张银东
- 作品数:75 被引量:768H指数:13
- 供职机构:海南大学更多>>
- 发文基金:中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家自然科学基金海南省自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 抗菌肽基因转化辣椒的研究被引量:29
- 2000年
- 以“雪峰”为转基因材料 ,建立了以子叶为外殖体 ,直接分化成苗的离体再生体系 ,其各阶段的培养基分别为 :(1 )芽分化培养基 :MS +BA 3~ 5mg/L +IAA 2mg/L ;(2 )芽伸长培养基 :MS +BA 1~ 2mg/L ;(3)生根培养基 :1 /2MS +IAA 0 .5~ 1mg/L。利用农杆菌介导的三亲交配法将抗菌肽基因CecropinB ,CecropinD导入辣椒 ,获得了再生植株 ,经PCR和Southern杂交检测 ,表明目的基因已整合到辣椒核基因组中 。
- 张银东唐跃东曾宪松
- 关键词:细菌病辣椒抗菌肽基因转基因育种抗病育种
- 香蕉后熟果皮差异蛋白分析及其基因克隆的研究被引量:2
- 2012年
- 提取乙烯诱导香蕉后熟初期的果皮总蛋白和对照果皮总蛋白,进行双向电泳实验,利用ImageMaster软件找出乙烯诱导的香蕉果皮中的差异蛋白点,并且对差异蛋白进行质谱分析,选取一个可能为Ⅲ类酸性几丁质酶(MaCHⅢ)的蛋白进行后续研究。利用MaCHⅢ的肽段信息在NCBI上比对后找到与该蛋白相应的核酸信息,设计PCR反应引物,扩增MaCHⅢ基因,得到DNA全长序列。结果表明,该基因与Ⅲ类酸性几丁质酶的同源性为99%,可以初步确定这个基因为Ⅲ类酸性几丁质酶基因。
- 李艳霞冯仁军张丽丽张银东
- 关键词:香蕉后熟差异蛋白几丁质酶基因
- 香蕉NBS-LRR类抗病基因同源序列的克隆与分析被引量:11
- 2009年
- 根据已知植物抗病基因的保守区域设计引物,从香蕉基因组DNA扩增出一条与植物抗病基因同源的序列,命名为BRGAl,该同源片段含有典型的NBS—LRR类抗病基因所拥有的保守性结构p-loop、Kinase-2a、Killase-3a和疏水结构域HD,它与部分已知NBS-LRR类抗病基因的氨基酸序列同源性为23.8%-42.7%。Northern杂交表明BRGA1在香蕉中受水杨酸调控,属诱导型表达。
- 袁克华冯仁军程萍张银东
- 关键词:抗病基因同源序列水杨酸
- 一种植物内生菌的分离方法
- 本发明涉及微生物技术领域,公开了一种植物内生菌的分离方法,包括以下步骤:(1)植物组织预处理;(2)植物组织培养;(3)内生菌的分离。本发明公开的植物内生菌的分离方法,可以有效除去表面细菌、真菌、放线菌以及其他微生物,避...
- 冯仁军卢利方云天艳张银东
- 文献传递
- 乙烯刺激对橡胶树磷素营养代谢的影响被引量:1
- 2017年
- 为分析乙烯对橡胶树磷素营养代谢的影响,以PR107、RY7-33-97、RY8-79三个品系为材料进行总固形物含量、全磷、无机总磷、B-乳清无机磷、C-乳清无机磷、核酸等生理指标与磷转运蛋白Hbpht1:1基因表达在一个乙烯刺激周期内相关性分析。结果表明:不同品系的橡胶树对乙烯敏感性不同:PR107对乙烯刺激最敏感、RY7-33-97次之、RY8-79最不敏感。每个刀次内,乙烯刺激割胶使Pi随排胶时间延长不断流失,乙烯处理组与对照组磷转运基因Hbpht1:1表达量均有不同程度上升,其中,乙烯处理组表达量显著高于乙烯不处理组。磷转运基因Hbpht1:1表达量变化与生理指标的变化有明显相关性。本研究为橡胶分子育种提供依据。
- 张浩陈洪举高乐何鹏吴炳孙张银东
- 关键词:乙烯橡胶树生理参数磷代谢
- 生命的自组织被引量:2
- 1998年
- 以耗散结构理论为基础,从生命的平衡和不平衡,生命的有序和无序以及生命的自组织等三个方面对生命的发生,发展及死亡的过程进行探讨,尤其对生命的自身防卫机制以及药物对疾病的治疗作用等从理论上进行了分析和探讨。
- 张银东彭存智
- 关键词:生命自组织
- ‘阿蒂擎天’凤梨谷胱甘肽-S-转移酶基因的克隆与乙烯诱导表达特性的初步分析被引量:6
- 2013年
- 以阿蒂擎天凤梨乙烯处理和不处理的植株为材料建立的抑制性差减杂交文库中,筛选到的一个被乙烯诱导并与已知植物谷胱甘肽-S-转移酶(GST)同源的cDNA片段,通过RACE技术得到该基因的全长cDNA序列。序列分析表明,该基因可能属于thioredoxin-likesuperfamily和GSTC_family superfamily两个超家族中的成员。利用半定量RT-PCR检测该基因的表达量在乙烯处理后先会在1h显著升高,然后随时间逐步降低,说明乙烯作为一种逆境胁迫相关激素,可在短时间内诱导凤梨中GST的表达。推测其在受到外源乙烯信号诱导后,一方面可能参与了植物体内的解毒作用,另一方面可能参与了花青素的合成调控和运输。本实验中的GST作为观赏凤梨中一个新发现的GSTs家族成员,对于研究热带花卉中GSTs家族的特点和提高其抗逆性和品质具有重要的理论意义和实用价值。
- 丛汉卿信彩云张银东李志英徐立
- 关键词:谷胱甘肽-S-转移酶乙烯
- 双价抗菌肽基因表达载体的构建被引量:2
- 1994年
- 将人工合成的抗菌肽D基因和抗菌肽B基因克隆到同一植物表达载体pBⅠ121,且各自具有其35s启动子和Nos终止子。先将抗菌肽D基因及其启动子和终止子克隆到pB121HindⅢ位点获得pECVⅠ重组子。然后将抗菌肽B基因克隆到pECVⅠ的BamHⅠ位点,经Agarosegel检测和酶切鉴定获得具有抗菌肽D,抗菌肽B基因的双价基因表达载体pECVⅡ。
- 张银东金小平曾宪松彭存智郑学勤
- 关键词:抗菌肽D基因
- 辣椒SRAP-PCR反应体系的建立与优化被引量:198
- 2004年
- SRAP标记(Sequence-related amplified polymorphism,序列相关扩增多态性)是由Li和Quiros发展了一种新的分子标记技术。SRAP标记具有简便、稳定、中等产率、在基因组中分布均匀的特点,已经应用于在水稻、棉花、油菜、马铃薯、苹果、柑橘类果树、樱桃、梅子、大蒜、莴苣及芹菜等植物和水稻稻瘟病的研究中,对开展遗传图谱构建、基因定位与克隆、比较基因组学、cDNA指纹图谱、生物多样性研究、预测杂种优势等研究是一个十分实用的工具。本研究对辣椒SRAP反应体系的程序、模板、Mg2+等参数进行优化研究,结果表明:辣椒的PCR程序为94℃预变性5min,94℃变性1min,35℃复性1min,72℃延伸1min,5循环,94℃变性1min,50℃复性1min,72℃延伸1min,35循环,最后72℃延伸10min;25滋l反应体系中,模板量为15ng,Mg2+为2.0mmol/L。本研究建立的辣椒SRAP体系重复性好、稳定性强。
- 任羽王得元张银东李颖王恒明
- 关键词:辣椒SRAP-PCR反应体系优化技术
- 玉米温敏型核雄性不育基因差异表达分析被引量:10
- 2004年
- 以玉米温敏型核雄性不育近等位基因系琼42Qms(不育)和琼42(可育)为材料,通过跟踪解剖、显微观察确定了雄穗处于小花分化期为分离纯化mRNA的最佳时期,以琼42Qms的mRNA作检测样本(Tester)、琼42的mRNA作参照样本(Driver)进行抑制消减杂交,构建差异表达消减cDNA文库。从文库中选取10个cDNA片段作探针,与琼42Qms和琼42的小花分化期雄穗总RNA进行Northern杂交,获得一个仅在琼42Qms中特异表达的差异cDNA片段。以该片段作探针与琼42Qms小花分化期、抽穗成熟期的叶片和雄穗的总RNA进行Northern杂交,结果表明,该片段只在琼42Qms小花分化期的雄穗总RNA中有杂交信号,说明该片段是与核雄性不育相关的。
- 张银东刘艳鸣冯仁军张云霞
- 关键词:玉米温敏型不育基因差异表达分析