张琦
- 作品数:13 被引量:40H指数:4
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- 神经营养素对培养的新生大鼠神经干细胞分化的影响
- 为了了解不同神经营养因子对体外培养不同时间的大鼠脑神经干细胞(NSCs,Neural stem cells)分化的影响,采用BDNF、GDNF、CNTF、NGF和PDGF,以及腺苷酸环化酶激动剂forskolin等对新生...
- 林玲郑志竑张琦胡建石林建银
- 文献传递
- BMP-2和EGF对神经干细胞向神经元分化及Notch信号分子表达的影响被引量:4
- 2006年
- 采用BMP-2(bonemorphogeneticprotein2)和EGF(epidemicgrowthfactor)诱导体外培养的神经干细胞分化,通过免疫荧光染色以及细胞计数方法,观察其分化为神经元的情况;用RTPCR和Westernblot检测Notch信号分子Notch1、PS1、RBPJk和HES1的表达水平。结果表明:BMP2组分化为神经元的比例明显高于对照(control,Ctrl)组和EGF组;EGF组分化为神经元的比例与Ctrl组相比无显著差别;与Ctrl组相比,BMP-2组和EGF组中Notch通路4种信号分子的mRNA表达量均无显著差异;PS1蛋白表达量也无明显差异。结果提示,BMP-2对神经干细胞分化为神经元的诱导作用强于EGF和自主分化,其分化为神经元的比例增加与Notch信号分子的表达水平无关。
- 张琦林玲胡建石郑志竑
- 关键词:神经干细胞神经元NOTCH信号通路BMP-2EGF
- 体外培养的神经球中表达神经巢蛋白细胞的流式细胞术检测被引量:4
- 2004年
- 采用体外培养不同时间的神经干细胞球 ,间接荧光法标记神经巢蛋白 (nestin) ,以流式细胞术检测神经干细胞球中表达nestin细胞的情况。结果显示 :在培养不同时间的细胞群体中均检出 nestin阳性细胞 ,培养 7d、1月、3月和 6月的细胞群含nestin阳性细胞数百分比分别为 (4 2 .2± 7.6) %、(4 1.7± 7.3 ) %、(3 3 .8± 12 .9) %和 (3 7.1± 5 .0 ) % ,几个时间点的细胞群体所含的 nestin阳性细胞数的百分比之间无显著性差异。提示 ,在体外培养条件下 ,神经干细胞群体可能通过自我更新和分化的调控 ,保持 nestin阳性细胞于一种较为恒定的比例。
- 林玲郑志竑胡建石张琦林建银
- 关键词:体外培养神经球神经巢蛋白流式细胞术神经干细胞
- 神经干细胞增殖分化过程中Notch通路信号分子的表达变化
- 目的 1. 从新生大鼠脑皮质分离培养神经干细胞;探讨一种新的有效离散体外培养神经干细胞球的方法。
2. 以Notch1, PS1, RBP-Jk 和 HES1作为研究对象,观察Notch通路信...
- 张琦
- 关键词:神经干细胞增殖分化NOTCH信号通路BMP-2EGF
- 文献传递
- 头颈鳞癌中RNA结合蛋白的预后价值及KHDC1L对口腔鳞癌细胞增殖、凋亡影响的研究
- 目的:头颈鳞癌为侵袭性强、异质性高的恶性肿瘤,发病率持续增加,不易早期诊断,且预后较差。RNA结合蛋白(RNA-binding proteins,RBPs)与基因表达调控密切相关,越来越多研究表明RBPs失调可导致肿瘤的...
- 张琦
- 关键词:头颈鳞癌RNA结合蛋白风险评分AKT
- 大鼠脑神经干细胞系(RNSC-FMU 1)的建立和鉴定被引量:2
- 2004年
- 采用无血清培养液分离和培养新生SD 大鼠脑的神经干细胞,以机械分散的方法传代,成功地建立了大鼠脑神经干细胞系(RSNC-FMU 1)。该细胞系可在体外长期传代,至今已在体外连续生长超过21个月(>100代),保持了神经干细胞的特性和正常的核型,经诱导可分化成为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞,具有较旺盛的自新能力,倍增时间约为20h,并可冷冻保存,裸鼠体内移植证实其不具有成瘤性。该细胞系为神经干细胞研究提供了一个良好的工具。
- 郑志竑胡建石林玲游晓青张琦林建银
- 关键词:核型分化
- 体外培养的神经干细胞球几种离散方法的探讨被引量:9
- 2004年
- 目的探讨一种新的有效离散体外培养的神经干细胞球的方法.方法采用单纯玻璃吸管机械分散,胰蛋白酶消化,不锈钢滤网研磨,单纯滤网吸管分散和滤网吸管结合短时间胰酶消化等五种方法离散神经干细胞球,比较其各自的离散效果和离散后细胞存活情况.结果单纯玻璃吸管吹打不能完全离散神经球;胰蛋白酶消化在30min内不能完全离散神经球,延长酶消化时间虽可离散细胞,但细胞难以存活;不锈钢滤网研磨或单纯滤网吸管吹打离散对细胞损伤大,存活率低(分别为64.1%和71.9%);滤网吸管结合短时间(3~5min)胰酶消化离散细胞效果好,存活率(92.1%)显著高于上述其它方法(P<0.05).结论滤网吸管结合短时间胰酶消化法离散神经干细胞球,离散效果好,细胞存活率高,是一种新的有效离散体外培养的神经干细胞球的好方法.
- 张琦胡建石林玲郑志竑
- 关键词:神经干细胞酶消化神经球胰酶胰蛋白酶细胞存活
- 不同配方的神经营养因子对神经干细胞存活和增殖能力的影响被引量:12
- 2004年
- 目的:探讨由营养因子碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、表皮生长因子(EGF)及N2添加剂所组成的配方中最适合神经干细胞存活和增殖的组合。方法:分离培养大鼠脑神经干细胞,免疫荧光细胞染色加以鉴定,采用不同组合配方的培养液培养细胞,通过计数神经干细胞球数,判定其对神经干细胞存活和增殖的影响。结果:在bFGF,EGF和N2组成的8种不同配方培养液中,bFGF组是神经干细胞存活和增殖的最适配方,是8周中与对照组比较所有P<0.05的惟一配方;EGF具有促进神经干细胞分化的作用,而促增殖能力不如bFGF;相比之下,N2对神经干细胞增殖的影响最弱。结论:bFGF对神经干细胞增殖及较长期存活具有重要的作用,其作用较EGF和N2强,EGF还具有促神经干细胞分化的作用。
- 游晓青张琦林玲胡建石姜芬郑志竑
- 关键词:神经营养因子神经干细胞细胞分化细胞增殖
- Notch信号通路与神经干细胞的增殖分化被引量:6
- 2004年
- Notch信号通路是调节细胞增殖分化的一条古老的途径,传统观点认为它是通过“旁侧抑制”发挥作用的,近来许多研究表明,Notch系统也有激活和指导细胞分化的作用。神经干细胞是一种有自新能力的多能干细胞,是神经元和神经胶质细胞的共同前体细胞,对于它的研究是一个全新的领域。这一老一新的结合可使我们从一个不同以往的角度看待一些神经系统疾病,如Alzheimer's病等疾病的发病机制和治疗方案。
- 张琦郑志竑
- 关键词:NOTCH信号通路神经干细胞增殖分化
- 神经干细胞增殖分化过程中Notch通路信号分子的表达被引量:8
- 2005年
- 探讨Notch通路信号分子在神经干细胞增殖分化中的表达变化。以Notch1,PS1,RBPJk和HES1为研究对象,用RTPCR、Westernblot法检测其在神经干细胞增殖分化中的表达。RTPCR结果表明:PS1和RBPJkmRNA表达量在神经干细胞分化第2d明显降低,而在分化其它阶段无显著差异;Notch1和HES1mRNA表达量在神经干细胞各分化阶段无明显差异。Westernblot结果显示:PS1蛋白表达量在神经干细胞分化第2d降低,其它阶段无明显差异。Notch信号通路对于维持体外培养的神经干细胞增殖有重要的作用。
- 张琦林玲胡建石郑志竑
- 关键词:神经干细胞增殖分化NOTCH信号通路信号分子