苏荣健
- 作品数：59 被引量：187H指数：8
- 供职机构：南京医科大学第一临床医学院更多>>
- 发文基金：辽宁省科技厅基金国家自然科学基金辽宁省博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 猪CFL2b/荧光蛋白融合基因在小鼠成肌细胞中的表达与定位
- 2008年
- [目的]了解猪CFL2b基因在成肌细胞中的表达与定位。[方法]用RT-PCR方法扩增得到猪CFL2b基因,连接到T载体上,双酶切后通过定向克隆将其与真核表达载体pEGFP-N1的绿色荧光蛋白基因融合,构建CFL2b-荧光蛋白融合基因表达载体。然后经真核表达质粒-脂质体介导,导入C2C12细胞系。[结果]荧光显微镜观察显示:在空白载体pEGFP-N1转染的C2C12细胞中荧光布满整个细胞,而在转染阳性载体pEGFP-N1-CFL2b的C2C12细胞中荧光主要聚集在细胞质的肌动蛋白丝。表明转染的C2C12细胞系能够高效表达猪CFL2b蛋白,猪CFL2b基因表达的蛋白定位于细胞质中。[结论]该研究为CFL2b基因的功能及该基因与猪肉质性状的相关性的研究奠定了基础。
- 赵微李久纯巴彩凤苏荣健苏玉虹
- 关键词：C2C12细胞
- 川芎嗪对中波紫外线诱导黑素细胞黑素生成的影响被引量：10
- 2006年
- 目的:研究川芎嗪(TMP)对不同剂量中波紫外线(UVB)诱导正常人黑素细胞黑素合成的影响,并初步探讨其机理。方法:常规分离培养正常人黑素细胞,分别用30mJ/cm2、90mJ/cm2的UVB照射细胞,然后加入100μg/ml、300μg/ml、600μg/ml的TMP孵育至72h,采用噻唑蓝(MTT)法测定细胞增殖情况;多巴氧化法测定酪氨酸酶活性;NaOH裂解法测定黑素含量。结果:30mJ/cm2的UVB能诱导黑素细胞增殖,加强酪氨酸酶活性,促进黑素生成,TMP能显著抑制该效应,并呈剂量依赖性;90mJ/cm2的UVB对黑素细胞产生明显的细胞毒作用,细胞增殖下降,黑素合成减少,TMP则能减轻其细胞毒作用,并也表现为剂量依赖性,以600μg/ml的TMP作用最为显著,差异有统计学意义。结论:TMP不但能抑制低剂量UVB照射诱导的黑素细胞增殖和黑素合成,而且还能减轻高剂量UVB照射对黑素细胞的细胞毒作用,对黑素细胞起一定的光保护作用。
- 金颂良苏荣健朱健伟骆丹
- 关键词：川芎嗪黑素细胞中波紫外线
- 人GRP78蛋白的原核表达、纯化及抗原活性鉴定被引量：1
- 2011年
- 目的:构建原核表达质粒pGEX-4T-1-GRP78,诱导表达、纯化后检测GRP78蛋白的抗原活性。方法:利用PCR方法从本实验室已构建的真核表达载体pcDNA3.1(+)上扩增GRP78基因,将其克隆至原核表达载体pGEX-4T-1,构建重组载体pGEX-4T-1-GRP78。转化至大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,再将所表达的融合蛋白进行纯化。经SDS-PAGE分析后,将所得产物用Thrombin切割;进一步包板后用ELISA法对其抗原活性进行评价。结果:酶切和测序结果均证实GRP78原核表达载体构建正确,可诱导表达;ELISA检测显示纯化后的人GRP78抗原具有免疫原性。结论:成功构建了人GRP78基因的原核表达载体,获得了纯化的GRP78蛋白,该蛋白具有良好的抗原活性,为进一步研究以GRP78为基础的肝细胞癌的血清学检测提供了抗原。
- 宋慧娟李宏丹魏嘉苏荣健
- 关键词：GRP78原核表达蛋白纯化肝细胞癌
- 西藏藏族人群白细胞介素1受体拮抗剂基因多态性
- 2011年
- 目的：研究白细胞介素-1受体拮抗剂（IL-1Ra）在西藏藏族健康人群中的分布特点,并与其他不同人群进行比较.方法：采用PCR的方法,对125名西藏拉萨市藏族人群IL-1Ra基因的可变数目串联重复序列多态性进行检测,计算其基因型频率和等位基因频率,并结合文献与其他不同人群进行比较分析.结果：西藏藏族人群IL-1Ra位点基因型以A1/A1纯合子型最为多见（频率为90.40%）,A1/A2杂合子型次之（频率为9.60%）,A2/A2纯合子型未检测到;其等位基因分布也是以A1等位基因最为多见 （频率为95.20%）,其次为A2等位基因（频率为4.80%）.西藏藏族人群的等位基因频率分布与美国人、德国人、非洲白人差异较大,具有统计学意义.而与亚洲人群包括日本人和中国汉族差异较小.结论：西藏拉萨市藏族人群中IL-1Ra位点以A1等位基因为主,其多态性分布与其他人群之间存在明显的差异,为进一步研究IL-1Ra基因多态性与疾病的关系奠定了基础.
- 李宁任甫宋慧娟苏荣健温有峰席焕久
- 关键词：白细胞介素-1多态性聚合酶链反应-限制性片段长度多态性
- 猪附红细胞体特异性基因的克隆和PCR诊断方法的建立被引量：17
- 2008年
- 根据2003年Hoelzle发表的猪附红细胞体的基因组序列(AJ504999)设计一对特异性引物,对病料样品进行PCR扩增并将其产物克隆到pMD18-T载体后测序,结果表明扩增出的片段为603bp,同源性分析表明该序列与参考基因组序列同源性为100%,反映出我国分离株与国外株其基因无差异,特异性和敏感性试验表明,所建立的PCR诊断方法与常见的支原体、细菌及原虫无交叉反应,能检测到猪附红细胞体血液基因组DNA最低量为0.65ng/mL,该方法具有快速、特异、敏感等特点,为猪附红细胞体病的快速诊断及流行病学调查提供了新的手段。
- 冯会权苏玉虹苏荣健朱宝芹赵晓薇聂茹赵微巴彩凤
- 关键词：猪附红细胞体PCR克隆
- 对在职人员攻读临床医学硕士学位工作的认识与思考被引量：1
- 2000年
- 苏荣健
- 关键词：在职人员毕业研究生同等学力
- 肝细胞生长因子对肝细胞癌细胞系SMMC-7721黏着斑激酶的影响被引量：2
- 2009年
- 目的:探讨肝细胞生长因子(HGF)对黏着斑激酶(FAK)、Src表达及活性的影响以及PI3K在该过程中的作用.方法:LY294002预处理阻断PI3K的活性、HGF处理SMMC-7721后检测FAK和Src的表达、磷酸化及在细胞内的分布.应用免疫印迹技术检测FAK、Src的表达及磷酸化,免疫荧光技术检测FAK在SMMC-7721细胞中的分布.结果:HGF(50μg/L)可以促进FAKY397位点的磷酸化,对FAK的表达没有影响.应用PI3K抑制物LY294002处理后,FAKY397的磷酸化水平显著降低.HGF处理后,FAK主要位于细胞边缘,呈簇状分布,应用PI3K抑制物,FAK在细胞内弥散分布.HGF处理后,Src激酶和SrcY416的磷酸化水平明显增加,而经LY294002处理后,Src激酶与SrcY416的磷酸化水平明显降低.结论:肝细胞癌中,HGF以PI3K依赖性的方式促进FAK和Src的活化.
- 苏荣健李贞李宏丹宋慧娟程留芳
- 关键词：肝细胞癌肝细胞生长因子黏着斑激酶PI3K
- 犬黑皮质素受体4真核表达载体的构建及表达被引量：3
- 2008年
- [目的]构建带myc和His标签的犬黑皮质素受体4真核表达载体并在MDCK细胞中进行表达。[方法]以犬MC4R基因组DNA为模板PCR扩增目的基因编码区,将扩增产物进行T-A克隆;酶切、测序鉴定成功后将目的基因亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1-myc-His/A。重组体pcDNA3.1-myc-His/A-cMC4R经酶切和测序鉴定;采用FuGENE HD介导转染技术将重组体导入MDCK细胞;转染后继续培养72 h,提取细胞内总RNA,RT-PCR鉴定目的基因的表达;提取细胞总蛋白,Western Blot检测蛋白表达。[结果]构建带标签的pcDNA3.1-myc-His/A-cMC4R重组真核表达载体,测序结果与GenBank公布的序列相似性为99%。RT-PCR和Western Blot检测到目的基因表达。[结论]成功构建犬真核表达载体pcDNA3.1-myc-His/A-MC4R,重组体能在MDCK细胞中表达。
- 王光川巴彩凤苏荣健张轶博赵微宋慧娟武洁
- 关键词：真核表达载体MDCK细胞
- 附红细胞体病研究综述被引量：15
- 2007年
- 对附红细胞体病(Eperythrozoonosis)的病原形态特征、病原分类、发病机制、流行病学、体外培养、治疗及预防等研究成果进行了综述,以期对该病的病原学及防治研究提供参考。
- 冯会权巴彩凤苏玉虹苏荣健聂茹赵微
- 关键词：附红细胞体病附红细胞体人兽共患病
- 卵巢癌中p16基因纯合性缺失突变和异常表达的研究
- 目的:p16基因是一种重要的抑癌基因,在多种肿瘤中存在广泛的纯合性缺失、突变及表达异常.该研究中,研究人员检测了32例处于不同临床分期的卵巢癌样品p16基因纯合性缺失、突变及表达情况,旨在探讨p16基因纯合性缺失、突变及...
- 苏荣健
- 关键词：卵巢癌基因纯合性缺失基因转录
