徐东平
- 作品数:271 被引量:1,107H指数:18
- 供职机构:解放军302医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金北京市自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学化学工程更多>>
- 一种利用血清痕量基因组DNA进行HLA基因分型的方法
- 一种以血清为样本,利用血清痕量基因组DNA进行HLA基因分型的方法。采用少量血清裂解提取DNA,设计特异性引物运用巢式PCR技术,经两轮巢式PCR可以成功利用PCR产物片段的大小经电泳分辨出HLA-A的三种基因型。本发明...
- 徐东平刘妍许智慧李晓东钟彦伟戴久增王琳王耀
- 乙型肝炎病毒cccDNA的临床检测研究进展被引量:12
- 2006年
- 李进徐东平张玲霞
- 关键词:乙型肝炎病毒CCCDNA
- 对PCR扩增片段克隆操作的几点体会被引量:5
- 1997年
- 徐东平施红韩凤连
- 关键词:聚合酶链反应基因片段扩增克隆
- 酵母双杂交技术筛选人白细胞cDNA文库中HCV NS4A结合蛋白及CAML基因的克隆被引量:1
- 2007年
- 目的 应用酵母双杂交技术筛选人白细胞中与丙型肝炎病毒非结构蛋白4A(HCV NS4A)相互作用的蛋白。方法 连接有HCV NS4A酵母表达的载体pGBKT7-NS4A,转化入单倍体酵母细胞AH109,与转化了人白细胞cDNA文库质粒的单倍体酵母细胞Y187进行配合,在营养缺陷型培养基和X-a-半乳糖(X-a-Gal)上进行双重筛选阳性菌落,增菌后提取质粒,转化人大肠埃希细菌(DH5α),提取质粒并测序,进行生物信息学分析。对克隆重复率较高的蛋白编码基因进行克隆和回交验证。结果 筛选出在四缺(SD/-Trp-Leu-Ade-His)培养基和在铺有X-a-gal的四缺培养基上均能生长并变成蓝色的真阳性菌落45个,其中钙离子信号调节亲环素配体(cAML)29个。对CAML基因成功克隆,回交验证了HCV NS4A与CAML的相互作用。结论 成功筛选出7种在人白细胞cDNA文库中与HCV NS4A特异性相互作用的蛋白,为进一步探讨HCV的致病机制提供了新的线索。
- 程勇前王琳成军刘妍徐东平钟彦伟曲建慧田江克戴久增李晓东
- 关键词:病毒非结构蛋白质类钙通道
- 新型中药制剂肃毒星对乙型肝炎病毒体外复制的抑制作用研究被引量:6
- 2014年
- 目的观察新型中药制剂肃毒星对野生和恩替卡韦(ETV)耐药乙型肝炎病毒(HBV)的抑制作用。方法以不同浓度(0、0.0005﹑0.001﹑0.005﹑0.01mg/ml)的肃毒星分别处理HepG2.2.15细胞(D基因型/ayw亚型野生HBV稳定复制细胞系)和HepG2.A64细胞(C基因型/adr亚型ETV耐药HBV稳定复制细胞系),作用时间4d。采用酶联免疫吸附试验检测细胞培养上清中HBsAg和HBeAg含量的变化;提取细胞内病毒核心颗粒,采用实时荧光定量PCR方法检测两种细胞内HBV DNA复制水平的变化。观察不同作用时间下,药物对HBV DNA的抑制作用。结果肃毒星对HepG2.2.15细胞和HepG2.A64细胞内HBV DNA复制和HBsAg、HBeAg的分泌均有明显抑制作用,且具有药物剂量和时间依赖性,最高浓度(0.01mg/ml)的肃毒星对HepG2.2.15细胞内病毒的抑制率达到80.83%,对HBsAg和HBeAg的抑制率分别达51.00%和64.05%;而对HepG2.A64细胞内HBV DNA抑制率为65.18%,对HBsAg和HBeAg的抑制率分别为32.85%和73.86%。随肃毒星作用时间延长,其对HepG2.2.15细胞HBV DNA的抑制效果增强,但未显示对HepG2.A64细胞内ETV耐药型HBV株病毒抑制率增强的效果。结论体外细胞培养实验中,肃毒星不仅可有效抑制野生HBV复制和抗原分泌,而且对ETV耐药HBV的复制和抗原分泌也具有很好的抑制作用。
- 姚伟明刘妍思兰兰许智慧李鹏高卜绿萍兰金初徐东平
- 传染性非典型肺炎(SARS)患者CD35基因多态性特点和表达水平与发病进程的相关性研究被引量:1
- 2004年
- 褚福亮王福生徐东平金磊
- 关键词:传染性非典型肺炎基因多态性发病进程急性感染
- 传染性非典型肺炎(SARS)患者外周血树突状细胞亚群的变化及临床意义被引量:11
- 2004年
- 目的 观察传染性非典型肺炎 (SARS)患者外周血树突状细胞 (DC)亚群的变化趋势 ,并评价其在SARS免疫发病机制中的作用。方法 利用流式细胞技术对 30例SARS重症及一般患者外周血DC1和DC2的百分比和绝对数进行跟踪观察 ,同时分析SARS患者DC细胞亚群变化的原因及其临床意义。结果 研究发现 ,SARS患者发病初期外周血DC细胞亚群数量就明显下降 ,并在随后 4~ 5周维持低水平、甚至消失 ;重症患者病程较长 ,约持续 9周以上 ,而一般患者病程约持续 6周 ;前者在发病 6周后DC亚群数量才恢复至正常值 ,而后者在发病 4周后DC亚群数量就开始回升。结论 SARS患者发病期间体内DC细胞亚群数量明显下降 ,提示DC细胞抗病毒能力降低 ;这既与SARS冠状病毒的直接攻击密切相关 。
- 张政王福生赵敏刘敬超徐东平金磊陈菊梅王敏褚福亮
- 关键词:传染性非典型肺炎外周血树突状细胞亚群冠状病毒感染
- 我国患者多重耐药乙型肝炎病毒感染的基因型和表型特点
- 刘妍许智慧刘立明白文林李晓东辛绍杰徐东平
- 文献传递
- 乙型肝炎病毒rtN238H变异与阿德福韦酯耐药的相关性研究被引量:2
- 2011年
- 目的阐明乙型肝炎病毒(HBV)多聚酶/逆转录酶区rtN238H变异对临床产生阿德福韦(ADV)耐药的影响。方法分析了1789例慢性乙型肝炎患者rtN238H变异的发生频率及其与ADV用药的关系;从典型病例患者血清中克隆获得HBV rtN238H变异株并通过回复定点突变获得对应的野生株,分别构建pTriEx-HBV1.1重组表达载体,瞬时转染HepG2细胞。给予转染细胞不同浓度ADV处理,用DNase消化游离DNA后,对上清中成熟病毒颗粒中的HBV DNA进行裂解定量以评价病毒的复制力。结果在1789例乙型肝炎患者中rtN238H变异为181例(10.1%),其中HBV B基因型感染为151例(83.4%),C基因型感染为30例(16.6%);ADV经治和未治患者分别为130例(71.8.%)和51例(28.2%),其中对ADV治疗产生临床应答(含部分应答)的占82.3%(107/130),无应答或出现病毒学反跳的占17.7%(23/130),但与野生株相比,rtN238H变异株对ADV的敏感性和病毒复制力无明显的改变。结论 rtN238H是HBV自然发生的多态性变异,对ADV敏感性和复制力无直接的影响。
- 朱华钟彦伟许智慧刘佳慧刘妍苏何玲徐东平
- 关键词:慢性乙型肝炎乙型肝炎病毒耐药性阿德福韦
- 抗HBV药物靶位的研究进展
- 目前临床上应用的抗HBV治疗药物主要有两类:干扰素和核苷(酸)类似物,前者不良反应较大,后者存在病毒耐药问题.抗HBV药物最大的问题是大多数患者在长期治疗后仍不能彻底清除病毒.因此,研发针对HBV不同靶位的新药对慢性HB...
- 徐东平姚伟明
- 关键词:抗乙肝病毒药物作用靶位药理作用
- 文献传递