罗华东
- 作品数:8 被引量:43H指数:4
- 供职机构:西南大学植物保护学院更多>>
- 发文基金:公益性行业(农业)科研专项国家公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 虫生真菌及其在害虫生物控制中的应用现状与展望被引量:28
- 2010年
- 对近年来国内外在虫生真菌资源与分类、致病机制、基因工程改造、制剂开发研制及虫生真菌在害虫生物防治中的应用等方面取得的显著成果进行了综述,分析了现今害虫生物防治研究中尚存在的问题,并提出了一些对策和建议。
- 王利军谭万忠罗华东杜喜翠
- 关键词:虫生真菌害虫生物防治致病机制
- 一株对马铃薯甲虫具有毒杀和控制作用的萎缩芽孢杆菌
- 一株对马铃薯甲虫具有毒杀和控制作用的萎缩芽孢杆菌(Bacillusatrophaeus)CPB072,从自然环境中分离获得,常规培养条件即可以生长和大量产孢,最适培养基为Luria-Bertani培养基,最适温度30℃,...
- 陆慧慧谭万忠罗华东郭文超
- 文献传递
- 马铃薯甲虫生防细菌的筛选与鉴定
- 马铃薯甲虫(Leptinotarsadecemlineata(Say))是我国重要的进境植物检疫性有害生物,国外已成功开发出基于苏云金杆菌和刺糖多孢菌的细菌性杀虫剂,而国内利用病原细菌等微生物防治该虫的研究报道很少。本研...
- 罗华东
- 关键词:马铃薯甲虫苏云金芽孢杆菌生物控制
- 苏云金芽孢杆菌CPB012菌株的杀虫功能基因鉴定及其对害虫的控制作用被引量:4
- 2015年
- 【目的】分析并鉴定对马铃薯甲虫(Leptinotarsa decemlineata)具强致病性的苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)CPB012菌株的杀虫基因型,为充分而有效地利用此生防菌奠定基础。【方法】CPB012菌株在LB培养基上30℃培养2—3 d,用苯酚品红进行晶体染色,观察伴孢晶体形态。cry1—cry10杀虫基因的检测选用技术成熟的PCR-RFLP(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism)法,即对某一类基因(如cry1、cry2…)保守区序列设计通用引物,并引入限制性内切酶识别序列,将扩增产物用相应的限制性内切酶处理,得到的酶切图谱可以初步判断杀虫基因多态性。同时结合特异性PCR方法对二、三级分类基因(如cry1A、cry2Aa…)设计特异性引物进行扩增,将扩增产物测序比对。cry11—cry40和vip基因通过设计引物进行PCR检测。菌株在LB培养基上培养24、48、72和96 h分别提取晶体蛋白,结合晶体蛋白的SDS-PAGE图谱分析其表达的杀虫蛋白。室内分别测定CPB012对鳞翅目家蚕(Bombyx mori)、鞘翅目马铃薯甲虫和双翅目橘小实蝇(Bactrocera dorsalis)的杀虫效果;室内和田间测定CPB012与球孢白僵菌(Beauveria bassiana)MJ07菌株对马铃薯甲虫的生物协同防治效果。【结果】通过菌株形态和晶体形态的连续观察,发现CPB012能够产生方形和球形等晶体。基因型检测表明CPB012菌株含有cry1Aa、cry1Ia、cry2Aa、cry2Ab和vip3A,结合蛋白电泳图谱,其可能分别编码了约135、80、70、85—90 k D的大分子杀虫蛋白;同时可能还含有30和50 k D的两种新蛋白。室内生测试验显示,除马铃薯甲虫外,CPB012对家蚕和橘小实蝇也具有很强的毒杀作用,处理7 d后死亡率分别为80.30%和76.72%。将CPB012与球孢白僵菌MJ07菌株按0.5﹕0.5剂量混合后室内接种,处理14 d后2龄马铃薯甲虫的累计死亡率达96.5%,极显著地(P<0.01)高于球孢白僵菌MJ07或苏云金芽孢杆菌CPB012单独处理的�
- 陆慧慧林志强谭万忠罗华东鲜菲毕朝位余洋杨宇衡
- 关键词:功能基因杀虫晶体蛋白马铃薯甲虫
- 马铃薯甲虫虫生真菌分离及强致病菌株筛选被引量:6
- 2011年
- 采用常规组织分离法,从新疆石河子、伊宁和昌吉等地区采集的马铃薯甲虫发病成虫虫体上分离并纯化出36个真菌菌株。经形态学初步观察,这些菌株分属于白僵菌(Beauveria)、轮枝菌(Verticillium)、镰刀菌(Fusarium)、青霉(Penicillium)、木霉(Trichoderma)和曲霉(Aspergillus)等属。用这些菌株的悬浮液喷雾接种家蚕(Bombyx mori)幼虫后显示,有26个菌株(白僵菌19株,轮枝菌4株,镰刀菌2株,木霉1株)对家蚕幼虫表现出不同程度致病力,并在接种后5~9 d始见虫体死亡。白僵菌的19个菌株的致病力都非常强,接菌后11 d幼虫累计死亡率(LR11d)为75.80%~95.76%,致死中时(LT50)为7.5~10.2 d,其中白僵菌MJ01、MJ07、MJ09和MJ19的致病力最强,它们的LR11d和LT50分别达到91.24%~95.76%和7.5~8.0 d。轮枝菌的4个菌株的致病力亦较强,它们的LR11d和LT50分别为56.25%~61.55%和9.1~10.3 d。镰刀菌的2个菌株和木霉的1个菌株的致病力都比较弱,其LR11d和LT50分别为7.25%~11.00%和18.5~28.8 d。
- 罗华东王利君谭万忠周军杜喜翠
- 关键词:马铃薯甲虫虫生真菌白僵菌生物防治
- 几个主要因子对水葫芦链格孢生长和侵染力的影响被引量:1
- 2011年
- 测试引起水葫芦黑斑病的生防真菌水葫芦链格孢(Alternaria tenuissima)的主要生物学特性(培养基、温度、pH值对菌落生长以及光照对产孢量的影响)和影响该菌株侵染力的3个主要因子(接种温度、光照、保湿时间),以期为该菌的大量发酵和真菌除草剂的研制奠定基础。试验结果表明,培养基、温度和酸碱度是影响该菌生长的主要因素,其最佳培养基、温度和酸碱度分别是马铃薯蔗糖培养基、25℃和pH值9.0。最适合该菌产孢的光照条件是近紫外光(12h光/12h暗),培养20d后产孢量达到3.44×105个/皿。在室内控制条件下测定,温度、湿度和光照对菌株的致病力都有很大的影响。30℃处理的原生叶片的病害严重度明显高于20℃和25℃2个处理,21d时达到7.77;保湿处理时间设定为0~48h,保湿12h时,4周后水葫芦叶片平均病害严重度达到5.21,感病率达到95%,且发病速度较快;弱光照处理(1 200lx)的叶片病害严重度较强光照处理(3 000lx)的严重度级数高,因此,在一定程度上强光照对菌丝的侵染有抑制作用。
- 胡丽谭万忠殷利利刘佳罗华东
- 关键词:水葫芦黑斑病链格孢菌产孢量
- 一株用于防治马铃薯甲虫的苏云金芽孢杆菌
- 一株用于防治马铃薯甲虫的苏云金芽孢杆菌,属农业害虫生物防治领域。从自然环境中的马铃薯甲虫虫体中分离获得,根据形态、生理生化特征和分子生物学鉴定为苏云金芽孢杆菌。其细胞悬浮液对入侵害虫马铃薯甲虫具有强致病作用和杀虫效果,经...
- 罗华东谭万忠
- 文献传递
- 马铃薯甲虫病原细菌分离及生防菌的筛选与鉴定被引量:4
- 2012年
- 【目的】分离筛选对马铃薯甲虫(Colorado potato beetle,CPB)具强致病性的细菌生防菌株并对其鉴定。【方法】从CPB虫体上分离病原细菌,利用几丁质酶和蛋白酶活性初步筛选致病菌株,然后通过室内和田间试验筛选出可导致CPB大量死亡的生防菌。根据形态学、生理生化特性和16S rDNA序列分析等进行鉴定,确定生防菌株的分类学地位。【结果】从新疆CPB分布区采集的CPB发病成虫虫体上分离纯化获得126个细菌菌株,其中36个菌株对昆虫体壁几丁质和蛋白质具有降解活性。在室内马铃薯叶片饲养的CPB各龄幼虫和成虫上测试,11个菌株对1—2龄幼虫表现出不同程度致病力,在接种后1—3 d始见幼虫死亡,处理后7 d幼虫的累积死亡率达到21.0%—77.9%,所有菌株对2龄以上CPB的致病力不明显或无致病力。在田间种植的马铃薯植株上测试这11个致病菌株,处理后观察,CPB008、CPB012和CPB016等3个菌株在10 d内对CPB的累积致死率达到41.0%—49.9%;另外还有3个菌株对CPB的致死率也在21.1%以上。这6个菌株均为革兰氏阳性菌,从形态学和生理生化特性鉴定它们均属于芽孢杆菌(Bacillus),通过PCR扩增分别获得它们的16S rDNA序列并登录到NCBI GenBank中,由此分析比对,菌株CPB008、CPB012、CPB016和CPB111为苏云金芽孢杆菌(B.thuringiensis);CPB072、CPB108为萎缩芽孢杆菌(B.atrophaeus)。【结论】筛选获得的3株苏云金芽孢杆菌(CPB008、CPB012、CPB016)对马铃薯甲虫致病性强,具有重要的应用潜力。
- 罗华东严加林余洋谭万忠
- 关键词:马铃薯甲虫苏云金芽孢杆菌杀虫效率