苏荣健
- 作品数：59 被引量：183H指数：8
- 供职机构：南京医科大学第一临床医学院更多>>
- 发文基金：辽宁省科技厅基金国家自然科学基金辽宁省博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 猪CFL2b/荧光蛋白融合基因在小鼠成肌细胞中的表达与定位
- 2008年
- [目的]了解猪CFL2b基因在成肌细胞中的表达与定位。[方法]用RT-PCR方法扩增得到猪CFL2b基因,连接到T载体上,双酶切后通过定向克隆将其与真核表达载体pEGFP-N1的绿色荧光蛋白基因融合,构建CFL2b-荧光蛋白融合基因表达载体。然后经真核表达质粒-脂质体介导,导入C2C12细胞系。[结果]荧光显微镜观察显示:在空白载体pEGFP-N1转染的C2C12细胞中荧光布满整个细胞,而在转染阳性载体pEGFP-N1-CFL2b的C2C12细胞中荧光主要聚集在细胞质的肌动蛋白丝。表明转染的C2C12细胞系能够高效表达猪CFL2b蛋白,猪CFL2b基因表达的蛋白定位于细胞质中。[结论]该研究为CFL2b基因的功能及该基因与猪肉质性状的相关性的研究奠定了基础。
- 赵微李久纯巴彩凤苏荣健苏玉虹
- 关键词：C2C12细胞
- 西藏藏族人群白细胞介素1受体拮抗剂基因多态性
- 2011年
- 目的：研究白细胞介素-1受体拮抗剂（IL-1Ra）在西藏藏族健康人群中的分布特点,并与其他不同人群进行比较.方法：采用PCR的方法,对125名西藏拉萨市藏族人群IL-1Ra基因的可变数目串联重复序列多态性进行检测,计算其基因型频率和等位基因频率,并结合文献与其他不同人群进行比较分析.结果：西藏藏族人群IL-1Ra位点基因型以A1/A1纯合子型最为多见（频率为90.40%）,A1/A2杂合子型次之（频率为9.60%）,A2/A2纯合子型未检测到;其等位基因分布也是以A1等位基因最为多见 （频率为95.20%）,其次为A2等位基因（频率为4.80%）.西藏藏族人群的等位基因频率分布与美国人、德国人、非洲白人差异较大,具有统计学意义.而与亚洲人群包括日本人和中国汉族差异较小.结论：西藏拉萨市藏族人群中IL-1Ra位点以A1等位基因为主,其多态性分布与其他人群之间存在明显的差异,为进一步研究IL-1Ra基因多态性与疾病的关系奠定了基础.
- 李宁任甫宋慧娟苏荣健温有峰席焕久
- 关键词：白细胞介素-1多态性聚合酶链反应-限制性片段长度多态性
- 猪附红细胞体特异性基因的克隆和PCR诊断方法的建立被引量：16
- 2008年
- 根据2003年Hoelzle发表的猪附红细胞体的基因组序列(AJ504999)设计一对特异性引物,对病料样品进行PCR扩增并将其产物克隆到pMD18-T载体后测序,结果表明扩增出的片段为603bp,同源性分析表明该序列与参考基因组序列同源性为100%,反映出我国分离株与国外株其基因无差异,特异性和敏感性试验表明,所建立的PCR诊断方法与常见的支原体、细菌及原虫无交叉反应,能检测到猪附红细胞体血液基因组DNA最低量为0.65ng/mL,该方法具有快速、特异、敏感等特点,为猪附红细胞体病的快速诊断及流行病学调查提供了新的手段。
- 冯会权苏玉虹苏荣健朱宝芹赵晓薇聂茹赵微巴彩凤
- 关键词：猪附红细胞体PCR克隆
- 对在职人员攻读临床医学硕士学位工作的认识与思考被引量：1
- 2000年
- 苏荣健
- 关键词：在职人员毕业研究生同等学力
- 肝细胞生长因子对肝细胞癌细胞系SMMC-7721黏着斑激酶的影响被引量：2
- 2009年
- 目的:探讨肝细胞生长因子(HGF)对黏着斑激酶(FAK)、Src表达及活性的影响以及PI3K在该过程中的作用.方法:LY294002预处理阻断PI3K的活性、HGF处理SMMC-7721后检测FAK和Src的表达、磷酸化及在细胞内的分布.应用免疫印迹技术检测FAK、Src的表达及磷酸化,免疫荧光技术检测FAK在SMMC-7721细胞中的分布.结果:HGF(50μg/L)可以促进FAKY397位点的磷酸化,对FAK的表达没有影响.应用PI3K抑制物LY294002处理后,FAKY397的磷酸化水平显著降低.HGF处理后,FAK主要位于细胞边缘,呈簇状分布,应用PI3K抑制物,FAK在细胞内弥散分布.HGF处理后,Src激酶和SrcY416的磷酸化水平明显增加,而经LY294002处理后,Src激酶与SrcY416的磷酸化水平明显降低.结论:肝细胞癌中,HGF以PI3K依赖性的方式促进FAK和Src的活化.
- 苏荣健李贞李宏丹宋慧娟程留芳
- 关键词：肝细胞癌肝细胞生长因子黏着斑激酶PI3K
- 犬黑皮质素受体4真核表达载体的构建及表达被引量：3
- 2008年
- [目的]构建带myc和His标签的犬黑皮质素受体4真核表达载体并在MDCK细胞中进行表达。[方法]以犬MC4R基因组DNA为模板PCR扩增目的基因编码区,将扩增产物进行T-A克隆;酶切、测序鉴定成功后将目的基因亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1-myc-His/A。重组体pcDNA3.1-myc-His/A-cMC4R经酶切和测序鉴定;采用FuGENE HD介导转染技术将重组体导入MDCK细胞;转染后继续培养72 h,提取细胞内总RNA,RT-PCR鉴定目的基因的表达;提取细胞总蛋白,Western Blot检测蛋白表达。[结果]构建带标签的pcDNA3.1-myc-His/A-cMC4R重组真核表达载体,测序结果与GenBank公布的序列相似性为99%。RT-PCR和Western Blot检测到目的基因表达。[结论]成功构建犬真核表达载体pcDNA3.1-myc-His/A-MC4R,重组体能在MDCK细胞中表达。
- 王光川巴彩凤苏荣健张轶博赵微宋慧娟武洁
- 关键词：真核表达载体MDCK细胞
- 附红细胞体病研究综述被引量：15
- 2007年
- 对附红细胞体病(Eperythrozoonosis)的病原形态特征、病原分类、发病机制、流行病学、体外培养、治疗及预防等研究成果进行了综述,以期对该病的病原学及防治研究提供参考。
- 冯会权巴彩凤苏玉虹苏荣健聂茹赵微
- 关键词：附红细胞体病附红细胞体人兽共患病
- 卵巢癌中p16基因纯合性缺失突变和异常表达的研究
- 目的:p16基因是一种重要的抑癌基因,在多种肿瘤中存在广泛的纯合性缺失、突变及表达异常.该研究中,研究人员检测了32例处于不同临床分期的卵巢癌样品p16基因纯合性缺失、突变及表达情况,旨在探讨p16基因纯合性缺失、突变及...
- 苏荣健
- 关键词：卵巢癌基因纯合性缺失基因转录
- 肥胖MC4R重组腺病毒表达载体的构建及鉴定
- 2011年
- 目的构建黑素皮质素受体-4(MC4R)重组腺病毒表达载体,为肥胖症的基因治疗研究奠定基础。方法 PCR扩增犬MC4R目的基因后与T载体连接,双酶切鉴定正确的T-A载体获得具有黏性末端的MC4R目的基因;将其亚克隆至腺病毒穿梭载体pShuttle-CMV中,构建穿梭载体pShuttle-CMV/MC4R;PmeⅠ单酶切pshuttle-CMV/犬MC4R后,转化到含pAdeasy-1的BJ5183感受态细胞,采用细菌内同源重组法构建腺病毒载体pAdeasy-1/pshuttle-CMV/MC4R;筛选阳性克隆子;PacⅠ酶切鉴定。结果线性化的pShuttle-CMV/MC4R转化含pAdeasy-1的BJ5183感受态细胞,16 h后获得阳性克隆子,经PacⅠ酶切鉴定出一大于20 kb的大片段和3.0 kb的特征性片段,通过BglⅡ、XhoⅠ双酶切切下约1000 bp的片段,含MC4R目的基因的重组腺病毒载体构建成功。结论细菌内同源重组法可高效、快捷的制备含犬MC4R的重组腺病毒载体;该载体为人类肥胖症的基因治疗研究奠定了基础。
- 王玉彬吕金钢苏荣健王光川巴彩凤
- 关键词：肥胖同源重组腺病毒载体
- 猪新基因CFL2真核表达载体的构建及在C2C12细胞中的瞬时表达被引量：1
- 2008年
- 从猪的股二头肌中提取总RNA,利用RT-PCR技术从猪骨骼肌中获得CFL2基因的编码区序列,T-A克隆至PMD-18T载体,经HindⅢ和XhoⅠ酶切后定向克隆至真核表达载体pCDNA3.1(+)中。获得的重组质粒pCDNA3.1(+)/CFL2用限制性内切酶酶切分析和DNA测序分析鉴定,并经脂质体瞬时转染C2C12细胞,最后利用PCR检测转基因细胞中CFL2基因的存在及其表达情况。结果显示:猪CFL2基因已克隆到真核表达载体pCDNA3.1(+)中,转染的C2C12细胞中检测到细胞内较高量CFL2的表达。pCDNA3.1(+)/CFL2真核表达载体的成功构建,为深入研究CFL2基因在猪肌肉细胞中的功能奠定基础,为猪肉质品质的改良提供了新的思路。
- 赵微苏玉虹巴彩凤苏荣健宋慧娟
- 关键词：真核表达载体PCDNA3.1(+)C2C12
