王俊灵 作品数:111 被引量:681 H指数:16 供职机构: 河北医科大学 更多>> 发文基金: 河北省自然科学基金 科技部基础研究重大项目前期研究专项 教育部科学技术研究重点项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 轻工技术与工程 农业科学 更多>>
赭曲霉毒素A对体外培养人肾小管上皮细胞凋亡的作用 被引量:2 2008年 探讨赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OA)对体外培养的人肾小管上皮细胞(HKC)凋亡的影响。体外培养HKC,给予不同浓度OA处理24h后,分别采用流式细胞定量检测术(FCM)检测细胞的凋亡率,应用免疫细胞化学染色(SP法)和免疫蛋白印迹(Western印迹)方法,观察凋亡相关蛋白caspase-3的表达以及JNK的表达水平和磷酸化水平(p-JNK)。FCM检测结果表明,经OA处理24h,HKC的凋亡率明显升高。SP法和Western印迹结果表明,OA处理组HKCcaspase-3的表达以及JNK的磷酸化水平(p-JNK)均明显高于空白对照组和溶剂对照组,但各组间细胞JNK的表达水平无明显变化。OA处理可促进体外培养的人肾小管上皮细胞发生凋亡,JNK激活以及caspase-3可能参与OA诱导HKC凋亡的过程。 崔晋峰 邢凌霄 李增宁 张祥宏 丁涛 王俊灵 严霞关键词:赭曲霉毒素A 人肾小管上皮细胞 凋亡 JNK 黄曲霉毒素G_1对体外培养HPBM增殖及TNF-α分泌的影响 被引量:1 2001年 目的 :研究黄曲霉毒素G1(AFG1)对体外培养人外周血单个核细胞 (HPBM)增殖及细胞TNF -α分泌的影响。方法 :采用流式细胞术 (FCM)和MTT比色法研究AFG1对HPBM增殖的影响。以双抗体夹心ELISA法检测AFG1对HPBMTNF -α分泌的影响。结果 :FCM检测结果显示 ,AFG1作用 6h ,10 0 0 μg/L处理组HPBM的增殖指数明显高于对照组。AFG1作用 2 4h ,2 0 0 μg/L和 10 0 0 μg/L浓度的AFG1可明显刺激HPBM增殖 ;回归分析结果表明 ,AFG1作用 6h和 2 4h ,AFG1浓度均与增殖指数呈正相关 (r分别为 0 5 12 2和 0 5 119,P均 <0 0 5 )。MTT比色法结果显示 ,2 0 0 0 μg/LAFG1处理HPBM的A值明显高于对照组。AFG1在 10 0 μg/L浓度下可显著抑制TNF -α分泌 (P <0 0 5 )。结论 :AFG1对体外培养HPBM的增殖有刺激作用 ,在 10 0 μg/L浓度下对HPBMTNF -α的分泌有一定抑制作用。 王会艳 张祥宏 严霞 王俊灵 孙旭明 杨永滨 王凤荣关键词:单核细胞 黄曲霉毒素类 肿瘤坏死因子 乳腺癌组织中骨桥蛋白和骨连接蛋白的表达及其临床病理意义 被引量:3 2006年 目的探讨乳腺癌组织中骨桥蛋白(OPN)、骨连接蛋白(ON)的表达及其临床病理意义。方法采用免疫组织化学SP法检测61例浸润性乳腺癌OPN、ON的表达,并与临床病理特征及钼靶X线征象进行对比分析。结果本组乳腺癌组织中OPN和ON的阳性高表达率分别为72.13%和77.05%,均明显高于乳腺良性肿瘤(44.83%和37.93%,P<0.05)。钼靶X线发现微钙化的钙化组乳腺癌病例中OPN、ON高表达率分别为87.50%和91.67%,明显高于无钙化组(62.16%和67.57%,P<0.05)。(P>0.05)。结论OPN、ON在乳腺癌组织中高表达,OPN、ON高表达与钼靶X线微钙化征象密切相关,但与各临床病理特征及X线片中毛刺征无相关性。 杨光 张祥宏 王晓玲 赵俊京 张志刚 严霞 王俊灵关键词:乳腺癌 骨桥蛋白 钼靶X线摄影 杂色曲霉素对体外培养HPBMcIFN-γ分泌的影响 被引量:7 2002年 目的 :探讨杂色曲霉素 (ST)对人T淋巴细胞分泌功能的影响。方法 :采用双抗体夹心ELISA方法对ST作用后人外周血单核细胞 (HPBMc)培养上清液中γ -干扰素 (IFN -γ)的分泌水平进行检测。结果 :不同浓度ST对IFN -γ分泌的影响不同 ,较低浓度ST 0 0 3 12 5mg/L - 0 12 5 0 0mg/L对IFN -γ的分泌有一定抑制作用 (P <0 0 5 ) ,而在 0 2 5mg/L以上浓度ST可刺激IFN -γ分泌 ,至 1mg/L达到高峰 (P <0 0 5 )。在 0 2 5mg/L - 1 0 0mg/L的浓度范围内 ,ST浓度和IFN -γ分泌呈正相关 (r=0 4 92 ,P <0 0 1) ;在ST 1mg/L作用 1h - 64h的时间范围内 ,ST对IFN-γ分泌的影响依时间不同作用也不同 ,在 4h - 8hIFN -γ的分泌降低 ( 8h ,P <0 0 5 ) ,而以后各组随着ST作用时间的延长IFN -γ水平逐渐增高 ,尤以 3 2h组增高最为明显 (P <0 0 5 ) ,在ST作用 16h - 64h的时间范围内 ,IFN -γ的分泌随着ST作用时间的延长而逐渐增加 ,两者呈正相关 (r=0 73 6,P <0 0 1)。结论 :ST对HPBMcIFN -γ分泌的影响表现在较低浓度和较短时间抑制IFN -γ分泌 ,而较高浓度和较长时间则诱导IFN -γ分泌 ,但继续增加ST浓度和作用时间并不继续增加IFN -γ分泌。 黄向华 张祥宏 严霞 尹桂然 李月红 谭延伟 王俊灵 王凤荣关键词:单核细胞 淋巴细胞 肿瘤病理学 黄曲霉毒素G_1对原代培养人食管鳞状上皮细胞HLA-Ⅰ分子表达影响的研究 被引量:2 2011年 目的探讨黄曲霉毒素G1(AFG1)对体外培养的人食管鳞状上皮细胞表面HLA-Ⅰ分子表达的影响。方法采用原代培养、免疫印迹(Western blot)和反转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析方法研究不同浓度AFG1(50、100、1000和2000μg/L)处理后人食管鳞状上皮细胞表面HLA-Ⅰ分子表达的变化。结果免疫印迹结果表明,经不同浓度AFG1(50、100、1000、2000μg/L)处理细胞24h后,100、1000、2000μg/L AFG1处理组HLA-ABC的蛋白表达均明显低于溶剂对照组(P<0.05),而且在100~2000μg/L浓度范围内,人食管鳞状上皮细胞表面HLA-Ⅰ分子的表达逐渐降低,两者呈明显的负相关关系(r=-0.921,n=3,P<0.01)。RT-PCR检测在mRNA水平进一步证实了AFG1对HLA-ABC表达的影响。其中100、1000、2000μg/L AFG1处理细胞后,HLA-A mRNA的表达明显低于溶剂对照组(P<0.05);2000μg/L处理组HLA-B mRNA的表达较溶剂对照组降低(P<0.05);而各AFG1处理组HLA-C mRNA的表达没有明显影响。结论 AFG1处理可以抑制人食管鳞状上皮细胞表面HLA-Ⅰ分子的表达。 李增宁 崔晋峰 张祥宏 王俊灵eIF4E在食管鳞状上皮癌变过程中的表达及意义 被引量:4 2009年 目的探讨eIF4E在食管鳞状上皮癌变过程中的表达及其意义。方法采用免疫组织化学方法,检测食管正常鳞状上皮(15例)、食管鳞状上皮内瘤变(85例)和食管鳞状细胞癌(60例)中eIF4E在蛋白水平的表达情况。结果eIF4E在正常食管鳞状上皮组织,食管鳞状上皮内瘤变组织和鳞状细胞癌组织中的阳性表达率分别为26.7%、44.7%和63.3%,eIF4E在食管鳞状细胞癌中表达明显高于食管正常鳞状上皮组织及食管鳞状上皮内瘤变组织(P<0.05);高级别食管鳞状上皮内瘤变组织中eIF4E的阳性表达率显著高于正常食管鳞状上皮组织、低级别食管鳞状上皮内瘤变组织(P<0.05);低分化鳞癌组织中eIF4E的阳性表达率明显高于高分化鳞癌组织(P<0.05)。eIF4E的表达与临床病理特征不相关(P>0.05)。结论在食管鳞状上皮癌变过程中,eIF4E的表达呈增高趋势。eIF4E在食管鳞癌中的表达随肿瘤分化程度降低而增高,提示eIF4E在食管鳞状上皮癌变和进展过程可能发挥一定的作用。 丁涛 张祥宏 李学民 严霞 邢凌霄 王俊灵 张杰英 薛丽英 赵晨燕 崔晋峰关键词:癌变 免疫组织化学 胃癌高发区居民血清胃蛋白酶原水平及异常标准的研究 被引量:48 2006年 目的探讨中国胃癌高发区健康成年居民血清胃蛋白酶原(PG)水平及年龄、性别分布规律和用于慢性萎缩性胃炎(CAG)、胃癌筛查的血清PG异常的界定标准。方法 采用时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)检测分析河北省赞皇县胃癌高发区农村自然人群606名健康成年居民血清PG水平和分布特点;对比分析720例接受胃镜检查的当地居民血清PG水平与胃黏膜病变的关系,确定适合中国胃癌高发区居民CAG和胃癌筛查的血清PG异常界定标准。结果606名健康成年居民血清PGI、PGⅡ和PGI/PGⅡ均呈偏态分布,其中位数分别为161μg/L、14.8μg/L和10.5,无明显年龄和性别差异。720例当地成年居民血清PG水平和胃黏膜病变对比分析结果表明,血清PG水平与胃黏膜病变密切相关,用于CAG和胃癌筛查的PGⅠ、PGⅠ/PGⅡ比值的最佳异常界定值分别为PGⅠ≤60μg/L、PGⅠ/PGⅡ≤6,PGⅠ与PGⅠ/PGⅡ比值串联的灵敏度明显低于并联,而特异度却明显高于并联。结论 胃癌高发区健康成年居民血清PG水平呈偏态分布。从灵敏度和特异度综合分析,PGⅠ≤60μg/L、PGⅠ/PGⅡ≤6是中国胃癌高发区居民胃癌和CAG筛查较为合适的异常界定值。 李月红 张祥宏 黄飚 王俊灵 米建民 申海涛 张志刚 严霞 邢凌霄 王士杰关键词:胃蛋白酶原 胃肿瘤 慢性萎缩性胃炎 时间分辨荧光免疫分析法 CAF方案新辅助化疗对乳腺癌组织BCSG1蛋白表达的影响 被引量:9 2005年 目的:探讨CAF联合化疗方案的新辅助化疗对乳腺癌组织BCSG1蛋白表达的影响。方法:采用免疫组化SP法分别检测34例行CAF联合方案新辅助化疗患者(新辅助化疗组)和同期110例未行新辅助化疗患者(对照组)手术切除的乳腺癌组织BCSG1蛋白的表达。同时对新辅助化疗组疗效进行病理形态学评价,并分析BCSG1蛋白表达与病理形态学变化的关系。结果:新辅助化疗组化疗总有效率为79.4%。新辅助化疗组BCSG1蛋白高表达率明显低于对照组(29.4%比64.5%,P<0.01),化疗后部分缓解(Ⅱ级)病例BCSG1蛋白高表达水平明显低于无效(Ⅲ级)病例(P=0.002)。结论:采用CAF方案新辅助化疗近期疗效明显,可抑制乳腺癌BCSG1蛋白的表达。 刘巍 张祥宏 张志刚 王晓玲 王俊灵 严霞关键词:乳腺癌 新辅助化疗 免疫组化 血清PG水平和贲门食管粘膜病变关系的对比分析 被引量:2 2005年 目的:探讨血清胃蛋白酶原(Pepsinogen,PG)检测在农村居民贲门及食管癌筛查中的可能价值。方法:采用时间分辨荧光免疫分析(Tim e resolved fluoroim m unoassay,TRFIA)法检测血清PG,结合内镜活检、病理形态学观察,对比分析慢性胃病患者血清胃蛋白酶原Ⅰ、Ⅱ水平和贲门(94例)、食管(39例)粘膜病变的关系。结果:贲门粘膜炎症、癌前病变和贲门腺癌患者血清PGⅠ、PGⅡ及其比值的中位数值无明显差异,但贲门粘膜癌前病变和贲门腺癌患者血清PGⅠ<60μg/L的检出率明显高于贲门粘膜炎症患者(23.56%和17.65%比2.33%,P<0.05)。不同贲门粘膜病变中PGⅠ/PGⅡ<6的检出率无明显差异。血清PGⅠ<60μg/L患者中贲门粘膜癌前病变和贲门腺癌所占比例达90%以上。食管炎症患者血清PGⅠ、PGⅡ及PGⅠ/PGⅡ比值的中位数均明显高于食管鳞状细胞癌患者,尤以PGⅠ的差异更为明显(187.50μg/L比116.00μg/L)。本组血清各种PG异常者中均有75%以上为食管鳞状细胞癌患者。结论:采用TRFIA确定血清胃蛋白酶原水平可在一定程度上反映贲门粘膜病变。血清PGⅠ<60μg/L可作为贲门粘膜癌前病变和贲门腺癌的重要筛查指标。血清PGⅠ的检测在食管粘膜炎症和食管鳞状细胞癌鉴别诊断中具有潜在应用价值。 张祥宏 黄飚 李月红 严霞 米建民 邢凌霄 申海涛 王俊灵 张志刚 王士杰关键词:胃蛋白酶原 食管 时间分辨荧光免疫分析 食管贲门癌FCM DNA含量与增殖指数的相关性研究 1994年 食管贲门癌FCMDNA含量与增殖指数的相关性研究原志庆,王凤荣,张祥宏,谢同欣,路灵敏,王俊灵我们对17例食管场和18例责门癌的FCMDI与PI进行了直线相关分析,旨为其在肿启研究中的合理应用提供理论依据.材料与方法一、样品来源本组全部作品为河北医学... 原志庆 王凤荣 张祥宏 谢同欣 路灵敏 王俊灵关键词:食管肿瘤 贲门肿瘤 FCM 增殖指数