禹文海 作品数:89 被引量:97 H指数:6 供职机构: 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所 更多>> 发文基金: 云南省应用基础研究计划面上项目 云南省技术创新人才培养基金 云南省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 轻工技术与工程 更多>>
食蟹猴奇异变形杆菌的分离鉴定及药敏试验 被引量:3 2020年 目的通过对引进食蟹猴肠道微生物检测分离到的奇异变形杆菌进行鉴定和药敏实验,为引进的实验猴微生物检测和如何开展饲养管理、疾病防控提供理论和技术支撑。方法肛拭子采集食蟹猴粪样,进行细菌分离培养、生化鉴定、药敏试验和小鼠致病性试验。结果 60只食蟹猴中有8只分离到可疑细菌,经鉴定为奇异变形杆菌,表明该群体食蟹猴奇异变形杆菌感染率为13. 3%;药敏试验结果显示该菌对头孢曲松、头孢赛肟,头孢哌酮、头孢唑啉、青霉素等高度敏感,对阿米卡星、庆大霉素、氨苄西林钠、呋喃妥因等中度敏感,对诺氟沙星、四环素、低度敏感、对杆菌肽、环丙沙星、卡那霉素、林可霉素和呋喃唑酮产生耐药性;小鼠致病性试验表明分离到的菌株对小鼠有较强的致病性。结论食蟹猴奇异变形杆菌感染相对较高,该菌对头孢菌素类抗生素较敏感,可在临床中作为首选药物来进行疾病的治疗。该菌有较强的致病性,对食蟹猴群体有潜在的危害性,在平时饲养管理工作中应引起重视。 刘权 刘雨 李艳艳 杨凤梅 马进 和占龙 禹文海 赵远关键词:食蟹猴 奇异变形杆菌 药敏试验 恒河猴肺中阴沟肠杆菌的分离鉴定及药物敏感性分析 被引量:2 2020年 目的对死亡的恒河猴肺脏炎症组织采样进行病原菌分离、培养、鉴定及药敏试验,确诊病原菌及药物敏感性,指导疾病诊疗、预防和临床用药。方法解剖柜条件下解剖死亡猴,分别采集肉眼病变明显和正常肺组织,用灭菌接种环在肺切面部位采样,接种在SS琼脂培养基进行培养,培养时间24 h观察细菌生长情况,进行生化鉴定和8种药敏试验。结果菌落呈白色或乳白色、圆形、湿润、不透明,进一步分离培养,经梅里埃微生物生化鉴定,确定该细菌为阴沟肠杆菌,ID:99.9%,T:0.71,ID编码:35074753311;药敏试验表明该菌对氨苄西林,头孢呋辛中等敏感;对诺氟沙星、阿米卡星、庆大霉素、头孢曲松、头孢哌酮,头孢噻肟敏感。动物实验表明该分离菌对实验小鼠具有致病性。结论该恒河猴肺部感染阴沟肠杆菌,头孢哌酮,头孢噻肟等药物可作为治疗临床用药。 李艳艳 禹文海 杨凤梅 刘权 陈丽雄 王俊斌 马进 徐鸿界 杨亚平 赵远 和占龙关键词:阴沟肠杆菌 恒河猴 药敏试验 云南三个地区野生猕猴的种群结构分析 被引量:5 2012年 通过齿式及牙齿磨损情况判断年龄及称量体重的方法,对2004年至2010年间从云南景东县、镇沅县、宁蒗县三个地区捕获的23群共670只野生猕猴进行了种群年龄组成、性别比例及体重差异的调查。结果表明:(1)景东县、镇沅县、宁蒗县三地猕猴种群雄雌性别比分别为1∶1.21、1∶1.55、1∶1.52;(2)三个地区猕猴种群年龄结构稳定,幼年组、青年组和中壮年组的个体数量占整个种群数量的80%以上,处于发展阶段;(3)三个地区猕猴种群体重到了中壮年后均出现雄性明显高于雌性(P<0.01)的性二型现象,同时,发现宁蒗县猕猴种群体重明显高于其他两个地区(P<0.01)。以上三个地区野生猕猴种群均处于较高生育高峰,呈现出发展壮大的趋势。本文为云南省猕猴资源的保护与合理开发利用提供一定的依据,同时也为了解云南省野生猕猴群体结构及生长发育规律,建立人工繁育的不同地域(种、亚种)猕猴种质特性数据库和进一步研究提供相应的基础数据支持。 赵远 王俊斌 和占龙 禹文海 鲁帅尧关键词:猕猴 年龄结构 种群 性二型 云南省猪戊型肝炎病毒全基因组扩增及进化分析 被引量:1 2015年 目的对猪戊型肝炎病毒全长基因组进行扩增,分析其进化关系,为HEV的感染性克隆研究奠定基础。方法利用巢式逆转录聚合酶链反应(RT-nPCR)和RACE技术对猪粪便中HEV样品进行全基因组扩增,利用DNAStar和MEGA4.0软件进行同源性比较和进化树分析。结果 RT-nPCR方法扩增出HEV的5段目的基因序列和RACE技术扩增出HEV的5′和3′端,序列比对结果正确,HEV全长扩增成功。同源性分析显示其与新疆株(GU119961)同源性较高(96.1%)。系统进化树显示该病毒属于基因4型h亚型猪HEV。结论 HEV全基因组序列扩增成功,为深入研究HEV奠定基础。 杨臣臣 龙飞燕 毕艳红 李云龙 王珏 禹文海 井申荣 黄芬关键词:猪戊型肝炎病毒 实验动物从业人员职业健康监护问题的探讨 被引量:1 2012年 通过分析实验动物工作中从业人员职业健康存在问题,探索和建立实验动物从业人员职业健康监护的管理制度,完善职业健康管理措施,提升实验动物质量和保障实验动物从业人员健康,有利促进了实验动物科技队伍和科技工作的管理创新和发展。 游丹 杨凤梅 李艳艳 赵远 鲁帅尧 禹文海 和占龙关键词:实验动物 健康监护 一种妊娠恒河猴戊型肝炎病毒感染模型的构建方法 本发明公开了一种妊娠恒河猴戊型肝炎病毒感染模型的构建方法,其构建的具体步骤包括:S1、将HEV细胞悬液灌胃接种妊娠恒河猴;S2、收集妊娠恒河猴粪便和血清,进行HEV RNA的检测及病毒拷贝的检测;S3、收集新生恒河猴粪便... 黄芬 郝先辉 禹文海文献传递 携带EGFP基因的戊型肝炎病毒重组质粒的构建及其感染性的验证 被引量:1 2016年 为了构建携带增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)基因的戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)重组质粒,转染人肺癌细胞A549细胞验证其感染性,PCR法分两段扩增HEV全基因组序列和EGFP基因序列,将EGFP报告基因插入到HEV ORF2基因下游,并克隆到体外转录表达载体pGEM-7Zf(+)上。然后利用脂质体转染法将重组质粒转入A549细胞,24h后在荧光显微镜下观察EGFP的表达;转染72h后,利用免疫荧光法检测HEV ORF2蛋白的表达。转染7d后将发生病变的A549细胞收集作为接种物,接种A549细胞验证携带EGFP的HEV-EGFP重组病毒的感染性。结果显示经酶切和测序鉴定携带EGFP的HEV重组表达质粒pGEM-HEV-EGFP构建成功;EGFP基因与HEV在A549细胞中可融合表达;携带EGFP的HEV重组表达质粒转染A549细胞7d后出现病变,并且连续传代3代仍具有感染性。本研究成功构建了携带EGFP的HEV全基因组重组质粒pGEM-HEV-EGFP,并成功感染A549细胞,为进一步研究HEV的复制机制及致病机理奠定基础。 李云龙 龙飞燕 杨臣臣 禹文海 毕艳红 王珏 姜典财 彭福春 井申荣 黄芬关键词:感染性 RNAi在医学实验动物研究中的应用 2009年 RNAi的发现使基因功能的研究和人类疾病的治疗有了新的途径,特别是在抗病毒、抗肿瘤研究中具有较高的应用前景,同时在心血管疾病、神经系统疾病、内分泌系统疾病等研究中也将发挥重要作用。RNAi将会是医学实验动物模型建立与研究的有力工具。 鲁帅尧 和占龙 禹文海 赵远 谭德勇关键词:RNAI 疾病 基因治疗 基于线粒体D-loop基因全序列分析贵州、四川、广西恒河猴群体遗传多样性 目的 从分子水平探讨贵州、四川、广西恒河猴群体遗传多样性,为今后开展恒河猴遗传资源的保护及合理开发利用提供借鉴和背景资料。方法 采用PCR 直接测序法测定贵州、四川、广西恒河猴38 份样品的线粒体D-loop 基因全序列... 禹文海 马进 赵远 鲁帅尧 杨凤梅 李艳艳 王俊斌 陈丽雄 徐鸿界 刘权 和占龙关键词:恒河猴 线粒体DNA 单倍型 遗传多态性 猕猴被毛氨基酸含量的初步研究 为建立实验猕猴被毛氨基酸含量的参考数据和对猕猴饲料氨基酸配比的筛选提供实验基础数据。挑选不同生活环境的猕猴共30只,笼养猴10只、半自然圈养(猴园)猴10只、野外猴10只。用氨基酸自动分析仪测定其被毛氨基酸的含量。分析结... 鲁帅尧 和占龙 禹文海 赵远关键词:氨基酸 实验动物 文献传递