秦川
- 作品数：27 被引量：62H指数：5
- 供职机构：新乡医学院更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划河南省自然科学基金河南省高校杰出科研人才创新工程基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- PCR技术在弓形虫检测上的应用被引量：3
- 2007年
- 姚志军秦川刘世国
- 关键词：PCR技术孕妇感染细胞内后天性
- 基因重组Taq DNA聚合酶的制备被引量：7
- 2007年
- 目的制备重组Taq DNA聚合酶,为PCR提供试剂。方法用Taq DNA聚合酶基因的pTaq表达质粒转化E.coli菌株,异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导12 h表达Taq DNA聚合酶,溶菌酶、NP40裂解细菌,硫酸铵沉淀、4℃透析,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和PCR扩增分析其纯度和活性。结果分离纯化制备的Taq酶,纯度、活性都可与同类产品相比,能有效扩增DNA片段。结论该方法制备可用于PCR的Taq酶具有快速简便的优点。
- 王天云秦川杨瑞杨献军
- 关键词：TAQDNA聚合酶基因工程分离纯化
- 2种制备Taq DNA聚合酶方法的比较被引量：2
- 2008年
- 目的比较2种制备纯化Taq DNA聚合酶的方法,为PCR提供实验用酶。方法Taq DNA聚合酶基因的pTaq表达质粒转化E.coli菌株,IPTG诱导12 h后收集菌体,分别用硫酸铵沉淀法和冻融法进行纯化,SDS-PAGE电泳和PCR扩增分析比较其纯度和活性。结果硫酸铵沉淀法制备的Taq DNA聚合酶活性能可有效扩增DNA片段;冻融法制备的Taq DNA聚合酶活性较低。结论硫酸铵沉淀法制备的Taq DNA聚合酶优于冻融法,能够达到分子生物学实验中基因扩增的要求。
- 秦川杨献军杨瑞王天云
- 关键词：TAQDNA聚合酶纯化
- 三种测序DNA模板制备方法的比较
- 2012年
- 背景:DNA模板质量对DNA序列测定起着至关重要的作用。目的:为基因组DNA或甲基化DNA测序寻找一种经济,简便的方法。方法:分别采用96管集合板及96孔板提取质粒,并且针对质粒设计一对包含目的片段的引物,扩增后纯化PCR产物,通过以上3种方法制备DNA测序模板进行测序。结果与结论:实验所采用的3种方法对于基因组DNA测序效果无差异(P>0.05)。对于甲基化DNA测序效果,96管集合板法优于其他2种方法(P<0.05)。说明3种方法均适用于基因组DNA的测序,而96管集合板法更适用于甲基化DNA的测序。
- 秦川张俊河Robert A. Mcknight刘世国
- 关键词：基因组DNADNA测序
- 实验动物精液中弓形虫的动态变化
- 刘世国窦现凤秦川宋晓荣郑素芳张彬刘明林张金华刘素芬
- 该项目用16只雄性健康新西兰家兔经腹腔感染RH株弓形虫速殖子10万个，在感染前后经耳缘静脉采集全血标本经EDTAK2抗凝后使用；由假阴道法采集精液。使用碘化钠法提取血液中总DNA，热碱裂解法提取精液中总DNA，由中山达安...
- 关键词：
- 关键词：家兔弓形虫精液
- PCR-SSP方法在精神疾病分子研究水平中的应用
- 2006年
- 目的建立多个基因多态性分型的聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)的方法,以推广其在精神疾病分子研究水平中的应用。方法应用PCR-SSP的方法分析TNFα-308A/G和-238G/A变异I、L-6-174G/C变异、CYP2D6*10B外显子第188位的C/T变异、COMT基因的第472位编码序列的G/A变异、MAOA基因位于第8外显子CDNA顺序的第941位点的G/T变异等基因的多态性。结果应用同一个PCR扩增程序,可同时对多个基因、多个临床样本的多态性进行分析,基因型清晰,而且基因分型快速、准确。结论PCR-SSP适合对大样本、多个基因的单核苷酸位点变异进行多态性分析,快速、准确,值得在精神病分子水平的研究中推广。
- 杨瑞宋晓荣秦川杨献军
- 关键词：聚合酶链反应序列特异性引物基因多态性精神疾病
- 用序列特异性引物多聚酶链反应的方法进行大样本、多基因的多态性鉴定被引量：2
- 2007年
- 目的:建立多个基因同时进行多态性分析的序列特异性引物多聚酶链反应的方法,以满足其在临床检验中进行基因多态性鉴定时的应用。方法:实验于2005-10/2006-05于河南省新乡医学院分子生物研究室完成。进行临床普通血液常规检测的患者血样200份(由新乡医学院第三附属医院提供),采用临床血样,提取DNA后采用多聚酶链反应扩增,并以扩增后的样品进行琼脂糖凝胶电泳,以是否出现相应的扩增条带作为基因分型的标准。应用优化后的序列特异性引物多聚酶链反应的方法分析以下基因的多态性:肿瘤坏死因子α-308A/G和-238G/A变异、白细胞介素6-174G/C变异、细胞色素P4502D6(CYP2D6)*10B外显子第188位的C/T变异。并由此优化序列特异性引物多聚酶链反应的方法,以达到应用同一个多聚酶链反应扩增程序,可同时对多个基因、多个临床样本的基因多态性同时进行分析,且基因型清晰,分型快速、准确。结果:①用20 g/L的琼脂糖凝胶电泳可看到每泳道内可有2条或1条扩增产物,其中阳性对照β珠蛋白基因的扩增片段长268 bp,此条带可以出现、减弱或者不出现。②其中肿瘤坏死因子α-308A/G存在G/G和A/G两种基因型;肿瘤坏死因子α-238G/A位点可检测到的基因型有G/A、G/G和A/A3型;白细胞介素6-174G/C变异位点可检测到的基因型均为G/G纯合子;细胞色素P4502D6*10B外显子第188位的C/T位点可检测到的基因型为C/C、C/T、T/T3型。结论:优化后的序列特异性引物多聚酶链反应适合对大样本,多个基因的单核苷酸位点变异进行多态性分析,快速、准确、成本低。
- 杨瑞王淑秀秦川杨献军
- 关键词：单核苷酸基因
- 一种定性定量脱氧核糖核酸标准参照物的制备方法
- 本发明公开了一种定性定量脱氧核糖核酸标准参照物的制备方法，本发明的目的是提供一种制备步骤少、反应管少且成本低的定性定量脱氧核糖核酸标准参照物的制备方法。本发明的技术方案是，一种定性定量脱氧核糖核酸标准参照物的制备方法，包...
- 王天云王俐杨瑞昝玉玺秦川井长勤
- 文献传递
- 大鼠心肌组织中网状纤维组织学构筑及增龄变化被引量：11
- 2009年
- 目的观察大鼠心肌组织发育过程中网状纤维的组织学构筑特点和增龄变化，为探讨心肌组织重构特点奠定基础。方法利用石蜡切片、Gomori银染，光镜下观察胎鼠（孕约19d）、新生（9d）、青年（8个月）、老年（14个月）sD大鼠心肌组织网状纤维的组织学构筑特点，Westernblotting检测Ⅲ型胶原蛋白随年龄变化的表达差异。利用图像分析系统对心室肌组织内网状纤维进行定量分析。结果网状纤维分为粗、细纤维，围绕在心肌细胞周围。胎鼠心肌细胞周围网状纤维呈细小线状或缺如，新生鼠的心肌细胞周围网状纤维逐渐增多，形成连续的网状纤维膜，相邻肌细胞之间出现间隙，随年龄而增宽，网状纤维近平行分支填充于间隙内。网状纤维所占面积百分比随年龄增加发生改变。Ⅲ型胶原（网状纤维）表达量随年龄增加发生改变，新生鼠到青年鼠是急剧增加阶段。结论大鼠心肌组织中网状纤维构成肌细胞周围的粗、细纤维鞘成分，并发出分支充填于心肌细胞之间和心肌细胞与间质之间的间隙内，Ⅲ型胶原蛋白量随年龄的变化发生改变。
- 蔡新华郭志坤毛会丽杨瑞秦川
- 关键词：心肌组织网状纤维免疫印迹法
- PCR法检测弓形虫感染家兔血液中弓形虫基因片段被引量：1
- 2009年
- 目的用PCR法检测弓形虫感染家兔血液中弓形虫基因片段。方法弓形虫RH株速殖子感染雄性家兔16只，在感染前后耳缘静脉采集血液标本，-40℃保存。用普通PCR检测血液标本中虫体DNA基因片段。结果普通PCR检测感染家兔总阳性率为45％。感染后第1周检出率仅22％，高峰期维持在感染后2～4周，检出率约为60％左右。其后检出率下降为25％左右并一直维持。结论采用血液作为样品进行弓形虫PCR检测时其最佳检测时间为感染后1～4周，其后检出率逐渐下降。
- 秦川王洪兴
- 关键词：家兔血液弓形虫
