张志云
- 作品数：49 被引量：75H指数：5
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- 一种重组杆状病毒
- 本发明提供了一种重组杆状病毒，该重组病毒为核苷酸序列为SEQ ID No1.的基因通过转座重组整合到杆状病毒AcMNPV基因组上获得。本发明进一步提供了其构建方法，包括分别从AcMNPV和pEGFP‑N1载体中获得iap...
- 付月君曹蕾菥梁爱华杜军李新锋张志云王伟柴宝峰申泉
- 八肋游仆虫Rab蛋白基因的克隆及在大肠杆菌中的表达
- ＜正＞ Rab蛋白是一种单体形式的GTP结合蛋白,大约由200个氨基酸组成,具有保守的G结构域和高度可变的N端和C端。Rab蛋白作为真核细胞中各细胞器之间囊泡运输的分子开关,分布遍及细胞内各类细胞器及运输囊泡,它与上游调...
- 王伟樊俊蝶智慧张志云柴宝峰梁爱华
- 关键词：八肋游仆虫RAB蛋白克隆
- 文献传递
- 重组人凝血因子IX小基因及其PTC突变体稳定细胞株
- 本发明公开了一种含重组人凝血因子IX(F9)小基因和一种含重组人F9小基因PTC(premature termination codon，PTC)无义突变体的稳定细胞株的建立方法以及依照该方法建立的含重组人F9小基因和其...
- 柴宝峰王刚梁爱华王伟申泉付月君张志云
- 文献传递
- The mRNA export factor human Gle1 interacts with the polypeptide release factors
- <正>Messenger RNA(mRNA) export and translation are required during gene expression,however,specific links betwe...
- 刘欢欢张志云梁爱华
- 文献传递
- 过表达EoRPL11下调HEK293T细胞中蛋白质的翻译活性(英文)被引量：3
- 2010年
- 核糖体蛋白L11(RPL11)是真核生物核糖体的重要组成部分.RPL11参与核糖体的生物发生及其它的一些细胞调控过程.本研究在人细胞中研究了游仆虫RPL11(EoRPL11)的亚细胞定位及对蛋白质合成的调控功能.通过激光共聚焦显微镜观察发现,融合绿色荧光蛋白的EoRPL11分布于细胞核中,并集中于核仁上;将EoRPL11和海肾荧光素酶报告基因共转染HEK293T细胞后发现,细胞内海肾荧光素酶的酶活性明显下降,并呈现一种剂量依赖性关系;实时定量PCR分析则表明,海肾荧光素酶的mRNA水平并没有明显改变;同时,细胞的增殖也受到了一定的抑制.以上结果表明,EoRPL11是核蛋白,并且其过表达可能在翻译水平上抑制细胞内总蛋白质的合成.
- 张国强张志云柴宝峰王伟梁爱华
- 关键词：八肋游仆虫下调C-MYC
- mRNA输出因子Gle1在蛋白质翻译中的作用
- Gle1蛋白自从1996年被发现以来,一直作为核输出因子研究.最近有研究报道Gle1蛋白参与了酿酒酵母的蛋白质翻译起始和终止.然而,Gle1蛋白的这种功能是否在其他生物中具有普遍性?
- 刘欢欢张志云梁爱华
- 关键词：肽链释放因子
- 一种高耐热性植酸酶酵母工程菌及其构建方法
- 本发明通过生物信息学方法对已报道的植酸酶AppA基因进行分析，找出潜在的热稳定相关位点，利用定点突变技术对该基因的关键位点进行定点突变，获得突变基因Appa-M<Sub>2</Sub>,将突变基因构建到酵母穿梭载体pPI...
- 梁爱华姚明泽王伟柴宝峰付月君张志云申泉
- 文献传递
- 八肋游仆虫酸性核糖体磷酸化蛋白P1有2个亚型被引量：3
- 2015年
- 真核生物酸性核糖体磷酸化蛋白(P0、P1、P2)位于核糖体60S大亚基上,它们在核糖体上共同组成一个向外侧凸出的五聚体的柄状复合物[P0·(P1·P2)2],该复合物在蛋白质合成延伸过程中起着重要作用.为了探讨单细胞真核生物核糖体柄状复合物的组成形式及在蛋白质合成中的作用,对八肋游仆虫(Euplotes octocarinatus)的P1进行了研究.通过生物信息学方法,分析八肋游仆虫基因组及转录组数据,找到2个酸性核糖体蛋白P1基因,从DNA和c DNA中都扩增到这2个P1基因,表明八肋游仆虫酸性核糖体磷酸化蛋白P1确实存在2个亚型.将2个基因克隆后分别构建重组表达质粒p ET28a-P1A和p GEX-6P-1-P1B,在大肠杆菌BL21中获得高效表达.经镍柱和GST柱亲和层析后,获得较高纯度的八肋游仆虫酸性核糖体蛋白Eo P1A和Eo P1B,表达产物经Western印迹检测为阳性.Pull-down分析了Eo P1A和Eo P1B之间的相互作用.结果表明,游仆虫酸性核糖体磷酸化蛋白P1的2个亚型Eo P1A和Eo P1B之间存在相互作用.
- 佘梅王软林张志云梁爱华
- 关键词：八肋游仆虫基因克隆表达纯化
- 核糖体蛋白L11与肿瘤抑制被引量：2
- 2009年
- 核糖体蛋白L11(ribosomal proteinL11,RPL11)是核糖体60S大亚基的重要组成部分,对于核糖体的组装和合成是必须的。除此之外,研究发现真核生物中的RPL11还参与细胞周期阻滞、细胞凋亡及肿瘤发生等过程的调控。与抑癌蛋白ARF功能相类似,它能够与癌蛋白HDM2相互作用,激活p53抑癌蛋白的活性;与癌蛋白c-Myc相互作用,负反馈调控c-Myc的转录活性。推测RPL11本身可能具有肿瘤抑制功能。本文就RPL11参与调控HDM2-p53和c-Myc这两个与肿瘤密切相关的信号通路的研究进展进行综述。
- 张国强张志云梁爱华
- 关键词：核糖体蛋白L11P53负反馈调节肿瘤抑制
- Intein介导的重组昆虫毒素BmKIT在大肠杆菌中的可溶性表达、纯化及活性分析被引量：4
- 2007年
- 为获得重组蝎昆虫毒素BmKIT,通过PCR方法在BmKIT基因的3′端融合了编码6个组氨酸残基的核苷酸序列,将其插入原核表达载体pTWIN1的内含肽Ssp DnaB Intein基因下游的多克隆位点(MCS)。将获得的表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)中,用IPTG诱导融合蛋白表达。用Ni-NTA亲和层析柱从菌体裂解液中纯化了CBD-Intein-BmK IThis6融合蛋白,并在柱上诱导Intein自剪切,成功去除融合子CBD-Intein。通过Superdex75凝胶过滤层析获得了纯度达95%以上的BmK IThis6蛋白,该蛋白不仅具有正确的二级结构而且有生物活性。
- 许成钢范晓军张志云付月君梁爱华
- 关键词：原核表达
