林丽珠
- 作品数：17 被引量：39H指数：4
- 供职机构：复旦大学生命科学学院遗传学研究所更多>>
- 发文基金：国家攀登计划国家高技术研究发展计划上海市科学技术发展基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生化学工程更多>>
- 血管内皮抑素的基因克隆及其在大肠杆菌中的表达
- 2002年
- 血管内皮抑素不仅能特异性地抑制血管内皮生长 ,而且对血管形成和肿瘤生长也具有强烈的抑制作用 .利用PCR法从人胎肝cDNA文库中克隆了人血管内皮抑素的编码序列 ,构建了重组质粒pRSendo ,并在E .coli中表达 .SDS PAGE表明其表达产物为包涵体 .此外 。
- 林丽珠赵强周炜王光清赵寿元李昌本
- 关键词：血管内皮抑素基因克隆
- 小鼠BRI3基因的克隆及其诱导细胞死亡的作用被引量：1
- 2001年
- 为了阐明TNFa 作用的分子机制, 用抑制消减杂交(SSH)技术和反转录PCR(RT-PCR)方法, 从hTNFa 处理过的小鼠脑血管内皮细胞(bEnd.3)总RNA中扩增并克隆BRI3的cDNA, 构建了BRI3基因与绿色荧光蛋白(EGFP)基因融合的表达载体pEGFP/I3. 转染L929细胞后, 发现EGFP/I3融合蛋白位于细胞质里. 通过TUNEL法检测和流式细胞仪分析初步表明, 该融合蛋白在L929细胞中的表达能够导致细胞死亡, 而且这种细胞死亡能被L929细胞中表达的Bcl-2蛋白所抑制. 提示BRI3基因的功能可能与TNFa的细胞毒作用有一定的相关性.
- 林丽珠喻红应明耀唐炯周炜赵寿元李昌本
- 关键词：肿瘤坏死因子Α融合蛋白细胞死亡基因克隆抑制消减杂交技术
- 半合成人肿瘤坏死因子cDNA的构建及其在大肠杆菌中的高表达被引量：4
- 1991年
- 本文报道从人基因文库中分离淋巴毒素(LT)基因的同时,克隆了肿瘤坏死因子(TNF)基因,这两个基因相距1.2kb.TNF基因有4个外显子,第4外显子编码TNF成熟蛋白157个氨基酸中的140个.将第4外显子切出一部分,再人工合成编码其余氨基酸的DNA片段,两者连接构成重组的人TNF(rhTNF)cDNA,并克隆在大肠杆菌表达载体中成功地得到表达.5 l罐发酵得菌体约20g/l,以L929为靶细胞测定细胞毒活性为10~6-10~7单位/ml.高压液相色谱仪分离纯化rhTNF,冻干后得白色粉剂.测定了这种rhTNF的氨基端的10个氨基酸序列,证明与天然的人TNF完全相同.纯度约为95％.
- 李昌本柴常星谢毅吕群柴建华喻红陈春妹林丽珠王启松李宗林周娅李育阳赵寿元
- 关键词：半合成CDNA
- 全文增补中
- TNFα基因在小鼠成纤维细胞L929中的调控研究
- 2002年
- 质粒pEGFP 1是一种不含启动子序列的哺乳动物细胞表达载体 .将系列缺失的TNFα基因启动子、5′UTR(untranslatedregion)和 3′UTR插入 pEGFP 1中 ,构建了一组重组质粒 .转染L92 9细胞后 ,发现当报告基因EGFP的上游含有包括 5′UTR在内的TNFα基因启动子序列时 ,重组质粒在L92 9细胞中均能表达EGFP .但是 ,当EGFP基因 3′端同时含有TNFα基因的 3′UTR时 ,重组质粒转染L92 9细胞后 ,均不能表达EGFP .因此 ,在L92 9细胞中 ,TNFα基因的 3′UTR对基因表达具有抑制作用 .进一步研究发现 ,在L92 9细胞中 ,TNFα基因的 3′UTR对基因表达的抑制作用需要其 5′UTR的共同参与 ,而且 ,RT PCR实验表明 ,LPS在其他细胞中对TNFα表达起诱导作用的机制在L92
- 林丽珠唐炯喻红黄莉赵寿元李昌本
- 关键词：绿色荧光蛋白L929细胞成纤维细胞
- 人和小鼠神经干细胞的体外培养的分化研究被引量：5
- 2002年
- 首次克隆了小鼠神经元标志性微管蛋白 βⅢ基因 ,从核苷酸序列推导出小鼠与人两者之间在其羧基端有相同的EAQGPK六肽 ,进一步证实用抗人微管蛋白 βⅢ单抗可检测小鼠神经干细胞分化成的神经元细胞 .免疫组化鉴定显示小鼠神经干细胞在体积分数为 1%胎牛血清 (FBS)诱导下 ,可分化成神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞 .同时培养了 13周龄胎儿脑来源的人类神经干细胞 ,用特异性的抗人nestin抗体鉴定 ,全部为阳性细胞 ,但是它们经诱导分化产生较不同寻常的细胞分化结果和分化程度 ,在生长因子减半和 1%FBS诱导条件下可分化为神经元和星形胶质细胞 ,而无少突胶质细胞分化 。
- 吴益民喻红林丽珠何以丰赵寿元李昌本
- 关键词：体外分化神经干细胞
- hTNGα作用相关基因BRI3的研究Ⅰ.小鼠BRI3基因的克隆及其功能的初步研究;Ⅱ.用酵母双杂合系统筛选与人BRI3相互作用的蛋白质;Ⅲ.人BRI3相互作用蛋白BRI3BP的基因克隆和定位
- 为了阐明TNFα作用的分子机制,我们应用抑制消减杂交(SSH)技术,从小鼠脑血管内皮细胞(bEnd.3)中分离出若干个在hTNFα作用后差异表达基因的cDNA片段,首次发现,功能未知的小鼠基因BRI3与hTNFα的作用相...
- 林丽珠
- 关键词：TNFΑCDNA克隆表达谱分析染色体定位
- 文献传递
- 神经干细胞的体外培养和外源基因在其中的表达被引量：20
- 2000年
- 神经干细胞(neural stem cells, NSCs)是中枢神经系统中保持分裂和分化潜能的细胞, 在研究神经系统的发育、分化以及治疗神经系统疾病中具有重要的作用. 神经干细胞的移植已成为人们探索治疗神经系统疾病的新途径. 成功地在体外对神经干细胞进行了分离和培养, 并对其在胎鼠脑中的分布进行了鉴定. 还证明带有GFP(green fluorescence protein)报告基因的腺病毒感染神经干细胞后, 外源基因在细胞中有效表达, 这为导入相关基因治疗神经系统退行性疾病打下了基础.
- 唐炯喻红林丽珠吴昊泉赵寿元李昌本
- 关键词：神经干细胞体外培养外源基因
- 核磁共振研究人肿瘤坏死因子hTNFa的变性过程
- ＜正＞人肿瘤坏死因子TNF（Tumor Necrosis Factor）是一个由三个相同亚元组成的三聚体,其中每个亚元含有157个氨基酸,分子量为17.4KD,它是迄今为止所发现的细胞因子中具有最强攻击肿瘤细胞的因子之一...
- 戴林森林丽珠徐静斐劳霞飞吴厚铭吴泰琉王力平赵寿元
- 文献传递
- 肿瘤坏死因子α在中枢神经系统中的作用
- 1999年
- 概述了肿瘤坏死因子α（TNFα）及其受体在中枢神经系统（CNS）中的作用。TNFα在神经元和胶质细胞中的表达量与神经系统疾病的发病密切相关；TNFα与神经胶质增生、Alzheimer’s病、Parkinson病和多发性硬化症都有关系。然而；当CNS受损伤以后，TNFα能够促进神经营养因子的分泌，增强神经元的粘附和促进轴突的生长；这是它有利的一面。这种双重模式的效应与其受体亚型和激活不同的信号转导途径有关。所以，在CNS的发育中，TNFα可能是一个重要的调节因子。
- 林丽珠赵寿元李昌本
- 关键词：肿瘤坏死因子Α中枢神经系统发病信号转导
- 血管内皮细胞中表达的TNFα诱导基因的分离
- 1999年
- 使用一种快速而高效的分离差别表达基因的新方法——抑制消减杂交法，分离了在ＴＮＦα作用后血管内皮细胞中差异表达的ｃＤＮＡ，并经反向Ｎｏｒｔｈｅｒｎ 杂交试验证实．初步确认ＴＮＦα作用后诱导了血管内皮细胞内一些分子的表达。
- 周炜喻红肖靖王光清林丽珠赵寿元李昌本
- 关键词：血管内皮细胞TNFΑ抑制消减杂交诱导基因
