张文炳 作品数:87 被引量:311 H指数:8 供职机构: 南方医科大学公共卫生与热带医学学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省科技攻关计划 广州市科技攻关项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 更多>>
登革病毒2型全长cDNA感染性转录体的构建和鉴定 被引量:1 2009年 为构建登革病毒感染性克隆,针对登革病毒2型基因组全长cDNA的体外转录方法及感染性转录体进行研究。采用长链RT-PCR技术,扩增DEN2NGC株全长基因组cDNA,以之为模板,用SP6RNA聚合酶系统制备体外转录RNA转录体,分别经乳鼠脑内接种及电穿孔转染BHK-21细胞,观察其感染效应。并从受染鼠脑和病变细胞中提取总RNA,进行RT-PCR扩增、克隆测序以及电镜观察。结果发现,从感染鼠脑和细胞中经RT-PCR均可扩增出病毒特异的基因片段,大小与预期一致;并从乳鼠脑组织和BHK-21细胞中观察到恢复病毒颗粒。上述结果表明本文成功构建的DEN2 NGC株病毒全长cDNA的体外转录体具有感染性,乳鼠脑内接种途径与电穿孔转染细胞一样可成为体外转录体感染宿主细胞、获得恢复病毒的方法。 贡树基 赵卫 张文炳 周浩 陈丽丹 张复春 严子锵 曹虹关键词:登革2型病毒 全长CDNA 血液中人巨细胞病毒DNA的检出与分析 1993年 本文采用聚合酶链反应(PCR)对临床不同人群血液标本中人巨细胞病毒DNA进行检测并分析其检出意义.129份献血员血液标本CMV-DNA阳性率为79.8%;78份临床血沉标本CMV-DNA检出阳性率为83.3%;12例烧伤患者经输血治疗后CMV-DNA阳性率达100%.本文还同时对HCMV-IgG与HCMV-DNA存在的关系、血沉值与HCMV-DNA检出的关系以及烧伤患者CMV-DNA携带状态作了一些有益的探讨. 孟潞英 张文炳 彭华国 周宗海关键词:人巨细胞病毒 聚合酶链反应 血液 聚合酶链反应检测患儿尿标本中的巨细胞病毒DNA 被引量:5 1991年 本文建立了聚合酶链反应(PCR)检测人巨细胞病毒(HCMV)方法,探讨了该方法的某些实验条件。用PCR检测24例临床患儿尿标本。证明PCR方法特异、敏感、简便而快速。同科不同属病毒如HSV、EBV等以及人源正常细胞均无假阳性结果:最小检出量可达0.1fg DNA,相当于6个基因拷贝;用水浴箱手控时间即可进行PCR循环,30次循环仅需97min30s;PCR和DNA杂交检测尿标本中HCMV阳性例数分别为20和14例。该结果证明HCMV感染儿童的广泛性和严重性,初步表明儿童肾病综合症与HCMV有关。 孟潞英 张文炳 彭华国 董自正 石成华 常汝虚 刘琦关键词:HCMV PCR DNA 微板核酸杂交-ELISA方法对肝炎病人血清中HBV DNA的定量检测与分析 被引量:26 1999年 目的采用微板核酸杂交-ELISA技术测定肝炎病人血清中HBVDNA含量。方法用PCR法将病人血清标本扩增后,与两条特异性探针夹心杂交,然后通过酶联显色对69例不同临床表现的肝炎患者血清中HBVDNA进行定量检测。结果20例急性重型肝炎血清中的DNA含量超过2μg/L,88.24%的急性轻型肝炎患者和54.55%轻度慢性肝炎患者血清中的HBVDNA含量少于2μg/L,66.67%中度慢性肝炎患者血清HBVDNA含量在2-1000μg/L的范围,75%重度慢性肝炎和45%急性重型肝炎血清中的HBVDNA含量超过1000μg/L。结论做饭核酸杂交-ELISA检测方法能准确、快速进行核酸定量测定,特异性强,灵敏度高,稳定可靠,易自动化,对于研究病毒感染量与临床病程的关系具有较大的现实意义。 王虹 王省良 万成松 彭华国 张文炳关键词:微板核酸杂交 ELISA 血清诊断 HBV-DNA 套式RT-PCR方法检测SARS冠状病毒 被引量:1 2003年 赵卫 晏辉钧 张文炳 方丹云 周经姣 胡族琼 龙北国 江丽芳关键词:SARS 冠状病毒 提高医学微生物学实验课教学质量培养学生综合素质 被引量:10 2007年 要成为一名合格的医学生,必须具有扎实的理论功底和熟练规范的操作技能。微生物学作为一门重要的医学基础课程,是连接基础与临床的桥梁。合理高效地安排微生物实验课,有利于培养学生独立思考解决问题及动手能力。 赵卫 张玲 朱利 张文炳 龙北国关键词:医学微生物学 实验教学 教学质量 腺病毒载体在生物治疗中的应用 被引量:3 1999年 腺病毒载体是目前重要的基因转移载体之一。腺病毒可作为真核基因表达载体,可制成灭活、重组或抗癌疫苗用于预防呼吸道疾病、癌症和肝炎等传染病。在癌症的基因治疗方面,Ad 载体可运载肿瘤抑制基因,自身基因编码蛋白能诱导细胞调亡,可作为前药物感染细胞,还能利用Ad 的一些特殊复制子。 万成松 张文炳 曹虹关键词:腺病毒载体 生物治疗 应用噬菌体随机肽库技术筛选幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白的抗原表位 2008年 目的筛选和鉴定幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)中性粒细胞激活蛋白(neutro-phil-activating protein,NAP)的有效抗原表位,为坳疫苗的研制提供基础。方法以抗NAP的单克隆抗体作为固相筛选分子,经3轮吸附.洗脱.扩增免疫,筛选噬菌体随机7肽库,随机挑选噬菌体克隆,经噬菌体酶联免疫吸附试验(ELISA)、交叉反应试验及竞争抑制试验鉴定阳性克隆,测定阳性克隆所携带DNA序列并进行计算机辅助分析。以制备的阳性噬菌体克隆短肽液免疫小鼠,免疫血清与NAP经Western blot分析,以验证NAP的模拟表位。结果经3轮免疫筛选后挑选到45个阳性克隆,经ELISA鉴定有12个阳性克隆,测序结果显示5种表位,其中P17噬菌体展示肽FAHLATQ与NAP氨基酸序列(137-143)高度同源,位于NAP高抗原区域(118-140),免疫血清可识别NAP。结论用噬菌体随机7肽库成功筛选到了NAP的模拟表位,为基于NAP的诊断和疫苗的研制提供了基础。 罗军 李妍 赖建平 龙敏 张文炳 龙北国关键词:幽门螺杆菌 中性粒细胞激活蛋白 表位 噬菌体肽库 洁优日常护理洗液的杀菌效果实验研究 被引量:1 2006年 目的:研究洁优日常护理洗液的杀菌效果。方法:采用悬液定量杀菌试验法、定性抑菌试验法检测。结果:悬液定量杀菌试验结果表明该护理液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌作用3 m in,杀灭率均为100%;对白色念珠菌的杀灭率,作用3 m in可达84.5%、作用10 m in可达89.82%、作用15 m in可达95.31%、作用20 m in可达98.65%。定性抑菌试验结果表明该护理洗液能完全抑制金黄色葡萄球菌生长,作用大肠杆菌抑菌圈直径为54 mm、作用白色念珠菌抑菌圈直径为35 mm,抑菌效力按抑菌圈直径大小排列分别为金黄色葡萄球菌>大肠杆菌>白色念珠菌。结论:该样品对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌杀灭率达98%以上,杀菌效力较强。 罗军 龙北国 龙敏 赖建平 胡平 张文炳 万成松关键词:杀菌 消毒 广东地区SARS-COV细胞培养模型的建立和初步应用 被引量:1 2005年 目的 :建立中国广东地区SARS-CoV细胞培养模型。方法 :通过将SARS -CoV广东地区分离株GD32 2在VeroE6细胞中连续传代 ,检测TCID5 0 ,获得稳定的细胞模型。利用此细胞培养模型 ,对不同温度、紫外线等条件下SARS -CoV的存活时间进行了比较。对重组人复合干扰素α抗病毒效果进行了筛查。结果与结论 :SARS -CoV对外界环境抵抗力比普通冠状病毒强 ,对重组人复合干扰素α有较高的敏感性 ,抑制指数达 4 .9。 赵卫 方丹云 周经姣 张文炳 晏辉钧 胡族琼 龙北国 江丽芳关键词:SARS冠状病毒 细胞模型 温度 干扰素