梁敏
- 作品数：7 被引量：38H指数：4
- 供职机构：福建医科大学附属协和医院更多>>
- 发文基金：国家教委资助优秀年轻教师基金福建省教委科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- p53基因诱导白血病细胞凋亡的机制研究被引量：9
- 2003年
- 目的 探讨p5 3基因诱导白血病细胞凋亡过程中内源性TGF β1 、TNF α、端粒酶活性、Bcl 2表达的改变及其意义。方法 利用脂质体将温敏型p5 3基因 [pN5 3cG(Val135 ) ]导入p5 3基因缺失的白血病细胞系HL 6 0、K5 6 2细胞 ,经G4 18筛选 ,获得稳定表达P5 3蛋白的抗性克隆细胞HL 6 0pN5 3cG ,K5 6 2 pN5 3cG细胞。采用缺口末端标记法、片段化DNA分析、RT PCR、定量PCR、ELISA、PCR ELISA、流式细胞术等方法检测外源性p5 3基因诱导白血病细胞凋亡过程中TGF β1 、TNF α、bcl 2、端粒酶反转录酶 (hTERT)mRNA表达变化、细胞上清TGF β1 水平和端粒酶活性及TGF β1 、TNF α反义PS ODNS对白血病细胞凋亡和Bcl 2蛋白表达的影响。结果 ①外源性野生型p5 3基因诱导细胞凋亡过程中内源性TGF β1 和TNF αmRNA表达上调 ,bcl 2及hTERTmRNA表达下调 ,细胞培养上清TGF β1 蛋白水平明显升高 ,端粒酶活性水平下降 ;②TGF β1 、TNF α反义PS ODNS能够明显抑制野生型p5 3基因诱导细胞凋亡的发生 ,并使细胞bcl 2mRNA及蛋白表达恢复到处理前的水平。结论 p5 3基因诱导白血病细胞凋亡可通过上调内源性TGF β1 和TNF α水平 ,下调hTERTmRNA表达及端粒酶活性 ,抑制bcl 2基因表达而发挥作用。
- 陈元仲吴勇梁敏李乃农张昭秀吕联煌
- 关键词：P53基因白血病细胞凋亡
- 切割bcr/abl核酶的逆转录病毒载体构建及其对K562细胞的影响被引量：2
- 1998年
- 目的：研究ｂｃｒ／ａｂｌ融合基因在慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）中的作用以及探索ＣＭＬ基因治疗的可能性。方法：合成针对ｂｃｒ／ａｂｌ融合基因转录本ｂ３ａ２断裂点“锤头状”核酶的ｃＤＮＡ序列，定向克隆于逆转录病毒载体内，通过脂质体介导的ＤＮＡ转染法，将核酶基因导入Ｋ５６２细胞，并通过克隆分析法、流式细胞术（ＦＣＭ）、逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）、ＤＮＡ电泳及电镜观察等方法检测核酶对Ｋ５６２细胞的影响。结果：①核酶转染Ｋ５６２细胞后４８小时克隆形成抑制率达８５％；②细胞内Ｐ２１０蛋白合成受到明显抑制；③ＲＴＰＣＲ半定量检测ｂｃｒ／ａｂｌｍＲＮＡ表达水平明显下降；④核酶处理组Ｋ５６２细胞发生凋亡，表现为：在ＦＣＭ图谱上可见明显的凋亡峰；ＤＮＡ电泳分析出现典型的梯状ＤＮＡ带；电镜观察呈现凋亡早期形态学改变。结论：核酶基因通过逆转录病毒载体导入Ｋ５６２细胞后可成功表达，使Ｋ５６２细胞ｂｃｒ／ａｂｌｍＲＮＡ及Ｐ２１０蛋白表达水平下降，抑制Ｋ５６２细胞增殖，同时诱导Ｋ５６２细胞发生凋亡。
- 吴勇吴勇陈元仲梁敏胡建达吕联煌
- 关键词：核酶融合基因BCR/ABL基因治疗
- 外源性野生型p53基因对白血病细胞作用及对白血病细胞因子表达的调控
- 2000年
- 梁敏
- 关键词：白血病基因治疗
- 白血病和正常血细胞的一些细胞因子及受体表达的比较研究被引量：19
- 2002年
- 目的 :研究白血病细胞和正常血细胞的细胞因子及相应受体 (R)的表达及其意义。方法 :采用逆转录 -聚合酶链反应方法检测红白血病细胞系 (HEL、K562 )、髓系白血病细胞系 (HL - 60 )、单核细胞白血病细胞系(U937)、巨核细胞白血病细胞系 (DAMI、MEG - 0 1 )、T淋巴瘤细胞系 (HUT78)及EB病毒感染的B细胞系 (CA)和正常血细胞 (CD34+ 造血干细胞、外周血单个核细胞、成熟粒细胞、巨核细胞及血小板 )的多种细胞因子及受体的表达。结果 :①CD34+ 造血干细胞同时表达IL - 1 (α、β)、IL - 3、IL - 6、GM -CSF、G -CSF及相应受体和干细胞因子受体(SCFR)、血小板生成素受体 (MPL)基因 ,在成熟粒细胞仅表达IL - 6、IL - 6R、G -CSFR、GM -CSF ,巨核细胞、血小板仅表达IL - 3R、IL - 6、IL - 6R、MPL。而TGFβ1 、TNFα及相应受体在上述正常血细胞均有持续表达。②HEL、K562、HL -60、U937、DAMI、MEG - 0 1、HUT78及CA可同时表达至少两种以上正调控因子及相应受体 ,而负调控因子TGFβ1 、TNFα及受体在上述各细胞系均有表达。结论 :白血病细胞株细胞存在正性多自泌环节 ,白血病细胞的正。
- 陈元仲吴勇梁敏吕联煌
- 关键词：受体表达白血病细胞因子自分泌
- 急性白血病正、负自泌因子失衡与白血病细胞凋亡阻遏的关系研究
- <正>本研究采用RT-PCR方法检测IL-1α、1β、IL-3、6、G-CSF、GM-CSF、SCF、TPO、TGFβ1、TNFα、INFγ及其它们的受体基因在各种类型白血病细胞(如HL60、U937、HEL、K562、...
- 陈元仲吴勇汪玲梁敏
- 关键词：白血病白血病细胞细胞凋亡
- p53基因对HL-60细胞端粒酶活性和人端粒酶逆转录酶基因表达的影响被引量：5
- 2002年
- 为了研究野生型 p53基因转染的HL 60细胞端粒酶活性和人端粒酶逆转录酶 (hTERT)基因表达的变化 ,采用脂质体法将野生型 p53基因转染HL 60细胞 ,用TUNEL检测细胞凋亡 ,用端粒重复扩增法 (TRAP) 酶联免疫吸附试验 (ELISA)检测端粒酶活性变化 ,以及用RT PCR方法检测hTERTmRNA表达的变化。结果显示 :转染野生型p53基因的HL 60细胞在 32 .5℃培养 2 4小时和 72小时后 ,凋亡率分别为 8.3 %和 2 1 .0 % ,hTERTmRNA和端粒酶活性分别下降至对照组的 68.4%和 55 .8%及 2 7.3 %和 8.9%。结论 :p53基因能下调HL 60细胞hTERTmRNA和端粒酶活性 。
- 李乃农陈元仲梁敏吕联煌
- 关键词：P53基因端粒酶活性人端粒酶逆转录酶基因表达
- 外源性野生型p53基因对HL-60细胞的作用被引量：5
- 2001年
- 梁敏陈元仲吴勇杨旭伟吕联煌
- 关键词：急性髓系白血病野生型P53基因HL-60细胞基因突变
