李荣贵
- 作品数:18 被引量:25H指数:3
- 供职机构:吉林大学白求恩医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 鸦胆子乙醇提取物对血小板源性生长因子受体介导细胞迁移的抑制作用被引量:3
- 2009年
- 目的:观察鸦胆子乙醇提取物对血小板源性生长因子受体β(PDGFRβ)介导细胞迁移的影响,阐明其起作用的有效成分。方法:用脂质体介导的细胞转染技术将人PDGFRβ表达载体转染体外培养的不表达PDGFRβ的PAE细胞,G418抗性筛选建立稳定转染的细胞株,采用RT-PCR法检测PDGFRβ的表达;用细胞损伤修复实验观察细胞损伤24 h完全修复所需的血小板源性生长因子BB(PDGFBB)最低浓度;划痕实验观察加入不同浓度鸦胆子乙醇提取物24 h后,计算细胞迁移的抑制率及鸦胆子发挥抑制作用的主要成分溶于乙醇溶液的浓度。结果:RT-PCR检测转染组细胞表达PDGFRβ;细胞损伤修复实验检测细胞损伤24 h完全修复所需的血小板源性生长因子BB(PDGFBB)最低浓度为10μg.L-1;划痕实验检测随着鸦胆子乙醇提取物(70%乙醇溶液)浓度的增加,对细胞迁移的抑制率增加(P<0.05),呈剂量效应关系;50%乙醇提取物和25%乙醇提取物(浓度≤10μg.L-1)对细胞迁移抑制不明显,鸦胆子乙醇提取物浓度>10μg.L-1主要导致细胞死亡。结论:鸦胆子抗肿瘤作用机制可能是通过抑制PDGFRβ介导的细胞迁移来实现的,其发挥作用的主要成分更易溶于70%的乙醇溶液中。
- 史艳芬李晶李玉林李荣贵
- 关键词:恶性肿瘤血小板源性生长因子受体细胞迁移
- 含人SOD_2基因启动子的荧光素酶报告基因质粒的构建和鉴定
- 2012年
- 目的:从人基因组中克隆SOD2基因的启动子并插入到荧光素酶报告基因载体中并进行基因测序鉴定。方法:以人基因组DNA为模板,用PCR的方法扩增出人SOD2基因启动子片段后,将其插入到pGL3-basic载体的荧光素酶报告基因上游,将构建的重组质粒通过双酶切片段的凝胶电泳分析和DNA测序以确定插入位置和序列的正确性。结果:双酶切反应和测序结果显示SOD2基因启动子插入的位置和序列是正确的。结论:成功克隆了SOD2基因启动子,为后续SOD2转录调控机制的研究提供重要的实验基础。
- 李新娜史艳芬仲苓芝李文雪李荣贵
- 关键词:荧光素酶启动子报告基因
- 亚砷酸钠对人内皮祖细胞血管损伤修复能力的效应及分子机制研究
- 牟妍李荣贵
- Smad蛋白在乳腺癌和正常乳腺上皮细胞中的表达及意义被引量:3
- 2009年
- 目的:检测TGFβ1、TGFβ受体Ⅱ及其下游Smad调节因子等基因在乳腺癌和正常乳腺上皮细胞中的表达,探讨TGFβ在乳腺癌发展过程中发挥作用的分子机制。方法:分离纯化人正常乳腺上皮细胞,应用RT-PCR检测乳腺癌细胞系MCF7及正常乳腺上皮细胞中TGFβ1、TGFβ受体Ⅱ、Smad4、Smad6、Smad7的表达。结果:TGFβ1、TGFβ受体Ⅱ、Smad6、Smad7与内参照GAPDH比值在正常乳腺上皮细胞中(0.721±0.214、1.001±0.312、0.689±0.12和0.221±0.124)与MCF7细胞(0.698±0.324、0.998±0.217、0.718±0.257;0.246±0.138)比较表达水平差异无显著性,Smad4在乳腺癌细胞中的表达水平(0.498±0.221)低于正常乳腺上皮细胞(1.132±0.314)(P<0.05)。结论:Smad4在乳腺癌细胞中的低表达可能与TGFβ对乳腺癌的促癌作用有关联。
- 陈志明曹红十李荣贵史艳芬孙梅李玉林
- 关键词:转化生长因子ΒSMADS聚合酶链反应
- 长春新碱对人成骨肉瘤MG63细胞的促凋亡作用及其机制被引量:2
- 2010年
- 目的:观察长春新碱对人成骨肉瘤MG63细胞促凋亡作用,探讨其引起细胞凋亡的分子机制。方法:以0、5、10、20、50、100μg.L-1不同浓度长春新碱处理的MG63细胞,分别经AnnexinV-PI双染和DCFH-DA染色后,应用流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞内活性氧化物(ROS)水平,用实时定量RT-PCR分析mRNA表达水平。结果:较低浓度(10μg.L-1)长春新碱即可使MG63细胞凋亡率升高至17.6%(P<0.05),且随着长春新碱浓度的增加细胞凋亡率增加,呈明确的剂量-效应关系;更低浓度(5μg.L-1)长春新碱即可引起细胞内ROS水平明显升高及过氧化氢酶(CAT)基因表达下调(P<0.05)。结论:长春新碱从较低浓度起即有促进细胞凋亡作用,其作用机制是通过下调CAT基因表达,导致细胞内ROS异常蓄积以促进MG63细胞凋亡。
- 王洋苏学今曲珊珊娄楠张海英史艳芬李玉林李荣贵
- 关键词:MG63长春新碱CAT
- MicroRNA-29b的研究现状被引量:1
- 2013年
- 1 miRNA简介miRNA广泛存在于自然界中,是一种大小约为22 nt的内源性非编码的单链微小RNA[1],它的成熟过程需要经历以下几个步骤[2]:首先以内源性转录本为模板进行基因转录,形成发夹状的原始pri-miRNA,接着于细胞核内经过Drosha切割,被加工成具有茎环结构的70 nt左右的前体pre-miRNA,
- 李新娜史艳芬李荣贵
- 关键词:纤维化表观遗传学甲基化
- 人前列腺癌PC3细胞亚群的分离及其生物学行为分析
- 2010年
- 目的研究人前列腺癌PC3肿瘤细胞系中是否存在具有干细胞特征的细胞亚群,并对其形态及克隆生长特征进行分析,同时探讨染料Rho123着色强度是否可用于区分不同的肿瘤细胞亚群。方法采用Rho123染色后流式细胞仪分析;Rho123与DAPI复染后荧光显微镜下形态学观察及细胞克隆生长特征分析等方法。结果PC3细胞中存在对Rho123着色显著差异的两类细胞亚群,其形态结构、增殖能力及克隆生长方式均有明显差别。结论人前列腺癌PC3细胞系中存在具有干细胞特性的细胞亚群,对Rho123拒染的特性可用于区分肿瘤干细胞与其他肿瘤细胞。
- 曲珊珊李荣贵苏学今张海英王洋李玉林
- 关键词:前列腺癌罗丹明123肿瘤干细胞
- 转移潜能不同的人前列腺癌细胞系差异膜蛋白质组学的分析被引量:2
- 2008年
- 目的:通过应用鸟枪法蛋白质组学技术发现早期诊断和逆转前列腺癌转移的分子标志。方法:应用鸟枪法蛋白质组学技术,比较人高转移前列腺癌细胞株(PC-3M)和人低转移前列腺癌细胞株(PC-3)间膜蛋白表达的差异。用SDS-PAGE胶分离膜蛋白,并且进行胰酶消化,用反相液相色谱分离肽混合物后进行ESI-MS/MS鉴定,用数据库查询结合生物信息学技术比较分析并识别细胞间的差异表达膜蛋白。结果:1)利用Gel-1DLC-MS/MS分析,在严格的过滤参数条件下鉴定了PC-3和PC-3M两种细胞中的蛋白,在PC-3细胞中鉴定了2172个蛋白,在PC-3M细胞中鉴定了2023个蛋白。2)用GOA分析软件进行分类,PC-3细胞中1499个蛋白为已知细胞组分,其中564(38.13%)个蛋白为膜蛋白或者膜相关蛋白;PC-3M细胞中1391个蛋白为已知细胞组分,细胞组分中527(38.30%)个为膜蛋白或者膜相关蛋白。几个假设蛋白和cDNA序列也被预测。3)用蛋白名称和IPI数据库号对比分析后发现有161个蛋白质仅在PC-3前列腺癌细胞株中检测到有表达,135个蛋白质仅在PC-3M中检测到有表达。结论:人高、低转移前列腺癌细胞株的膜蛋白表达存在明显差异,为进一步发现前列腺癌转移相关分子和阐明前列腺癌侵袭转移的分子机制提供实验证据。
- 李群李一雷李荣贵张丽红张慕蕊李玉林
- 关键词:鸟枪法
- 桑黄灵芝UE-1对Lewis肺癌生长及血管新生的抑制作用
- 目的观察桑黄灵芝UE-1对Lewis肺癌生长及血管新生的抑制作用。方法建立Lewis肺癌实体瘤模型,观察其抗肿瘤作用;通过免疫组织化学染色,检测肿瘤微血管密度;采用新生血管计数实验检测UE-1对肿瘤组织血管生成的影响:通...
- 张海英何旭杨旭芳何牮李荣贵
- 关键词:肿瘤生长血管新生
- 文献传递
- 亚砷酸钠对血管增殖效应的体内体外研究被引量:1
- 2010年
- 目的研究亚砷酸钠(NaAsO2)对血管的增殖效应,为地砷病的血管病变提供理论依据。方法应用鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管新生模型研究亚砷酸钠体内对血管增生影响;以人脐静脉内皮细胞(HUV-EC)作为亚砷酸钠对血管增殖的体外研究模型,经Cell Counting Kit-8(CCK-8)测定HUV-EC细胞增殖;实时定量RT-PCR检测c-myc、c-jun mR-NAs表达水平。结果 NaAsO2对CAM有双向效应,低剂量NaAsO2促进血管增生,高剂量NaAsO2抑制血管增生;在一定浓度范围内,随NaAsO2浓度升高,对HUV-EC细胞增殖的抑制呈剂量-效应关系,明显降低c-myc、c-jun mRNA水平。结论亚砷酸钠可能通过下调c-myc、c-jun基因的表达来抑制HUV-EC增殖,可能是砷中毒引起血管疾病的发生机制之一。
- 董雪史艳芬吕慧范洪学李荣贵
- 关键词:CAM亚砷酸钠增殖