王真
- 作品数:82 被引量:72H指数:5
- 供职机构:北京农学院动物科学技术学院更多>>
- 发文基金:北京市优秀人才培养资助国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学文化科学医药卫生自动化与计算机技术更多>>
- 动物布鲁氏菌病疫苗的来历及亚单位疫苗的研究概况被引量:13
- 2014年
- 布鲁氏菌病是一种严重危害人和动物健康的人畜共患病,人群感染主要来源于感染的动物及被污染的畜产品,目前疫苗免疫仍是控制动物布鲁氏菌病的主要措施。现有国际参考疫苗主要有牛种疫苗株S19和羊种疫苗株Rev.1,这些疫苗为动物群布鲁氏菌病控制提供重要保障的同时也存在关键的技术瓶颈问题,如安全性差,接种动物出现流产;血清抗体体内持续时间较长,干扰常规诊断等。随着布鲁氏菌基因组测序工作的相继完成及DNA重组技术的发展,新型布鲁氏菌病疫苗的开发成为研究的热点。亚单位疫苗本着其较高的安全性和有效性,在动物群布鲁氏菌病控制过程中具有较大的应用前景。笔者综述了布鲁氏菌病疫苗的发展史,并对布鲁氏菌病亚单位疫苗的研究进展进行概述。
- 王真HAN Gilsu吴清民
- 关键词:布鲁氏菌病疫苗亚单位疫苗
- 牛病毒性腹泻-黏膜病病毒噬菌体单链抗体库的构建和筛选
- 2022年
- 为筛选牛病毒性腹泻-黏膜病病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)gP48蛋白的单链抗体,本研究利用噬菌体展示技术构建了gP48蛋白单链抗体克隆文库,通过微孔筛选法对抗体库进行3轮富集淘筛,利用ELISA技术测定单链抗体的亲和力,对亲和力较高的克隆进行基因测序分析和结合活性测定,旨在获得gP48蛋白的单链抗体。结果表明:1)成功构建了库容量为4.3×10^(7)的噬菌体单链抗体库,其重组率为83.3%,经三轮筛选对噬菌体抗体库进行富集,富集倍数为1.43×10^(4);2)优化了间接ELISA方法,筛选到3株与BVDV gP48蛋白具有高亲和力的单链抗体以及其基因序列,通过IgBLAST分析显示,3株单链抗体均为鼠源IgG。综上,从gP48蛋白的单链抗体库中筛选获得3个具有高亲和力的单链抗体,可用于后续BVDV检测方法的建立。
- 孔梓安宋想胜程如楠甄思慧吴竹青吴清民王真
- 关键词:牛病毒性腹泻病毒噬菌体抗体库单链抗体
- 鼠伤寒沙门菌sapC基因缺失株的构建及生物学特性分析被引量:2
- 2022年
- 旨在研究鼠伤寒沙门菌ABC转运膜蛋白SapC在沙门菌致病机制中的功能。本研究利用λ-Red重组技术构建了鼠伤寒沙门菌sapC基因缺失突变株SMΔsapC,对其进行生长特性、酸性应激试验、多黏菌素B敏感性试验、生物被膜检测、胞内存活和小鼠体内毒力试验。结果显示,基因缺失株SMΔsapC与亲本菌株和互补菌株相比,其生长速度无明显差异;在酸应激条件下,SMΔsapC存活率显著低于亲本菌株;sapC基因缺失降低了鼠伤寒沙门菌生物被膜的形成能力;同时,SMΔsapC基因缺失株在鼠源巨噬细胞内的增殖能力和小鼠体内的毒力显著低于亲本菌株。研究表明,sapC基因影响鼠伤寒沙门菌的抗酸能力、生物被膜形成能力,从而影响沙门菌在体内外的毒力。本研究为进一步阐释鼠伤寒沙门菌的致病机制奠定了基础。
- 曹莉程如楠武周慧王家伟王瑜张永红吴清民王真
- 关键词:鼠伤寒沙门菌同源重组生物学特性
- 牛呼吸道合胞体G蛋白特异性核酸适配体及其筛选方法
- 本发明涉及一种牛呼吸道合胞体G蛋白特异性核酸适配体、其应用及其筛选方法,属于生物工程领域。本发明通过微孔板法不同轮次筛选获得多条G蛋白的核酸适配体候选物,选择测序结果出现频次较高的适配体,用I‑ELAA法测定了其与G蛋白...
- 王真曹莉王家伟鲁琳
- 某奶牛场犊牛多杀性巴氏杆菌的分离与鉴定
- 引言奶牛呼吸道疾病是一种在世界各地时有发生的地方流行性疾病。该病具有典型的季节性,常发生于冬春季节,并呈群体性发病,具有发病率高,传染性强,死亡率高的特点。在犊牛、育肥肉牛和奶牛中均可发病,以犊牛较为严重。奶牛呼吸道疾病...
- 王真沈思
- 布鲁氏菌病检测技术及检测用靶蛋白抗原筛选的概况被引量:1
- 2014年
- 布鲁氏菌病是一种重要的人畜共患病,也是引起动物繁殖障碍的主要疾病之一。近年来,我国人、畜间布鲁氏菌病呈高发态势,严重威胁畜牧业发展和人群身体健康。及时准确诊断对控制和净化布鲁氏菌病具有重要意义。本研究从病原学和血清学两方面对布鲁氏菌病的现有诊断技术进行概述,同时指出布鲁氏菌免疫原性蛋白抗原的筛选和研究,对布病的控制和净化意义重大。
- 王真鲁琳吴清民
- 关键词:布鲁氏菌病细菌学血清学分子生物学
- 农林院校动物微生物学课程教学改革新思路
- 2021年
- 动物微生物学是一门理论和实践相结合的专业基础课,传统的教学模式教学效果不太理想,本文从课程教学内容调整、教学方法和手段改革、思想政治教育等方面入手,围绕学生学习能力、实践创新能力和职业素养的全方位培养,进行课程改革与实践。
- 王真
- 关键词:动物微生物课程新体系教学新观念
- 基于核酸适配体的金黄色葡萄球菌快速检测试纸条的研制和应用
- 2023年
- 【目的】建立能快速检测金黄色葡萄球菌的胶体金免疫层析法。【方法】制备胶体金并表征,将其与核酸适配体连接后进行表征并喷涂于结合垫,以金黄色葡萄球菌多克隆抗体为检测线、核酸适配体互补序列为质控线制备试纸条,对样品垫与结合垫处理液、样品稀释液、重悬液、T线抗体浓度、适配体连接浓度等试验条件进行优化以获得最佳条件,同时检测试纸条的增敏效果,在最佳条件下对试纸条的灵敏度、特异性进行测试,制备人工污染样品用以评估试纸条在实际样品检测中的效果。【结果】胶体金粒径为20 nm左右,表征结果显示,胶体金与核酸适配体成功连接;试纸条样品垫与结合垫处理液、样品稀释液的最优条件为不同成分的SELEX缓冲液,金标适配体重悬液为HEPES重悬液,T线抗体浓度为2 mg/mL,适配体连接浓度为1μmol/L;用40 mmol/L羟胺与0.5%氯化金水溶液增敏,检测灵敏度为1×10^(4) CFU/mL,且具有良好的特异性,对于人工污染的肉样和奶样进行检测,灵敏度为1×10^(5) CFU/mL。【结论】本研究成功建立金黄色葡萄球菌试纸条检测方法,且该方法特异性良好,为进一步探讨核酸适配体在病原菌检测中的应用提供了理论依据。
- 李磊肖爽甄思慧王瑜武周慧王之文杜衡鲁琳王真
- 关键词:核酸适配体胶体金金黄色葡萄球菌
- 禽沙门氏菌病防控及其疫苗研究概述
- 禽沙门氏菌病是由沙门氏菌属中的细菌引起的禽的一种急性或慢性疾病。患病雏鸡以白痢为特征,还常常表现急性败血症状。成年鸡或呈急性经过,或呈慢性隐性感染。在某些逆境因素作用下,育成鸡也可爆发急性感染,并且死亡率较高。该病可通过...
- 王真鲁琳
- 文献传递
- 一种带有免疫标记的流产布鲁氏菌的重组菌及其应用
- 本发明公开了一种带有免疫标记的流产布鲁氏菌的重组菌。本发明提供的带有免疫标记的流产布鲁氏菌的重组菌,是将流产布鲁氏菌(Brucella abortus)中的perosamine合成酶的编码基因灭活得到的菌株。与出发菌株相...
- 吴清民牛建蕊任婕赵茜王晓夏王真张春燕李娜刘文娟杨羽刘文晓
- 文献传递