张学清 作品数:55 被引量:111 H指数:6 供职机构: 军事医学科学院放射与辐射医学研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 军队医药卫生科研基金 军队“十一五”科技攻关课题 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 核科学技术 环境科学与工程 更多>>
18.8MeV质子与60Co-γ射线诱发人淋巴细胞染色体畸变比较研究 目的质子和Coγ射线照射离体人血建立染色体畸变的剂量-效应曲线;比较质子与Coγ射线照射诱发染色体畸变的相对生物效应。方法质子和Coγ射线照射离体人血,吸收剂量率为0.5Gy/min,吸收剂量为0.5-5.0 Gy。记录... 杜杰 陈英 闫学昆 张学清关键词:质子 染色体畸变 文献传递 功能未知基因LOC410296的表达载体构建及小鼠抗血清制备 被引量:2 2014年 目的为深入研究功能未知基因LOC401296,首先获取其全长序列,实现LOC401296分子的真核和原核表达,并制备针对LOC401296蛋白的抗血清。方法采用PCR方法克隆LOC401296编码区全长序列,利用pET28B和pCMV-Myc质粒构建LOC401296原核表达和真核表达载体,用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导目的蛋白原核表达,目的蛋白经纯化、复性后免疫小鼠制备抗血清。结果 PCR克隆得到LOC401296编码区全长序列,成功构建LOC401296原核及真核表达载体,IPTG诱导目的蛋白在大肠杆菌体内表达,用纯化蛋白免疫小鼠获得抗人LOC401296蛋白血清,ELISA检测抗血清效价达1∶64 000,Western印迹证实LOC401296真核表达载体成功表达且抗血清特异性良好。结论获得LOC401296基因编码区全长序列,成功构建了LOC401296基因表达载体,分别在大肠杆菌和真核细胞内实现LOC401296蛋白原核表达和真核表达,获得小鼠抗人LOC401296蛋白抗血清,为LOC401296基因功能研究奠定了基础。 沈丽萍 陈虹 张学清 周建平 林仲武 王治东 陈英关键词:原核表达 真核表达 蛋白纯化 抗血清 全发根DNA损伤彗星电泳检测方法的建立 背景:鉴于目前反恐斗争及核事故应急的需要,急待快速灵敏而又取材方便的新检测方法来替代需时较长的染色体金标准方法,对现场大批量受照人员做出快速分类,以利临床有针对性地进行治疗。彗星电泳是一个快速灵敏准确的检测DNA损伤的方... 曾发贵 王治东 汪传高 张学清 陈英关键词:电离辐射 彗星电泳 DNA损伤 生物剂量计 代谢工程方法构建苯丙氨酸生物工程菌株 苯丙氨酸生物台成途径中的关键酶DAHP合成酶(DS)、分支酸变位酶/预苯酸脱水酶(CM/PD)、氨基转移酶(AT),分别由基因aroG,pheA,TyrB编码.本研究通过代谢工程方法构建苯丙氨酸生物工程菌株.在基因序列同... 刘云 张学清 王世春 徐琪寿 马立人文献传递 RPS27L基因作为辐射损伤标志物的研究 2015年 以人外周血为研究对象,研究照射后RPS27L基因的时间效应和剂量效应以及本底水平,探究其作为辐射损伤早期生物标志物的可行性。采集3名健康成人外周血,利用γ射线对其进行照射至吸收剂量分别为0、0.5、1、2、4、6和10 Gy,受照后37℃培养2、4、8、12和24 h,利用实时荧光定量PCR检测RPS27L基因的表达变化,并分析在37个健康人个体中的本底水平。结果显示,受照后的4、8、12和24 h RPS27L基因表达变化显著,而且具有很好的剂量依赖关系;在不同年龄和性别的个体中RPS27L本底水平相对稳定。因此,RPS27L基因具有作为新的辐射损伤标志物的潜力。 李孝鑫 扈江伟 张学清 沈丽萍 李琳 常诚 王治东 陈英关键词:核辐射 基因表达变化 实时荧光定量PCR 生物标志物 彗星图像迭代双阈值自动分割 彗星图像的自动分析能够快速、准确的获取多个彗星指标,这有助于提高彗星实验的分析速度和实验结果的准确度、可比度。彗星轮廓的合理分割是后续分析各项指标的前提,由于彗星尾部灰度值较低、且与背景对比度差,导致彗星轮廓自动分割的困... 闫学昆 陈英 杜杰 张学清关键词:彗星实验 图像分割 文献传递 辐射诱导分子lnc-RI稳定敲低细胞系建立及其功能 2016年 制备lnc-RI干涉表达的慢病毒颗粒,建立lnc-RI稳定下调的He La细胞系,探索lnc-RI对细胞辐射敏感性的作用。首先将lnc-RI特异性干涉序列插入干涉表达载体p GLV2中,并制备慢病毒颗粒;然后,将慢病毒颗粒感染He La细胞,建立lnc-RI稳定下调的细胞系,并通过RT-PCR检测不同干涉序列对lnc-RI表达的干涉效果;最后,通过平板克隆形成实验分析lnc-RI表达下调对He La细胞放射敏感性的影响。结果显示,成功制备了携带lnc-RI干涉序列的慢病毒颗粒,并成功感染He La细胞,通过RT-PCR实验鉴定获得两株lnc-RI稳定敲低细胞系。克隆形成实验发现,与对照相比,lnc-RI敲低的He La细胞系的放射敏感性增加。因此,初步证实lnc-RI表达下调增加He La细胞放射敏感性。 常诚 沈丽萍 张学清 李琳 李孝鑫 王治东 周平坤关键词:慢病毒 RNA干涉 彗星图像迭代双阈值自动分割 彗星图像的自动分析能够快速、准确的获取多个彗星指标,这有助于提高彗星实验的分析速度和实验结果的准确度、可比度。彗星轮廓的合理分割是后续分析各项指标的前提,由于彗星尾部灰度值较低、且与背景对比度差,导致彗星轮廓自动分割的困... 闫学昆 陈英 杜杰 张学清关键词:彗星实验 图像分割 文献传递 POLH mRNA作为辐射损伤分子生物标志物的可行性研究 被引量:1 2015年 目的:研究受γ射线照射后人外周血中POLH mRNA的表达变化,为确立POLH mRNA作为新的辐射损伤分子生物标志物提供实验依据。方法:采取3名健康成人的外周血,利用^(60)Coγ放射源分别对其进行0.5、1、2、4、6、10 Gy照射,在照射后2、4、8、12和24 h收集各个剂量组受试者全血,提取总RNA,利用TaqMan探针实时定量PCR法,检测POLH mRNA的相对表达量。另收集30名不同年龄段(男女各占一半)的健康人外周血作为本底组,检测POLH mRNA在不同个体间的表达差异。结果:照射后2 h,仅10 Gy照射组POLH mRNA表达增加,其余各照射组无显著变化;照射后4、8、12和24 h,在0~2 Gy范围内,POLH mRNA表达量随照射剂量的增加而增加,呈现明显的剂量依赖效应,大于2 Gy照射后增加趋势接近饱和。照射后4~12 h随时间的增加表达量也不断增加,于12 h达到峰值。在对健康人群本底表达水平的分析中发现,POLH mRNA表达水平不受性别、年龄影响,在不同个体间相对均一,波动范围小。结论:POLH mRNA可由为辐射诱导表达,在一定时间和剂量范围内呈现明显的剂量依赖关系,且在不同个体之间本底表达水平相对均一,具备作为辐射损伤分子生物标志物的潜力。 李琳 李孝鑫 林仲武 扈江伟 张学清 沈丽萍 常诚 陈英 葛银林 王治东关键词:分子生物标志物 实时定量PCR 条件必需氨基酸对放射损伤大鼠血浆蛋白的影响 被引量:2 2002年 观察条件必需氨基酸对放射损伤大鼠血浆蛋白的影响。以雄性Wistar大鼠 6 9只 ,普通饲料喂养 6天 ,随机分成A、B、C、D四组 ,A、B、C组各 2 0只、D组 9只。A、B、C三组动物均接受 6 .5Gy的γ线全身照射 ,D组动物不照射。照射后在A组饲料中添加 3%精氨酸 +5 %牛磺酸 +1%谷氨酰胺 ;B组饲料中添加与A组等氮量的甘氨酸 (10 .91% ) ;C组及D组仍喂普通饲料。照射后 7及 14天测血浆总蛋白、白蛋白、前白蛋白、纤维结合蛋白。结果显示A组在饲料摄入量、体重及血浆总蛋白、白蛋白、前白蛋白、纤维结合蛋白水平等方面均优于B组及C组。提示饲料中增加条件必需氨基酸含量可以改善进食 ,促进体重恢复及蛋白质合成 。 高红军 胡小电 张学清 徐琪寿关键词:血浆蛋白