杨金亮
- 作品数：34 被引量：198H指数：10
- 供职机构：第三军医大学西南医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金军队科研计划项目中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- TIMP-2拮抗胃癌SGC-7901细胞侵袭能力实验研究被引量：2
- 2000年
- 目的 探讨基质金属蛋白酶抑制剂 - 2 (TIMP - 2 )对SGC - 790 1胃癌细胞体外侵袭能力的影响。方法 将人全长TIMP - 2基因经脂质包裹转染PA317细胞系 ,G418筛选 ,感染人SCG - 790 1胃癌细胞系 ,经体外细胞增殖、细胞电泳率、软琼脂形成和侵袭小室的实验综合分析其生物学行为改变。结果 经TIMP - 2基因转染的SGC - 790 1细胞和电泳率、软琼脂形成和侵袭能力均明显低于对照组 ,而与对照组相比细胞增殖曲线没有明显的变化。结论 TIMP - 2基因转染可以使肿瘤细胞的表面电荷发生变化 ,使细胞的电泳能力、细胞的移动性和侵袭穿透能力减弱 ,而与细胞和生长周期没有明显影响。提示TIMP -
- 李楠徐采朴刘为纹杨金亮
- 关键词：胃肿瘤TIMP-2SGC-7901
- 抑制端粒酶活性能增加胃癌细胞对顺铂的敏感性被引量：10
- 2001年
- 杨金亮房殿春杨仕明罗元辉鲁荣刘为纹
- 关键词：胃癌端粒酶活性药物敏感性顺铂
- 细胞同步化能显著提高逆转录病毒载体的转染效率被引量：4
- 2002年
- 杨金亮黄晋生房殿春张海荣
- 关键词：细胞培养同步化逆转录病毒载体转染效率基因治疗
- p21基因过表达对人胆管癌细胞增殖和凋亡的影响被引量：3
- 2000年
- 1材料和方法1.1材料2.1kb 的 P21全长 cDNA 片段由 Wade HarPer 教授惠赠,真核表达载体 PCLneo 和 T_4DNA 连接酶(Promega),Xho Ⅰ、Stu Ⅰ等内切酶(北方同正生物工程公司),DMEM 培养基、阳离子脂质体 DOTAP(Roche),小牛血清(华美公司),P21,P53mAb(中山公司),所用引物均由上海生物工程公司合成,
- 马宽生罗昆仑何振平杨金亮
- 关键词：胆管肿瘤细胞增殖基因表达
- 5-脱氧杂氮胞苷抑制肝癌细胞株生物学行为的机制被引量：12
- 2000年
- 目的 DNA甲基化模式的改变伴随着永生性细胞系的确立,生长调控基因CpG岛的重新甲基化可能导致了其转录的不活跃,在体外培养的情况下,使得肿瘤细胞选择了有利于生长的条件,我们用DNA甲基转移酶抑制剂5-脱氧杂氮胞苷处理两株肝癌细胞,研究其对肝癌细胞的影响,探讨DNA甲基化异常与肝细胞癌间的相关性及5-脱氧杂氮胞苷对肝癌细胞株恶性生物学行为的影响及其机制。 方法 用5-脱氧杂氮胞苷处理肝癌细胞株SMMC-7721和HePG2,然后采用相差显微镜观察药物处理前后细胞的形态变化,采用MTT法观察细胞的生长速度变化,采用流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡率、P16蛋白表达的变化,采用RT-PCR法比较p16和甲基转移酶mRNA表达量的变化,比较裸鼠致瘤性的大小。 结果 5-脱氧杂氮胞苷处理后细胞形态趋于规则,生长速度减慢,SMMC-7721细胞,G1期细胞增加了8.5％,而S期和C_2/M朗细胞分别减少了47.8％和10.4％,HePG2细胞,G_1期细胞增加了3.5％,S期减少了46.2％,G_2/M期增加了23.7％,两细胞凋亡率分别增加了91.6％和133.3％,P16蛋白表达分别增加了23.4％和20.9％,p16 mRNA表达增高,而DNA甲基转移酶mRNA表达明显降低,裸鼠皮下移植瘤生长减慢。 结论 肝细胞癌的发生与DNA甲基化异常有关,甲基化酶抑制剂5-脱氧杂氮胞苷可能通过抑制甲?
- 刘丽华肖文华杨金亮
- 关键词：5-脱氧杂氮胞苷甲基转移酶
- TIMP2基因对胃癌细胞株浸润行为的影响被引量：6
- 2000年
- 目的 研究TIMP 2基因转染胃癌细胞后的生物学行为变化。方法 采用基因转染的方法将人全长TIMP 2cDNA基因转染入人胃癌SGC 790 1细胞系中 ,利用层粘连蛋白 (LN)对肿瘤细胞的诱导迁移作用 ,在体外侵袭模型中观察转染基因细胞侵袭能力的改变。结果 转染TIMP 2基因的SGC 790 1细胞侵袭能力 [33 1± 11 3细胞 h]明显低于未转染组 [( 135 7± 2 1 6 )细胞 h ,P <0 0 1],肿瘤细胞在LN上的粘附能力受到抑制 ,转染组 ( 417 7± 2 1 5 )低于未转染组 ( 82 9 4± 45 7) (P <0 0 5 )。且细胞的增殖能力受到限制。结论 TIMP 2基因可阻抑层粘连蛋白对瘤细胞的诱导侵袭影响 。
- 李楠徐采朴刘为纹房殿春杨金亮宋波
- 关键词：胃肿瘤肿瘤转移TIMP-2基因肿瘤浸润
- 抑制端粒酶活性对胃癌细胞SGC—7901细胞周期调控基因表达的影响
- 2001年
- 杨金亮房殿春等
- 关键词：SGC-7901细胞端粒酶活性胃癌组织基因表达
- 层粘连蛋白对金属蛋白酶抑制剂-2基因转染人胃癌细胞转移相关行为影响的研究
- 2000年
- 目的 探讨层粘连蛋白对组织金属蛋白酶抑制剂 2 (Tissueinhibitorofmetalloproteinase 2 ,TIMP 2 )基因转染胃癌细胞的生物学行为变化。方法 采用基因转染的方法将人全长TIMP 2cDNA基因转染入人胃癌SGC 790 1细胞系中 ,利用层粘连蛋白对肿瘤细胞的诱导迁移作用 ,在体外侵袭模型中观察转染基因细胞侵袭能力的改变。结果 转染TIMP 2基因的SGC 790 1细胞侵袭能力 (33.1± 11.3细胞 /h)明显低于未转染组 (135 .7± 2 1.6细胞 /h ,P <0 .0 1) ,细胞的粘附能力受到抑制 ,转染组(2 36 .7± 37.3细胞 /h)低于未转染组 (6 2 6 .1± 45 .1细胞 /h)。且细胞的增殖能力未发生明显变化。结论 TIMP 2基因可阻抑层粘连蛋白对瘤细胞的诱导侵袭影响 ,参与瘤细胞转移的阻断机制。
- 李楠徐采朴刘为纹房殿春杨金亮宋波
- 关键词：胃癌细胞层粘连蛋白TIM
- 正反义人端粒酶RNA组分(hTR)基因真核表达载体的构建被引量：17
- 2000年
- 目的构建正义和反义端粒酶 RNA 组分((human telomeraseRNA components,hTR)基因真核表达载体.方法用 Mlu Ⅰ和 Sal Ⅰ从 pGRN83质粒上切下约579 bp 的hTR cDNA 片段,分别定向连入 pcl-neo 的 Mlu Ⅰ/Sal Ⅰ和Mlu Ⅰ/Xho Ⅰ酶切位点上,即构建成了 hTR 的正反义表达载体,并经酶切鉴定和测序确认.结果经酶切鉴定和测序证明,所构建的正反义 hTR 真核表达载体与设计完全一致.结论成功构建了人端粒酶 RNA 的正反义真核表达载体,为进一步研究正反义 hTR 基因转染对胃癌细胞端粒酶及生物学行为的影响奠定了基础.
- 杨金亮房殿春杨仕明罗元辉鲁荣罗昆仑刘为纹
- 关键词：端粒酶反义基因胃癌
- 反义DNA甲基转移酶1改变肝癌SMMC-7721细胞对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的敏感性及其机理的研究被引量：3
- 2003年
- 目的 观察转入反义DNA甲基转移酶 1(DNMT1)基因片段后的肝癌SMMC 772 1细胞对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (TRAIL)的敏感性改变 ,初步阐明其机理。方法 台盼蓝排斥实验检测活细胞率 ;TUNEL法检测细胞凋亡率 ;流式细胞仪检测bcl 2、bax和bad蛋白的表达。结果 转入反义DNMT1基因片段的肝癌SMMC 772 1细胞与转入正义DNMT1基因片段和空载体的细胞相比 ,活细胞率显著降低 (P <0 .0 5,P <0 .0 1) ,凋亡率显著增高 (P <0 .0 5,P <0 .0 1)。流式细胞仪结果显示 ,转入反义DNMT1基因片段的SMMC 772 1细胞 ,其bax和bad表达 ,尤其是bax的表达 ,明显高于转入正义DNMT1基因片段和空载体的细胞 ,但对bcl 2的表达无影响。结论 转入反义DNMT1基因片段的肝癌SMMC 772 1细胞对TRAIL的敏感性明显增强 。
- 李小安房殿春张宏杨金亮司佩任张汝刚杨柳芹
- 关键词：肝癌SMMC-7721细胞肿瘤坏死因子凋亡敏感性
