徐韫健
- 作品数:99 被引量:512H指数:13
- 供职机构:广州医科大学更多>>
- 发文基金:广州市医药卫生科技项目广东省自然科学基金广州市科技局资助项目更多>>
- 相关领域:医药卫生文化科学生物学交通运输工程更多>>
- 实验操作微视频制作在形成性评价教学中的应用与体会被引量:4
- 2022年
- 随着教学改革和研究的不断深入,临床检验实习教学与质量评价方法有了新的发展和应用。本研究为进一步适应教学发展需求增加教学方式,以检验分子诊断学专业为例,通过实验操作微视频制作与形成性评价教学相结合开展实习教学活动,初步构建检验实习教学质量评价体系和应用实施方案,从而提升教学效果与质量评价方法的有效性,让实习生在掌握操作技能的同时提高综合能力,取得了良好的效果。
- 陈源徐韫健钟美凤林锦琼
- 关键词:分子诊断学
- 产CTX-M型ESBLs大肠埃希菌传播的分子机制研究被引量:1
- 2008年
- 目的了解CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)在大肠埃希茵中的分布及传播的分子机制。方法用Kirby-Bauer(K-B)药敏法分析43株大肠埃希菌的耐药性;用多重聚合酶链式反应(PCR)扩增ESBLs、AmpC、ISEcp1B、IS903、IS26等插入序列及I类整合子;用套式PCR在I类整合子寻找β-内酰胺酶基因盒,扩增CTX-M型ESBLs全序列并测序。结果大肠埃希菌对以下抗生素的耐药率从高到低分别是:氨苄西林(97.68%)、头孢曲松(67.44%)、哌拉西林(65.12%)、头孢噻肟(62.79%)、头孢他啶(58.14%)、头孢唑啉(55.81%)、头孢吡肟(53.49%)、头孢西丁(51.16%)、环丙沙星(44.19%)、氨曲南(41.86%)、头孢哌酮/舒巴坦(20.93%)、阿米卡星(0%)、亚胺培南(0%)。亚胺培南有较好的体外抗菌活性;25株大肠埃希茵中检出CTX-M-G1,其中9株同时检出TEM、SHV、CTX-M-G1、ISEcp1B及I类整合子,ECO3、5同时检出IS903,ECO3检出IS26;在EC05中,CTX-M-G1上游是ISEcp1B。提供-35及-10位点两个启动子,一个右反向重复序列(IRR),下游是插入序列IS903组成复合转座子。结论ISEcp1B可能对下游CTX-M型ESBLs的高水平表达和传播起重要的调控作用。
- 江洁华廖伟娇易建云陈涛苏秀馨李翊泉徐韫健
- 关键词:Β内酰胺酶类大肠杆菌药物耐受性
- 多重耐药鲍曼不动杆菌的耐药分子机制及质粒谱分析被引量:6
- 2011年
- 目的了解我院临床分离的66株多重耐药鲍曼不动杆菌(MDRAB)的耐药性和整合子(qacE△1-sull)、转座子(tnpU)存在状况,并对菌株质粒谱进行分析。方法采用VITEK-2全自动细菌鉴定仪检测鲍曼不动杆菌对18种抗生素的药敏结果,并对该细菌进行总DNA的提取。用聚合酶链反应(PCR)检测qacE△1-sull及tnpU,提取质粒进行同源性分析。结果 66株鲍曼不动杆菌中整合子qacE△1-sull基因阳性率为31.8%,转座子tnpU基因阳性率为30.3%。携带遗传标记的菌株耐药率高,特别是对头孢曲松、氨苄西林、头孢替坦、头孢唑啉、呋喃妥因的耐药率已接近或达到100%,而对丁胺卡那霉素和头孢哌酮/舒巴坦的耐药率最低,分别为5%和20%;有19株对亚胺培南耐药,其中整合子阳性率63.2%,转座子阳性率36.8%。检出质粒的46株(70%)临床分离菌出现1~3条大质粒带,大小在1~20kb间,其中出现1条带的有33株、2条带8株、3条带5株,有12株菌提取到大小相同的质粒。结论多重耐药鲍曼不动杆菌耐亚胺培南的耐药现象严重;整合子、转座子遗传标记的携带率高,可能是鲍曼不动杆菌多重耐药的主要原因。
- 张东梅徐韫健李乃健李宁余琳卢鉴财张丽梅廖伟娇
- 关键词:多重耐药鲍曼不动杆菌整合子转座子
- 鲍曼不动杆菌AmpC酶和AmpC耐药基因检测分析被引量:8
- 2012年
- 目的检测临床分离的45株鲍曼不动杆菌的AmpC酶和AmpC耐药基因,并探讨产AmpC酶菌株的耐药情况。方法采用超声破碎法提取45株细菌的β-内酰胺酶粗提物,进行三维试验,提取45株细菌的总DNA,聚合酶链反应(PCR)扩增AmpC结构基因和ACT-1、CMY-G1、CMY-G2、DHA、FOX耐药基因,最低抑菌浓度药物敏感试验分析菌株的耐药性。结果 45株鲍曼不动杆菌中三维试验和PCR检测AmpC基因同时阳性的有11株,确认产AmpC酶菌株为11株。三维试验方法和PCR基因检测方法比较对AmpC酶的检出率差异无统计学意义(χ2=3.500,P>0.05)。ACT-1的检出率为4.4%,未检出FOX、DHA、CMY-G1、CMY-G2。产AmpC酶菌株的药物敏感度最高是丁胺卡那霉素(90.9%),其次是亚胺培南(54.5%),产AmpC酶菌株耐药率高,对氨苄西林、氨曲南、头孢曲松、头孢替坦、头孢唑啉、呋喃妥因、头孢他啶达到100.0%,产AmpC酶菌株对抗菌药物的耐药性显著高于不产AmpC酶菌株。结论三维试验方法和PCR基因检测方法对AmpC酶的检出率无明显差别,但仍存在假阳性与假阴性。产AmpC酶菌株耐药情况严重,提示临床应慎重用药。
- 张丽梅苏丹虹徐韫健
- 关键词:鲍曼不动杆菌AMPC酶耐药性
- 氨基糖苷类高水平耐药肠球菌的耐药及分子机制的研究被引量:10
- 2013年
- 目的分析氨基糖苷类高水平耐药(High Level Aminoglyeoside Resistant,HLAR)肠球菌的耐药性与耐药基因,并研究其耐药分子机制。方法采用VITEK-2全自动鉴定仪法测定53株氨基糖苷类高水平耐药肠球菌对11种抗菌药物的最小抑菌浓度,用聚合酶链反应(PCR)检测肠球菌转座子Tn917和Tnl546/Tn916、红霉素耐药基因ermB、毒力岛基因mefA、I类整合酶IntI1、氯霉素耐药基cat、表面蛋白基因esp,并对万古霉素耐药肠球菌(Vancomycin-resistant Enterococc,VRE)进行基因分型(vanA、vanB、vanC)。结果 53株肠球菌检出含ermB 26株,占49.0%;含mefA 9株,占17.0%;含Tnl546/Tn916 19株,占35.8%;含Tn917 11株,占20.8%;含IntI1 26株,占49.1%;含esp 15株,占28.3%;未检出cat。53株肠球菌对复方新诺明全部耐药,对红霉素耐药高达94.3%,对高水平庆大霉素、高水平链霉素、环丙沙星、四环素和氨苄西林的耐药率分别为75.5%、73.6%、75.5%、66.0%、62.3%;对利奈唑胺和替考拉宁的敏感率高达98.1%;1株耐万古霉素,其基因和表型均为VanA。结论 HLAR肠球菌可携带多种耐药基因,耐药基因与肠球菌耐药性密切相关,可能在多重耐药机制中起重要作用。
- 徐韫健梁权辉刘长连
- 关键词:肠球菌耐药基因分子机制
- 结直肠癌KRAS、BRAF及PIK3CA基因突变状态分析被引量:5
- 2016年
- 目的检测结直肠癌组织KRAS、BRAF及PIK3CA基因突变状态,分析突变与临床特征的关系。方法收集结直肠癌手术切除或穿刺活检标本177例,提取DNA经探针扩增阻滞突变系统聚合酶链反应扩增后,检测KRAS、BRAF及PIK3CA基因的突变状态,分析结直肠癌组织中3个基因间突变的内在关系,并分析KRAS突变与临床特征的关系。结果 KRAS基因突变率为37.9%,以Gly12Val突变最多,占总突变率的32.8%;BRAF基因突变率为4.0%;PIK3CA突变率为14.1%,以E542K突变最多,占总突变率的36.0%。BRAF基因突变者共7例,全部为KRAS和PIK3CA野生型的患者;PIK3CA基因突变者共25例,其中19例(76.0%)与KRAS存在共同突变。结论结直肠癌患者KRAS基因突变率较高,KRAS基因突变与淋巴结转移和肿瘤进展相关。联合检测KRAS、BRAF及PIK3CA基因对指导临床制定个体化治疗有重要意义。
- 罗妙玲徐韫健
- 关键词:结直肠癌突变KRASBRAFPIK3CA
- CTX-M-3型超广谱β-内酰胺酶的序列分析与原核表达被引量:4
- 2007年
- 目的对肺炎克雷伯菌所产CTX-M-3型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)进行基因克隆和重组表达,探讨其特性。方法以产CTX-M-3型超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌49号菌总基因组DNA为模板,PCR扩增CTX-M-3,将其克隆入pGEM-T载体后测定该核苷酸序列,再将CTX-M-3基因克隆到pBV220/DH5α系统进行重组,重组菌经42℃热诱导,SDS-PAGE电泳鉴定酶蛋白的表达。结果PCR扩增出大小为876bp的基因片段,与GenBank上同类酶的基因序列同源性为100%。大肠杆菌DH5α转化pBV220/CTX-M-3重组质粒后,ESBLs试验为阳性,药敏试验结果与原菌株相比耐药性下降。此基因能在大肠埃希菌中大量表达,SDS-PAGE电泳显示,蛋白分子质量大约为31KD。结论成功表达重组的CTX-M-3型酶,为进一步做酶动力学及酶的其他分子生物学特性研究奠定基础。
- 徐韫健廖伟娇江洁华
- 关键词:超广谱Β-内酰胺酶CTX-M-3克隆
- 果酸对金免疫层析法检测粪便潜血试验的影响被引量:3
- 2005年
- 目的探讨不同浓度的果酸对胶体金免疫层析法检测粪便潜血试验的影响。方法以蒸馏水为对照,用试带检测不同浓度的果酸。结果体外试验显示维生素C片剂、酒石酸、柠檬酸及柠檬酸钠浓度分别为:1.50、1.30、0.01及7.50g/L时与对照组相比,结果有显著性差异(P均<0.01),柠檬酸组的pH值越低,越容易出现假阳性。结论在体外,一定浓度的果酸会引起胶体金免疫层析检测粪便潜血试验的假阳性反应。
- 江洁华曾军荣廖伟娇徐韫健张东梅李云峰谭惠明郭玉玲
- 关键词:免疫层析胶体金粪便潜血试验果酸
- 精浆锌含量与精液质量关系分析被引量:5
- 2012年
- 目的分析精浆锌含量与精液质量之间的关系。方法采集79例男性不育患者和24例有生育健康男性(对照组)精液样本,采用彩色精液质量图文分析仪进行精液参数检测,采用改良巴氏染色法进行精子形态分析,采用改良PAR化学比色法测定精浆锌含量。结果少精组、弱精组精浆锌含量均低于对照组(P<0.05),精浆锌含量与精子密度呈正相关(r=0.301,P<0.05),精浆锌含量不影响精子活力及形态。结论有生育健康男性精浆锌含量高于不育患者,精浆锌含量降低可导致精子密度下降,但对精子活力和形态没有显著影响。
- 张东梅徐韫健曾丽微张丽梅谭惠明
- 关键词:锌精液
- 耐头孢西丁革兰阴性杆菌产AmpC酶情况与耐药性研究
- 2010年
- 目的:了解耐头孢西丁(FOX)革兰阴性杆菌高产AmpC酶发生率及基因型分布和耐药性。方法:对108株无重复耐FOX革兰阴性杆菌,用酶提取物三维试验检测AmpC酶;MIC法检测产酶株的药物敏感性;PCR扩增AmpC酶基因及其序列测定。结果:高产AmpC酶的发生率为25.9%;AmpC酶基因ACT、CMY-G2、FOX、CIT、CMY-G1、DHA和MOX的检出率为13.9%、12.0%、4.6%、1.9%、0.9%、0.9%和0;产AmpC酶菌株呈多重耐药,对头孢替坦和头孢唑啉全部耐药,对亚胺培南、丁胺卡那霉素和头孢哌酮/舒巴坦的敏感性较好。结论:加强耐FOX革兰阴性杆菌高产AmpC酶的监测,治疗相关菌感染以亚胺培南为首选。
- 徐韫健孙慧冰李乃健张丽梅廖伟娇张东梅谭惠明
- 关键词:AMPC酶革兰阴性杆菌耐药性