李宙雪
- 作品数:8 被引量:7H指数:2
- 供职机构:南昌大学药学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江西省自然科学基金江西省主要学科学术和技术带头人培养计划更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- ox-LDL对血管内皮细胞促聚集和促黏附相关分子表达的影响被引量:4
- 2014年
- 目的观察血管内皮细胞在不同浓度的氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导及诱导不同时间后内皮细胞促聚集和促黏附活性的动态改变及可能机制。方法将人脐静脉内皮细胞(HUVEC)株接种在6孔培养板,分别加入不同浓度的ox-LDL(50、100和200 mg/L)并孵育不同时间(12、24和48 h)。放射免疫法测定细胞上清液中前列环素(PGI2)和血栓素A2(TXA2)含量;Western blot检测HUVEC中组织因子(TF)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)和血管细胞黏附分子1(VCAM-1)的表达。结果量效关系显示,ox-LDL预处理HUVEC 24 h后,ox-LDL呈浓度依赖性促进HUVEC聚集,表现为PGI2/TXA2比值显著下降(P<0.05或P<0.01);时效关系显示类似的结果,但以24 h作用最为显著;同时,TF的表达随浓度的升高呈升高趋势。此外,ox-LDL还促进HUVEC黏附,表现为ICAM-1和VCAM-1呈浓度依赖性升高。结论 ox-LDL可增强HUVEC促聚集和促黏附活性,其机制可能与其分泌的PGI2/TXA2下降及上调TF、ICAM-1和VCAM-1的表达有关。
- 钟小娟陈天伟陈元红陈芳辉李宙雪刘丽丽刘美岐黄起壬
- 关键词:氧化型低密度脂蛋白细胞间黏附分子1前列环素血栓素A2
- PPARγ基因靶向shRNA真核表达载体的构建及表达被引量:1
- 2012年
- 目的研究短发夹RNA(shorthairpin RNA,shRNA)真核表达载体在人脐静脉内皮细胞(human umbilical veinendo-thelial cell,HUVECs)中对人过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)基因表达的抑制作用。方法设计3条靶向PPARγ的shRNA,经退火成互补双链,克隆到质粒pGPU6/GFP/Neo中构建重组载体,经酶切鉴定和测序确认后,将3个重组表达载体转染到HUVECs,利用Western blot检测并筛选出抑制效果最好的重组表达载体。结果通过酶切鉴定和测序分析,靶向PPARγ的3个pGPU6/GFP/Neo-shR-NA重组载体构建成功,Western blot结果显示pGPU6/GFP/NeoshRNAPPARγ3可有效抑制高糖诱导HUVECs中PPARγ基因的表达,抑制率为63.2%。结论 PPARγ基因靶向shRNA真核表达载体构建成功,且能有效抑制HUVECs中PPARγ基因的表达。
- 高艳占日新刘丽丽陈芳辉李宙雪张盈孔滢黄起壬
- 关键词:过氧化物酶体增殖物激活受体Γ短发夹RNA真核表达载体磷脂酰肌醇3激酶
- IKKα/ β 在高糖诱导血管内皮细胞胰岛素抵抗中的作用
- 目的应用RNA干扰技术研究IKKα/β在高糖诱导血管内皮细胞胰岛素抵抗中的作用,并比较沉默IKKβ基因和沉默IKKα基因后对于改善高糖诱导血管内皮细胞胰岛素抵抗的作用差异。方法将人脐静脉内皮细胞株(HUVECs)随机分为...
- 陈芳辉李宙雪刘丽丽高艳占日新黄起壬
- 关键词:高糖内皮细胞损伤胰岛素抵抗RNAI
- 文献传递
- 吡格列酮对高糖诱导血管内皮细胞损伤的保护作用及机制
- 目的:研究吡格列酮对高糖诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的保护作用,并初步探讨其作用机制。方法:体外培养HUVECs,传至第三代,实验分为5组:正常对照组;高糖损伤组;低剂量吡格列酮组(吡格列酮1 0mmol/L...
- 刘丽丽李宙雪陈芳辉陈春香高艳占日新黄起壬
- 关键词:高糖人脐静脉内皮细胞吡格列酮
- 文献传递
- IKKα/β调控高糖诱导血管内皮胰岛素抵抗及功能失常的NF-κB非依赖途径
- 目的:探讨IKKα/β调控高糖诱导血管内皮胰岛素抵抗及功能失常的NF-κB非依赖途径。方法:将人脐静脉内皮细胞(HUVECs),均匀接种在六孔培养板上,随机分为6个组:(1)正常组:DMEM(含Glu 5.5 mmol/...
- 李宙雪黄起壬
- 关键词:高糖血管内皮细胞损伤胰岛素抵抗
- 文献传递
- IKKα/β调控高糖诱导血管内皮细胞胰岛素抵抗及功能失常的NF-κB非依赖途径
- 目的:观察高糖诱导血管内皮细胞胰岛素抵抗(IR)及功能失常时IKKa/p表达或活性变化,并探讨IKKα/β调控高糖诱导血管内皮胰岛素抵抗及功能失常的NF-κB非依赖机制。方法:将人脐静脉内皮细胞(HUVECs),均匀接种...
- 李宙雪
- 关键词:高糖血管内皮细胞损伤胰岛素抵抗
- 文献传递
- IKKα基因靶向shRNA真核表达载体的构建及表达
- 2010年
- 目的:研究短发夹RNA(shRNA)真核表达载体在人脐静脉内皮细胞(HUVECs)中对IKKα基因表达的抑制作用.方法:设计3条靶向IKKα的shRNA,经退火成互补双链,克隆到质粒pGPU6/GFP/Neo中构建重组载体,经酶切鉴定和测序确认后,将3个重组表达载体转染到HUVECs,利用Western blot检测并筛选出抑制效果最好的重组表达载体.结果:通过酶切鉴定和测序分析,靶向IKKα的3个pGPU6/GFP/Neo-shRNA重组载体构建成功,Western blot结果显示pGPU6/GFP/Neo-shRNA3可有效抑制高糖诱导HUVECs中IKKα基因的表达,抑制率为70.6%.结论:靶向IKKα基因的shRNA真核表达载体构建成功,且能有效抑制HUVECs中IKKα基因的表达.
- 刘丽丽陈芳辉李宙雪占日新高艳陈元红李丽黄起壬
- 关键词:短发夹RNARNA干扰重组表达载体
- ox-LDL诱导泡沫细胞形成中AnnexinⅡ的表达改变及意义被引量:2
- 2016年
- 目的观察AnnexinⅡ在氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导泡沫细胞形成中表达的改变及其与细胞内胆固醇酯(CE)/总胆固醇(TC)比值(CE/TC)改变的相关性,从而探讨AnnexinⅡ在ox-LDL诱导泡沫细胞形成中的意义。方法常规培养RAW264.7单核细胞株,待细胞长至90%汇合度时,分别加入不同浓度的ox-LDL(50、100、200 mg/L)孵育24 h,以未经氧化修饰的天然低密度脂蛋白(n-LDL,200 mg/L)为阴性对照,测定细胞内TC和CE含量,油红O染色鉴定泡沫细胞;比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)释出量和MTT法检测细胞存活率来观察oxLDL对细胞的毒性作用;RT-PCR和Western blot检测AnnexinⅡmRNA和蛋白的表达水平。结果不同浓度的oxLDL(50、100、200 mg/L)孵育24 h,仅200 mg/L ox-LDL组细胞活力显著降低,LDH释出量显著升高,与n-LDL(200mg/L)组比较差异具有显著性(P<0.01),50 mg/L和100 mg/L ox-LDL对细胞活力和LDH释出量无显著影响(P>0.05);CE/TC比值分别是55.0%±6.7%、61.8%±4.8%和59.6%±5.2%,与n-LDL(200 mg/L)组比较差异均具有显著性(P<0.05),其中浓度为100 mg/L的ox-LDL作用最显著;ox-LDL呈浓度依赖性抑制AnnexinⅡmRNA和蛋白的表达,AnnexinⅡmRNA和蛋白的表达改变与CE/TC比值呈负相关(r_1=-0.9374,P<0.05;r_2=-0.9548,P<0.05)。结论 ox-LDL呈浓度依赖性抑制AnnexinⅡ表达,提示其可能影响细胞内胆固醇自平衡从而诱导泡沫细胞形成。
- 温见炳龙楚彦沈小丹刘青李宙雪刘丹吴梦晴黄起壬
- 关键词:氧化型低密度脂蛋白巨噬细胞泡沫细胞