张其威 作品数:34 被引量:127 H指数:4 供职机构: 南方医科大学公共卫生与热带医学学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省社会发展领域科技计划项目 广东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 生物学 更多>>
人3型腺病毒广州分离株基因组的进化分析 被引量:4 2007年 目的研究人3型腺病毒(human adenovirus type 3,HAdV-3)全基因组序列的基本特征并进行基因组的进化分析。方法取患儿鼻咽分泌物进行病毒分离,用中和试验和PCR进一步鉴定分型;克隆酶切片段并测序,利用软件对腺病毒基因组蛋白进行进化树分析。结果分离得到2株HAdV-3,基因组全长分别为35273bp和35269bp,2株均含有39个DNA编码序列和2个RNA编码序列。非编码区均保守,存在回文序列和反转重复序列。进化分析表明HAdV-3及其他B组腺病毒与猿腺病毒21型具有更近的进化关系。结论获得广州地区分离的2株HAdV-3,基因组全长35273bp和35269bp;人B组腺病毒与猿腺病毒存在一定的进化关系。 周荣 苏晓波 张其威 曾其毅 朱冰 张楚瑜 吴后波 吴灶和 龚四堂关键词:基因组 肠出血型大肠埃希菌O157:H7 espF基因缺失株和回补株的构建 被引量:1 2015年 目的利用Red同源重组系统敲除肠出血型大肠埃希菌的esp F基因及其核苷酸片段;建立以p BAD 33质粒为载体的esp F基因回补实验平台。方法设计1对同源臂引物扩增卡那霉素抗性打靶片段,将抗性打靶片段电转入含有PKD46质粒的EDL933w,在PKD 46介导的重组系统帮助下,打靶片段和菌体esp F基因发生同源重组,PCR和测序验证;PCR扩增esp F及其核苷酸片段的整个ORF区序列,将其克隆入p BAD33质粒,分别将重组质粒转入相应的缺失株,以构建出相应的回补突变株。采用RT-PCR的方法验证在相应的回补突变株中esp F及其核苷酸片段是否转录。结果构建了esp F基因及其核苷酸片段缺失的EHEC O157:H7 EDL933w突变菌株和相应的回补株,且esp F基因及其核苷酸片段在回补株中均发生转录。结论本研究运用Red重组系统构建了肠出血型大肠埃希菌O157:H7 esp F基因缺失株,并建立以p BAD33质粒为载体的EHEC O157:H7基因回补方法,为进一步研究肠出血型大肠埃希菌中esp F基因的调控机制奠定了基础。 华颖 孙琦 王湘雨 杜艳丽 邵娜 张其威 赵卫 万成松关键词:同源重组 突变株 我国新发和再现的人14、55和7型腺病毒:新的挑战? 赵素慧 周杰 万成松 张其威 Donald Seto 京舒娉 曹彬 王长兵 朱冰 陈翊 柯昌文 邹丽蓉肠出血型大肠埃希菌O157:H7 ppk基因缺失株的构建及其生物学特性分析 被引量:2 2014年 目的利用Red重组系统构建肠出血型大肠埃希菌(EHEC)O157:H7 ppk基因缺失株,并研究其生物特性。方法设计并合成一对同源臂引物,每条引物5'端与ppk基因同源,3'端与卡那霉素抗性基因同源,扩增卡那霉素抗性基因片段;制备含有pKD46质粒的EHEC O157:H7 EDL933w感受态细菌,然后将该抗性基因片段电击转化入制备的感受态菌株中;利用pKD46介导的Red重组系统,通过同源重组替换EHEC O157:H7 EDL933w ppk基因,PCR和测序验证;通过革兰染色、测D600值、吉姆萨染色比较EHEC O157:H7 EDL933w野生株和突变株的形态结构、生长能力和黏附性。结果构建了ppk基因缺失并含有卡那霉素抗性的EHEC O157:H7 EDL933w突变菌株(EHEC O157:H7 EDL933wΔppk),初步探索了EHEC O157:H7 EDL933w野生株和突变株的生物学特性。结论本研究运用Red重组系统构建了肠出血型大肠埃希菌O157:H7 ppk基因缺失株,为进一步研究肠出血型大肠埃希菌中ppk基因的调控机制奠定了基础。 韩朋 孙琦 赵素慧 张其威 万成松关键词:EHEC O157 H7 RED重组系统 人呼吸道合胞病毒荧光定量PCR试剂盒及其检测方法 本发明公开了一种人呼吸道合胞病毒(HumanRespiratory Syncytial Virus,HRSV)荧光定量PCR试剂盒及其检测方法,该试剂盒包括RNA提取液、逆转录酶、RNA酶抑制剂、逆转录反应液、标准阳性模... 张楚瑜 张其威 游上游文献传递 2010年冬-2011年春广州地区儿童腺病毒的分子流行病学研究 张其威 赵素慧 朱冰 王长兵 朱利 赵卫 万成松新发急性呼吸道疾病病原体:人14、55型腺病毒的基因组学研究 本研究从2010年10月急性化脓性扁桃体炎患儿体内分离出中国第一株14型腺病毒,并完成了全基因组测序;分析表明,该病毒属于人55型腺病毒为11型和14型腺病毒基因组重组的病毒。 张其威 曹彬 朱冰 王长兵 陈翊 赵素慧 万成松关键词:腺病毒 全基因组 文献传递 肠出血型大肠埃希菌O157∶H7 EspF蛋白诱导细胞凋亡的研究 周莹 王春晖 张其威 万成松新发急性呼吸道疾病病原体:人14型、55型腺病毒的基因组学研究 张其威 曹彬 朱冰 王长兵 陈翊 赵素慧 万成松大肠杆菌0157(:)H7EspF蛋白诱导细胞凋亡的研究 本文采用重叠延伸PCR技术将EHEC 0157:H7毒力岛LEE上的espF基因N端核苷酸序列缺失,克隆到自杀质粒pCVD442,通过转化、转移、同源重组、抗性筛选、PCR和测序鉴定,构建EHEC 0157:H7 esp... 周莹 王春晖 张其威 万成松关键词:大肠杆菌 蛋白表达 细胞凋亡 基因缺失 文献传递