计云霞
- 作品数：69 被引量：172H指数：6
- 供职机构：首都医科大学附属北京佑安医院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金北京市重点实验室更多>>
- 相关领域：医药卫生环境科学与工程生物学更多>>
- HIV急性期感染者肠道归巢α4β7CD4~+T细胞及其功能亚群的变化特点
- 目的:分析HIV急性期感染者肠道归巢α4β7CD4~+T细胞及其功能亚群的变化特点。方法:选择HIV急性期感染者26名和健康对照者20名。流式细胞术检测肠道归巢α4β7CD4~+T细胞及其功能亚群的比例和数量。分析肠道归...
- 陆小凡李珍计云霞吴昊张彤
- 文献传递
- HIV感染者外周血滤泡辅助性T细胞活化与血浆IgG水平升高的相关性分析
- 2022年
- 目的了解HIV感染者外周血滤泡辅助性T细胞(circulating T follicular helper cell,cTfh)比例与血浆IgG水平的相关性。方法选取未经抗病毒治疗(antiretroviral therapy,ART)的慢性期HIV感染者(chronically HIV infected individuals,CHI),同时筛选HIV抗体阴性的高危暴露者(HIV-exposed seronegative individuals,HESN)作为对照。采用多色流式分析方法,分别检测CHI和HESN的cTfh、ICOS^(+)cTfh、CD40L^(+)cTfh和浆母细胞(plasmablasts,PB)比例。通过免疫散射比浊法检测血浆IgG浓度。结果与HESN相比,CHI组ICOS^(+)cTfh比例(26.97±1.62 vs.18.83±0.99,t=4.518,P<0.01)、PB比例(1.59±0.32 vs.0.46±0.06,t=3.982,P<0.01)和血浆IgG浓度(14.71±0.93 vs.10.65±0.52 g/L,t=4.064,P<0.01)均显著升高。CHI组ICOS^(+)cTfh比例(r=0.586,P=0.030)和PB比例(r=0.372,P=0.038)均与血浆IgG浓度正相关。结论HIV感染导致ICOS^(+)cTfh的增殖可能是引起血浆IgG过度分泌的因素之一,从而引发高丙种球蛋白血症。
- 陆小凡李珍张欣计云霞王蕊吴昊张彤粟斌
- 关键词：HIV感染滤泡辅助性T细胞高丙种球蛋白血症
- HIV／AIDS患者外周血T淋巴细胞亚群的研究被引量：1
- 2008年
- 目的通过对H／V／AIDS患者外周血T淋巴细胞亚群进行分析，探讨初始、记忆和效应T细胞各亚群的变化情况及其与疾病进展的关系。方法应用流式细胞仪检测15例正常人，79例HIWAIDS患者CD4〈200组17例、200≤CD4≤500组45例和CIM〉500组17例。外周血淋巴细胞中T细胞各亚群绝对数及百分比。结果随着疾病进展，CD4^＋初始细胞（Naive）计数和比例均逐渐减少（P〈0．001）；CD4^＋中枢性记忆T细胞（Tcm）计数逐渐降低（P〈0．001），但百分比逐渐升高（P〈0．002）；CD4^＋效应记忆性T细胞（TEM）百分比上升（P〈0．001）；CD8^＋Naive细胞计数及百分比均逐渐下降（P〈0．05）；CD8^＋TCM、TEM和终末分化的效应性记忆T细胞（TEMRA）的计数及百分比，各组间差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论HIV感染者外周血T淋巴细胞亚群发生显著变化，幼稚型T淋巴细胞数目逐渐减少，功能型T淋巴细胞数目增加。本研究有助于对HIV致病机制的研究及疾病进展的监测。
- 李海英曹振环计云霞吴昊陈新月
- 关键词：HIV获得性免疫缺陷综合征淋巴细胞亚群
- TAT-HBX-EGFP融合蛋白的表达、纯化及在小鼠肝脏内的跨膜分布
- 2008年
- 目的高效表达TAT—HBX—EGFP融合蛋白，研究其在小鼠肝脏内的分布。方法构建TAT-HBX—EGFP重组载体，IPTG诱导使其在BL21中大量表达；蛋白经Ni柱纯化后注射入小鼠体内，免疫荧光观察TAT，HBX—EGFP融合蛋白在小鼠肝脏的分布。结果TAT，HBX—EGFP在大肠埃希菌中获得高效表达；HBX蛋白可以在TAT的引导下进入小鼠肝脏。结论TAT引导肽可以将HBX蛋白引导至小鼠肝脏。
- 石英魏飞力柳雅立计云霞吴昊陈德喜周育森
- 甲型H1N1流感超敏感诊断方法的建立及优化
- 2010年
- 利用几种助沉剂和核酸纯化方法富集病毒RNA,建立甲型H1N1流感超敏感诊断方法。收集31份甲型H1N1流感确诊病人提取的病毒RNA,稀释至1000分之一倍后分别应用酵母tRNA、糖原、AcrylCarrier助沉剂和磁珠、硅胶颗粒和离心柱的9种组合进行病毒RNA的富集,富集后分别进行RealtimePCR检测。并对检测结果进行统计学分析。利用几种助沉剂和核酸纯化方法的组合时,发现磁珠+AcrylCarrier助沉剂方法是最佳的核酸富集方法,能够大大提高病毒核酸的检出效率。建立了甲型H1N1流感超敏感诊断方法,该方法能够大大提高甲型H1N1流感的检出率。
- 计云霞刘宁石英魏飞力魏征陈德喜
- 关键词：甲型H1N1流感
- 急性HIV感染者HLA-A、B携带Bw4簇对CD4 T细胞计数、病毒载量的影响被引量：3
- 2010年
- 目的 观察急性人类免疫缺陷病毒（HIV）感染者人类白细胞抗原（HLA）A、HLA-B携带Bw4簇对其CD4 T细胞计数、病毒载量的影响.方法 用序列特异性引物-聚合酶链反应（SSP-PCR）对2006-2009年北京及其周边地区的95例急性HIV感染者的HLA-A、B等位基因分型,检测CD4 T细胞计数和病毒载量,分析HLA-A、B携带Bw4对急性HIV感染者CD4 T细胞计数、病毒载量的影响.结果 （1）在95例急性HIV感染者中,HLA-A、HLA-B携带Bw4分别占32.6%（31/95）、60.0%（57/95）.HLA-B携带Bw4/4、Bw4/6、Bw6/6的感染者分别为21.1%（20/95）、38.9%（37/95）、40.0%（38/95）.（2）与CD4 T细胞计数＜500个/μl患者比较,CD4 T细胞计数≥500个/μl患者携带Bw4数量更多（平均秩次：56.7比41.6,U=749.5,P＜0.01）.最少的感染者是HLA-A、B携带3个Bw4且CD4 T细胞＜500个/μl（1例）,其次是HLA-A、B携带0或3个Bw4且CD4 T细胞≥500个/μl（均为7例,x2=12.6,P＜0.01）.（3）HLA-A、B携带0或1个Bw4的感染者其CD4 T细胞计数均低于携带3个Bw4的感染者（中位数：430、425个/μl比651个/μl）,而病毒载量均高于携带3个Bw4的感染者（对数值,中位数：4.48、4.40比3.43,均P＜0.05）.但是HLA-A、B携带2个或3个Bw4的感染者CD4T细胞计数和病毒载量差异均无统计学意义（均P＞0.05）.（4）不考虑HLA-A是否携带Bw4,HLA-B携带Bw4/4纯合子的感染者其CD4 T细胞计数（中位数：538个/μl））显著高于HLA-B携带Bw4/6或Bw6/6的感染者（433、427个/μl）而病毒载量（对数值,中位数：3.53）显著低于HLA-B携带Bw4/6或Bw6/6的感染者（4.29、4.48,均P＜0.05）.而不考虑HLA-B是否携带Bw4,HLA-A携带Bw4与不携带Bw4的感染者比较,CD4 T细胞计数和病毒载量差异无统计意义（P＞0.05）.结论 Bw4可能与HIV感染者高CD4 T细胞计数、低病毒载量有关,并且可能是HLA-B携带Bw4/4纯合子起作用,从而延缓疾病进展.
- 张欣闫惠平杨红兵李伟华张海萍计云霞崔丹
- 关键词：HIV感染HLA-A抗原HLA-B抗原
- 某三级甲等传染病医院HIV/AIDS患者临床特征分析被引量：3
- 2015年
- 目的 探讨某三级甲等传染病医院HIV/AIDS患者的临床特点,及其人类免疫缺陷病毒（HIV）感染与乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）和梅毒螺旋体（TP）感染及其相互合并感染的关系,分析HIV/AIDS患者的流行病学特征. 方法 回顾性分析北京佑安医院2009-08 ～2014-03收治的200例住院HIV/AIDS患者的临床资料,收集流行病学信息,进行统计学分析. 结果 200例HIV/AIDS患者中,男女比例为1∶0.17.18-60岁年龄段占89.0％,60岁以上年龄段占8.5％.性传播感染占39.0％,未知传播途径感染占33.0％.患者就诊以感染科病房为主,占90％.CD4＋T淋巴细胞计数≤350个/μl的患者占77.05％,HIV病毒载量＞1×105 copies/ml的患者占30.5％.抗病毒治疗采用一二线治疗方案的占44.5％.HIV/AIDS患者常伴随HBV、HCV及TP合并二重或多重感染.多数患者就诊时具有2种及其以上临床表现. 结论 入院HIV/AIDS患者临床表现多样、复杂且伴随HBV、HCV及TP合并二重或多重感染情况严重,患者的流行病学特征提示,急切加强宣教干预和提高诊疗水平,从而控制AIDS的流行.
- 绳波徐萌杨籽翾计云霞李威
- 关键词：HIV/AIDS乙型肝炎病毒丙型肝炎病毒梅毒螺旋体
- GPC3特异性HLA-A11限制的T淋巴细胞表位肽免疫活性检测被引量：1
- 2014年
- 目的设计合成人类白细胞抗原(HLA)-A11限制性T细胞识别的磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)多肽,并检测其免疫原性和反应性。方法利用BIMAS和SYFPEITHI评分系统评价GPC3多肽与HLA-A11分子的结合能力,预测出相应的抗原谱,合成HLA-A1101限制性GPC3多肽库;流式细胞仪检测HCC患者HLA-A11分子的表达;多肽刺激外周血淋巴细胞,酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测T细胞对GPC3多肽的反应性。结果流式细胞仪检测32例HCC患者,7例HLA-A11分子表达阳性(21.9%);ELISPOT检测发现17例(53.1%)HCC患者的T细胞应答阳性,7例(21.9%)HLA-A11表型检测阳性的HCC患者,T细胞应答结果成强阳性。HLA-A11限制性GPC3多肽应答率符合人群中相应基因位点的自然表达率。结论 GPC3多肽设计合理,具有良好的免疫原性和反应性。
- 孙斌李雯计云霞郭向华杨晓珍郝美君李伟华白飞云王延军郑加生陈德喜
- 关键词：磷脂酰肌醇蛋白聚糖3人类白细胞抗原T淋巴细胞表位肽
- 总HIV-1 DNA定量检测技术的建立被引量：3
- 2019年
- 目的建立一种基于实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)方法的1型艾滋病病毒(HIV-1)总脱氧核糖核酸(DNA)定量检测技术。方法构建了同时包含HIV靶基因和内参基因的质粒标准品,设计了涵盖我国主要HIV流行亚型的特异性引物和Taqman水解探针,对引物亚型覆盖面、灵敏度、特异性等相关指标进行了分析,进行了批内和批间重复试验。结果该检测方法所设计的HIV特异性引物和探针序列高度保守,成功检测12种常见及稀有HIV亚型;扩增灵敏度可达4个拷贝/PCR反应管,特异度100%;加入了细胞定量体系,做到了在同一个PCR反应管中既定量了HIV DNA,又定量了细胞数;批内和批间差异性的变异系数均在20%以内。结论该检测方法可用于HIV储藏库检测,评估联合抗病毒治疗的效果,可以用于"窗口期"HIV感染的辅助诊断以及HIV阳性母亲的新生儿HIV感染的诊断。
- 刘志英袁霖张欣陆小凡刘利锋计云霞夏炜粟斌吴昊张彤
- 关键词：艾滋病病毒
- CFSE标记人T细胞亚群增殖反应及其在病毒感染性疾病中的应用
- 2008年
- 目的探讨应用流式细胞术和活体染料羧基荧光素二乙酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记人T细胞亚群增殖反应的方法学及其在病毒感染性疾病中的应用价值。方法用不同浓度的CFSE标记新鲜分离的人外周血单个核细胞(PBMC),分为未刺激组及刺激组。未刺激组加入CD28,刺激组加入CD28及不同浓度PHA,将细胞培养5～7d后进行染色,采用流式细胞仪检测,观察CFSE、PHA标记的最佳浓度及最佳培养时间,采用CellQuest软件及ModFit软件分析T淋巴细胞各亚群的增殖情况,并对两种分析方法进行比较,在上述最佳实验条件下,采用相同的实验方法分析CMV-pp65肽刺激CMV-IgG(+)HLA-A2(+)者外周血单个核细胞(PBMC)后T细胞亚群增殖情况;结果CFSE标记人外周血单个核细胞(PBMC)的最佳浓度是0.5μmol/L,PHA的最佳刺激浓度为2μg/ml,在此浓度下,最佳培养时间为6d,PHA刺激培养6d后T细胞各亚群出现典型的增殖不同步现象,经CMV-pp65肽刺激后CD8+T细胞出现明显的增殖反应,采用CellQuest及ModFit软件联合分析,可实现淋巴细胞增殖分析的可视化及数量化。结论CFSE染色结合荧光抗体标记和流式细胞术是分析淋巴细胞增殖的有力工具,可以有效检测出病毒抗原刺激后T淋巴细胞各亚群的增殖反应及增殖动力学,在探讨病毒感染性疾病的发病机制中具有重要价值。
- 彭巧丽李海英曹振环田亚坤陈新月吴昊计云霞
- 关键词：T淋巴细胞CFSE增殖反应
