范青源
- 作品数：21 被引量：54H指数：5
- 供职机构：第二军医大学附属长海医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 大疱性类天疱疮的诊疗进展被引量：6
- 1999年
- 介绍大疱性类天疱疮诊断的实验室检测手段,在此基础上总结出可靠的临床诊断标准,评价与大疱性类天疱疮预后相关的特异性指标,同时介绍其临床治疗进展及疗效。其中详细描述了各种免疫学诊断技术、临床诊断标准和皮质类固醇联合免疫抑制剂的综合治疗方案。
- 范青源
- 关键词：大疱性类天疱疮
- 免疫磁性分离技术分离、纯化小鼠表皮郎格罕细胞被引量：1
- 1996年
- 为了探讨表皮郎格罕细胞(LC)的培养方法,研究其功能特点,须将 LC 与表皮其它细胞相分离。我们在 Percoll 密度梯度离心技术纯化 LC 的基础上,采用免疫磁性分离技术,取得了更为满意的结果。通过生物素-亲合素的介导,用结合大鼠抗小鼠细胞表面 Ia 抗原的单抗的免疫磁珠吸附 LC 表面,经高强度磁场筛选,从而将 LC 从表皮细胞悬液中分离、纯化出来。结果表明,LC 的纯化率超过99%,纯化后细胞活性超过95%,产率超过80%。同种混合白细胞应答检测证实纯化后的 LC 仍有功能活性。该方法操作简单、快速,且可获得高纯化率、有功能活性的 LC。
- 范青源郑茂荣牟贤龙方跃明
- 关键词：郎格罕细胞免疫磁性分离纯化
- 人表皮生长因子基因体外转染人角质形成细胞的研究被引量：2
- 2000年
- 范青源戴方平应康谢毅郑茂荣陈玉林方之扬
- 关键词：基因治疗角质形成细胞HEGF
- 降钙素基因相关肽对HaCaT细胞一氧化氮合酶表达的影响被引量：7
- 2004年
- 目的研究降钙素基因相关肽对体外培养角质形成细胞HaCaT株神经型一氧化氮合酶(NOS)mRNA、蛋白表达和NO释放的调节作用。方法应用NO试剂盒(酶法)检测培养细胞上清液中NO水平,RT-PCR和免疫组化(SP)方法检测HaCaT细胞神经型NOSmRNA和蛋白的表达水平。结果体外正常培养的HaCaT细胞表达和释放基础水平的神经型NOS和NO,降钙素基因相关肽上调HaCaT细胞神经型NOS表达和NO释放,降钙素基因相关肽受体抑制剂CGRP-8-37抑制降钙素基因相关肽的作用。结论降钙素基因相关肽诱导角质形成细胞表达神经型NOS并促进神经型NO释放。
- 聂本勇范青源郑茂荣陶苏江顾军高春芳牟贤龙
- 关键词：降钙素基因相关肽HACAT细胞NOS酶表达一氧化氮合酶角质形成细胞
- Percoll密度梯度离心技术分离纯化豚鼠表皮Langerhans细胞 被引量：9
- 1995年
- 表皮Ｌａｎｇｅｒｈａｎｓ细胞（ＬＣ）仅占表皮细胞的２％～４％，但在免疫系统中占重要作用。为了对ＬＣ的表型、功能特点及分子生物学水平等作进一步研究，有必要获得高纯化率且具有活性的ＬＣ。我们采用连续、间断Ｐｅｒｃｏｌｌ密度梯度离心相结合的方法分离、纯化豚鼠表皮ＬＣ。结果表明ＬＣ纯化率超过６０％，产率超过８０％，细胞活性超过９０％。自体混合白细胞应答检测证实纯化的ＬＣ仍保持功能活性。该方法简单、快速、价廉，且获得非表面标记性的ＬＣ。
- 郑茂荣范青源谢勇牟贤龙方跃明顾美芳
- 关键词：LANGERHANS细胞密度梯度离心表皮
- 人表皮生长因子基因的克隆及其真核表达载体的构建
- 1999年
- 范青源戴方平谢毅应康林 卿陈玉林
- 关键词：人表皮生长因子基因克隆真核表达载体
- cDNA代表性差异分析法的建立及克隆银屑病相关基因片段初探
- 2000年
- 目的 通过 cDNA代表性差异分析法（ cDNA－ representational difference analysis， RDA）来寻找银屑病皮损组织中特异表达的基因片段。方法 用改良的异硫氰酸胍一步法提取银屑病皮损及正常皮肤组织的 tRNA及 mRNA，逆转录后采用差减杂交及选择性 PCR扩增相结合为基础的 RDA方法，使含有特定接头的银屑病组 cDNA片段得到大量扩增。结果 通过质量分数 1％琼脂糖凝胶电泳及放射自显影分析，两组皮肤组织 mRNA质量及丰度都比较高；经过两次 PCR扩增后在琼脂糖凝胶电泳上可见 5条清晰条带，其大小范围在 100～ 600 bp之间。结论 本实验表明银屑病皮损组织中可能存在与正常皮肤组织差异表达的基因； cDNA－ RDA方法对于识别差异表达的基因具有高效性。
- 陶苏江范青源方跃明牟贤龙顾军郑茂荣谢毅应康
- 关键词：银屑病核酸杂交CDNARDA
- TNF-α和IL-1β对HaCaT细胞诱生型一氧化氮合酶表达的影响被引量：5
- 2004年
- 目的 探讨炎症性细胞因子肿瘤坏死因子 α(tumornecrosisfactor α ,TNF α)协同白细胞介素 1β(inter leukin 1β ,IL 1β)对体外培养角质形成细胞 (keratinocye ,KC)株HaCaT细胞诱生型一氧化氮合酶 (induciblenitricoxidesyn thase ,iNOS)mRNA和蛋白表达的调节作用 ,以及地塞米松对TNF α和IL 1β作用的影响。 方法 用RT PCR、Westernblotting和免疫组织化学 (SP)方法检测HaCaT细胞iNOSmRNA和蛋白表达情况。结果 正常培养HaCaT细胞iNOS微弱表达或不表达 ,TNF α协同IL 1β显著上调HaCaT细胞iNOSmRNA和蛋白表达 ,地塞米松可显著抑制TNF α和IL 1β的作用。结论 推测TNF α和IL 1β可能通过上调角质形成细胞表达iNOS合成释放的一氧化氮 (niricoxide ,NO)参与皮肤免疫和炎症反应 ;地塞米松的治疗效应可能部分与其能抑制iNOS表达有关。
- 聂本勇郑茂荣范青源陶苏江顾军牟贤龙
- 关键词：TNF-ΑIL-1ΒHACAT细胞诱生型一氧化氮合酶皮肤炎症性疾病
- 肛管鳞状细胞癌的治疗进展被引量：2
- 1992年
- 长期以来,经腹会阴联合直肠切除术(APR)一直是治疗肛管鳞状细胞癌(肛管鳞癌)的主要手段。由于并发症多,局部复发率高,治疗效果不令人满意。自70年代起,随着放疗与化疗的进展和手术技术的提高,改变了肛管鳞癌治疗的传统观点。
- 范青源喻德洪金国翔
- 关键词：肛管鳞状细胞癌
- 人表皮细胞生长因子基因真核表达质粒的构建
- 1996年
- 目的：进行外源性基因真核表达的系统构建。方法：以肾组织ｍＲＮＡ为模板进行逆转录ＰＣＲ扩增人表皮细胞生长因子（ｈＥＧＦ）信号肽基因；将扩增的特异性ＤＮＡ条带克隆于ｐＢＫ－ＣＭＶ质粒中进行序列测定；再将已扩增的ｈＥＧＦ基因克隆于测序正确的ｐＢＫ－信号肽双链中，挑选白色菌落进行ＰＣＲ及酶切鉴定。结果：（１）测序结果表明经ＰＣＲ扩增的特异性ＤＮＡ条带的基因序列与ｈＥＧＦ信号肽基因一致；（２）经ＰＣＲ及酶切鉴定获得了序列正确的ｐＢＫ－信号肽－ＥＧＦ真核表达质粒。结论：本法可构建ｈＥＧＦ基因真核表达质粒。
- 范青源谢毅戴方平应康林卿潘耀良方之杨陈玉林
- 关键词：表皮细胞生长因子信号肽
