方法测定聚乙二醇化重组人干扰素α-2b注射液的纯度 被引量:1 2009年 目的:建立聚乙二醇化重组人干扰素α-2b(PEG—rhIFNα-2b)注射液纯度测定方法。方法:采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE),对凝胶银染并扫描;采用体积排阻高效液相色谱法(SEC—HPLC),使用TSKG3000SW(7.8min×300mm)凝胶柱,流动相:0.2mol·L-1PB.0.2mol·L-1NaCl-异丙醇(48.5/48.5/3,v/v);流速:0.6ml·min-1;检测波长:280nm;采用反相高效液相色谱法(RP.HPLC).使用C8(4.6min×250mm)色谱柱,流动相:A液:0.1%三氟乙酸溶液;B液:95%乙腈的A液,梯度:0%~100%B(30min);流速:1mL·min-1;检测波长:214nm。结果:三种方法测得PEG—rhIFNα-2b的纯度分别为100%、100%、98.90%。结论:三种方法均适用于PEG-rhIFNα-2b注射液纯度测定,检测结果符合生物制品质量控制规定。 邬婧 戎隆富 程婷 许培 宋礼华关键词:纯度 反相HPLC 卵黄免疫球蛋白的提取工艺 本发明公开了一种卵黄免疫球蛋白的提取工艺,其包括以下步骤:a)抗原制备;b)蛋鸡免疫,收集鸡蛋;c)将去除膜衣的蛋黄搅拌均匀,置于‑20±3℃下至少冷冻24‑72h,快速解冻,稀释,调pH,静置过夜;d)离心过滤,超滤浓... 李增礼 徐燕 周乐春 王荣海 许培 宋礼华 董世建 倪晓燕 储成风 程婷 陈子镭 沈毅文献传递 一种聚乙二醇修饰干扰素反应液中回收干扰素的方法 本发明属于聚乙二醇修饰干扰素反应液中的各组分分离纯化领域,具体涉及一种聚乙二醇修饰干扰素反应液中回收干扰素的方法。本发明包括如下步骤:a、将聚乙二醇修饰干扰素反应液用酸或碱调至pH值位于5.0~8.0之间;b、将上述所得... 宋礼华 许培 戎隆富 程婷 邬婧文献传递