王雪梅
- 作品数:66 被引量:180H指数:7
- 供职机构:安徽医科大学更多>>
- 发文基金:安徽省高校省级自然科学研究项目国家自然科学基金安徽省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生文化科学生物学更多>>
- 恶性疟原虫配子体期特异性蛋白Pfgdv1克隆表达及鉴定
- 2016年
- 目的克隆恶性疟原虫配子体期特异性基因(Plasmodium falciparum gametocyte development 1 gene,Pfgdv1),体外表达和鉴定重组Pfgdv1蛋白。方法通过PCR法从恶性疟原虫感染病人血液DNA样本中扩增Pfgdv1基因,插入到原核表达载体p ET28a(+),构建p ET28a-Pfgdv1重组表达质粒,转化至大肠埃希菌(E.coli)BL21(DE3+),通过异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷诱导表达重组蛋白,经Ni+-亲和层析柱纯化重组蛋白,纯化产物经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western blotting鉴定。结果 PCR扩增的Pfgdv1基因长度约为1.65 kb,重组p ET28a-Pfgdv1质粒构建成功,插入方向正确无框移,转化至E.coli BL21(DE3+)所表达的重组蛋白分子量约为67 k Da,且能被抗His标签单克隆抗体识别。结论成功克隆了Pfgdv1基因,表达并纯化了重组Pfgdv1蛋白,为进一步研究恶性疟原虫配子体期传播阻断疫苗奠定了基础。
- 苏胖胖孟令文李江艳陶志勇陈勇乔继琛武肖肖金赟王好鹏方强王雪梅夏惠
- 关键词:恶性疟原虫配子体传播阻断疫苗原核表达
- 猪囊尾蚴病患者IFN-γ、IL-4的免疫组织化学研究被引量:6
- 2007年
- 目的观察猪囊尾蚴病患者局部病灶的病理学特征及IFN-γ/IL-4表达情况,探讨IFN-γ/IL-4在免疫调控中的作用及意义。方法对病变组织进行苏木素伊红(HE)染色观察炎性细胞浸润情况;并用链霉菌抗生物素蛋白—过氧化酶(SP)免疫组织化学方法观察其IFN-γ/IL-4的表达水平。结果45例病变组织中35例有IFN-γ的表达,阳性表达率为77.78%,24例有IL-4的表达,阳性表达率为53.33%,阳性表达多定位于异物巨细胞、淋巴细胞和巨噬细胞的胞浆;脑型囊尾蚴病IL-4的阳性表达强度高于皮肌型。结论猪囊尾蚴感染的病变组织中有多种类型炎细胞浸润,以异物巨细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞浸润为主;炎细胞中IFN-γ表达较普遍,同时也有IL-4的表达。
- 王雪梅胡守锋孙新沈继龙夏惠方强陈兴智
- 关键词:猪囊尾蚴病IFN-ΓIL-4免疫组织化学
- 猪囊尾蚴病患者组织中IL-17和IL-23的表达及意义被引量:1
- 2014年
- 目的观察猪囊尾蚴病患者局部病灶的病理学特征及IL-17、IL-23的表达情况,探讨IL-17、IL-23在免疫调控中的作用及意义。方法对猪囊尾蚴病患者病变组织进行苏木素伊红(HE)染色观察炎性细胞浸润情况;免疫组织化学ElivisionTMplus两步法观察IL-17、IL-23的表达水平。结果 HE染色结果显示,病变组织中有多种类型炎细胞浸润,以异物巨细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞浸润为主。38例病变组织中16例有IL-17的表达,阳性表达率为42.11%,11例有IL-23的表达,阳性表达率为28.95%,阳性表达多定位于异物巨细胞、淋巴细胞和巨噬细胞的胞浆。脑型猪囊尾蚴病变组织中IL-17的阳性表达强度高于皮肌型病变组织。IL-17和IL-23在猪囊尾蚴病变组织中表达呈正相关(r=0.39588,P<0.05)。结论猪囊尾蚴感染的病变组织有不同程度的炎症改变;IL-17和IL-23参与了猪囊尾蚴感染的免疫反应,且IL-17和IL-23在猪囊尾蚴感染的免疫应答过程中有一定的相互影响。
- 王雪梅方强陶志勇焦玉萌夏惠孙新
- 关键词:猪囊尾蚴病IL-17IL-23免疫组织化学
- 案例教学法在人体寄生虫学实验教学中的应用体会被引量:11
- 2012年
- 案例教学法是以案例为基础的PBL教学方法,旨在培养学生的学习自主性及临床思维分析能力。在实际应用中,结合不同专业特点、典型案例精心编写教案,认真组织学生展开讨论,及时引导教学方向,有效地提高了教学质量。总结了近几年来PBL教学在人体寄生虫学实验教学中的经验心得,以期给PBL教学在实验教学中的应用提供借鉴。
- 焦玉萌夏惠孙新王雪梅
- 关键词:人体寄生虫学实验教学教学方法案例教学
- 国际视野下人体寄生虫学教学的思考及展望被引量:3
- 2020年
- 人体寄生虫学作为重要基础医学课程,为我国寄生虫病的诊治防控起到了重要指导作用。中国人群疾病构成变化、寄生虫病构成变化和全球寄生虫病流行态势在客观上要求对人体寄生虫学的教育教学做出改革。通过对中国高等教育发展发向、课程思政、寄生虫防治的国内与国际需要、教师发展等方面进行分析,认为贯穿国际视野是人体寄生虫学教学适应新形势的客观要求,是当今世界医学高等教育的发展趋势,也是培养具有国际岗位胜任力医学拔尖人才的必然要求。
- 陶志勇焦玉萌靳小霞常雪莲王小莉杨小迪王媛媛王雪梅陈兴智方强夏惠
- 关键词:人体寄生虫学医学教育教学改革
- 弓形虫排泄分泌抗原对Lewis肺癌小鼠瘤体生长的抑制作用被引量:1
- 2019年
- 目的探讨弓形虫排泄分泌抗原(ESA)对Lewis肺癌小鼠CD4^+CD25^+Foxp3^+T(Treg)细胞亚群的影响,观察弓形虫ESA对肿瘤生长的抑制作用。方法将C57BL/6小鼠随机分成PBS组(14只)和Lewis组(34只)。Lewis组小鼠右腋窝皮下接种Lewis肺癌细胞2×10^5个,PBS组注射等量无菌PBS。接种后第7天(D7),将PBS组小鼠分成PBS2组、PBS2+ESA组,每组7只;将Lewis组分成Lewis2组和Lewis2+ESA组,每组17只;PBS2+ESA组及Lewis2+ESA组小鼠腹腔注射100μL弓形虫ESA。ESA干预后7 d计算各组小鼠脾脏系数,检测Treg细胞数量变化,同时观察荷瘤鼠长期瘤体生长情况。结果 ESA干预后7 d,PBS2+ESA组[(0.66±0.09)%]和Lewis2+ESA组[(0.69±0.07)%]脾脏明显增大,脾脏系数与PBS2组[(0.30±0.02)%]和Lewis2组[(0.33±0.03)%]比较,差异均有统计学意义(P均<0.05)。PBS2+ESA组[(1.28±0.14)%]和Lewis2+ESA组[(1.58±0.14)%]脾脏Treg细胞占脾细胞的比例均下降,与PBS2组[(2.06±0.07)%]和Lewis2组[(2.44±0.23)%]比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。ESA干预后,瘤体生长延缓,在实验终点时,Lewis2+ESA组小鼠瘤体明显小于Lewis2组(P <0.05)。结论 ESA可下调荷瘤鼠脾脏Treg细胞占脾细胞的比例,抑制瘤体生长。
- 焦玉萌陶志勇崔裕健刘春祥夏惠王雪梅方强
- 关键词:弓形虫排泄分泌抗原CD4^+CD25^+肺癌小鼠
- 病例导入法在医学寄生虫学教学中的应用被引量:8
- 2010年
- 在医学寄生虫学教学中,采用病例导入式教学法,重点在于设计能够引导出教学内容的病例,加强病例的趣味性和吸引力,从而激发学生的学习热情,提高教学效果,并有利于培养学生应用基础理论知识于临床实践的能力。
- 王雪梅方强夏惠
- 关键词:医学寄生虫学教学模式病例导入法
- 构建间日疟原虫红内期全长cDNA文库被引量:1
- 2010年
- 采集未经治疗的间日疟患者血样,滤去白细胞后浓集含虫红细胞,提取总RNA,用SMARTcDNA文库构建试剂盒构建间日疟原虫红内期全长cDNA文库。测定cDNA文库库容,蓝白斑筛选,计算重组率。随机挑选48个菌落,用M13+/-引物进行PCR鉴定插入片段大小。构建的间日疟原虫红内期全长cDNA文库原始库容为1.14×106,重组率为97.2%,重组子插入cDNA片段大小为900~2500bp。
- 方强夏惠袁远英曹俊王雪梅齐文娟高琪
- 关键词:间日疟原虫红内期CDNA文库
- 间日疟原虫乳酸脱氢酶编码区全长基因的克隆、序列分析及线性B细胞表位预测
- 背景介绍疟原虫乳酸脱氢酶存在整个红内期,是疟疾免疫诊断重要的标靶。目前国内外已有以恶性疟原虫乳酸脱氢酶为诊断靶抗原的诊断试剂投入现场使用。间日疟原虫乳酸脱氢酶的研究较为滞后,直到2004年、2005年才先后报道了Salv...
- 方强高琪夏惠窦得虎孙艳君王雪梅孙新
- 文献传递
- 猪带绦虫六钩蚴期特异性抗原基因真核表达质粒pcDNA3.1/TSO45-4B的构建被引量:7
- 2006年
- 目的构建表达猪带绦虫六钩蚴期特异性抗原基因TSO45-4B的真核表达质粒pcDNA3.1/TSO45-4B。方法全基因合成TSO45-4B的基因序列,并利用PCR扩增该基因序列,将其插入真核表达载体pcDNA3.1,经酶切、测序鉴定。结果经酶切和测序鉴定表明所构建的重组表达质粒中含有TSO45-4B基因。结论成功构建pcDNA3.1/TSO45-4B重组质粒。
- 方强孙新夏惠徐胜贵胡守锋杨小迪陈兴智王雪梅
- 关键词:带绦虫六钩蚴重组质粒